Präparation von zerebralen Endotheltuben aus parenchymalen Arteriolen der Maus

Befestigen Sie ein Mäusegehirn mit der Bauchseite nach oben in einer mit Silikonpolymer beschichteten Schale, die Puffer enthält.

Präparieren Sie einen Gewebeschnitt von der Hemisphäre um die mittlere Hirnarterie (MCA), wobei sich das obere Gewebesegment über den Verzweigungspunkt vom Willis-Kreis hinaus erstreckt.

Befestigen Sie das Gewebe mit dem MCA nach oben.

Entfernen Sie die Pia mater mit den Arteriolen, die von der MCA abzweigen.

Befestigen Sie die Pia Mater mit den Arteriolen. Präparieren Sie die Arteriole und entfernen Sie das umliegende Gewebe. Verwerfen Sie alle distalen Äste.

Inkubieren Sie die Arteriole in einem proteolytischen Enzymcocktail, um die teilweise Verdauung des Segments zu erleichtern.

Ersetzen Sie die Enzyme durch einen Puffer und überführen Sie das verdaute Segment in eine Kammer mit Puffer auf einem Mikroskoptisch, der mit einer Verreibpipette ausgestattet ist.

Pipettieren Sie die Arteriole wiederholt, um die gelockerten Adventitien und glatten Muskelzellen zu entfernen, was zu einer intakten Röhre mit arteriolären Endothelzellen führt.

Legen Sie die ventrale Hirnseite nach oben in eine Kammer mit kalter Dissektionslösung, um parenchymale Arteriolen zu i