Verbesserung der Stammzelldifferenzierung mit einer transienten DMSO-Behandlung

Beginnen Sie mit einer Multi-Well-Platte, die adhärente humane pluripotente Stammzellen mit der Fähigkeit zur Differenzierung mehrerer Abstammungslinien enthält.

Führen Sie ein Stammzellmedium ein, das Dimethylsulfoxid oder DMSO enthält.

DMSO dringt in die Zellen ein und verhindert das Fortschreiten des Zellzyklus von der Gap-1- oder G1-Phase, einer Anfangsphase des Zellzyklus, zur Synthese- oder S-Phase.

Dadurch entsteht eine einheitliche Population von Zellen in der G1-Phase, wodurch ihre Differenzierungsfähigkeit verbessert wird.

Ersetzen Sie das Medium durch ein nährstoffreiches ektodermales Differenzierungsmedium, das Inhibitoren der BMP- und TGF-β Signalwege enthält.

Diese Inhibitoren binden an spezifische ALK-Rezeptoren auf den Stammzellen, blockieren die BMP- und TGF-β-Signalwege und verhindern deren Differenzierung in Endoderm- und Mesoderm-Vorläufer.

Dies ermöglicht die selektive Differenzierung von G1-gesperrten Stammzellen in ektodermale Vorläufer, die über eine neuronale Differenzierungsfähigkeit verfügen.

Ersetzen Sie das Medium regelmäßig durch ein frisches Medium, um den Nährstoff- und Differenzierungsfaktorspiegel aufrechtzuerhalten und das Überleben der Zellen zu