Erzeugung von Neuronen und Gliazellen aus humanen induzierten pluripotenten Stammzell-abgeleiteten Embryoidkörpern
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Neurowissenschaften
0 Aufrufe • 4:00 Min. • July 8th, 2025
Nehmen wir Embryoidkörper oder EBs, die aus menschlichen induzierten pluripotenten Stammzellen gewonnen werden. Diese EBs setzen sich aus drei Keimblättern zusammen.
Die EBs werden in eine matrixbeschichtete Kulturschale mit einem geeigneten Medium überführt und inkubiert.
Die Matrix ermöglicht es, dass die EBs an der Kulturschale befestigt werden können.
Die Wachstumsfaktoren und Nährstoffe im Medium erleichtern es den ektodermalen Zellen der EBs, neuroepitheliale Aggregate zu bilden, die in einem kreisförmigen Muster angeordnet sind, das als Rosette bezeichnet wird.
Die Rosettenfragmente abschneiden und von der Form lösen.
Sammle die Fragmente und drehe sie nach unten.
Entsorgen Sie den Überstand und suspendieren Sie die Fragmente erneut.
Bewegen Sie die Fragmente mit einer Pipette auf und ab, um sie zu dissoziieren.
Geben Sie die gewünschte Anzahl von Zellen in eine matrixbeschichtete Well-Platte, die ein Differenzierungsmedium enthält.
Die Bestandteile des Differenzierungsmediums erleichtern es den Neuroepithelzellen, sich in voll funktionsfähige Neuronal- und Gliazellen, die primären Zellen des Nervensystems, zu verwandeln.
Am zweiten Tag aspirieren Sie die Standard-Matrix-Bes
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