Erzeugung eines Blut-Hirn-Schranken-Chips unter Verwendung von iPSC-abgeleiteten Vorläuferzellen

Man nehme einen mikrofluidischen Chip mit überlagerten, matrixbeschichteten Kanälen, die durch eine poröse Membran getrennt sind.

Seet iPSC-abgeleitete neurale Vorläuferzellen im oberen Kanal. Inkubieren Sie, um die Zelladhärenz zu gewährleisten, und waschen Sie sie dann, um die nicht gebundenen Zellen zu entfernen.

Als nächstes säen Sie iPSC-abgeleitete mikrovaskuläre Endothelzellen des Gehirns im unteren Kanal.

Invertieren Sie den Chip und inkubieren Sie ihn, um die Endothelzellen an der Membranseite des unteren Kanals zu befestigen.

Drehen Sie als Nächstes den Chip um, um Zellen an der unteren Seite des Kanals zu befestigen und eine einschichtige röhrenartige Struktur zu bilden. Waschen Sie beide Kanäle mit zellspezifischen Medien.

Kontinuierlich fließt ein neuronales Differenzierungsmedium im oberen Kanal und ein Endothelzellmedium im unteren Kanal.

Endothelzellen nutzen Wachstumsfaktoren vom Medium bis zur Reife und bilden Tight Junctions, die einem Blutgefäß ähneln und die Blutseite bilden.

Neurotrophe Faktoren treiben die Differenzierung von neuralen Vorläuferzellen in verschiedene Gehirnzellen voran, die die Gehirnseite bilden. Diese Zellen interagieren mit den Endothelzell