Optische Aufzeichnung der neuronalen Aktivität in Hirnschnitten, die mit einem spannungsempfindlichen Farbstoff gefärbt wurden

Nehmen Sie eine immobilisierte Maushirnschnitte, die mit einem spannungsempfindlichen Farbstoff oder VSD gefärbt ist, fluoreszierenden Molekülen, die sich in die neuronale Membran integrieren und auf Änderungen des Membranpotentials reagieren.

Platzieren Sie das Slice in einer Aufnahmekammer.

Installieren Sie die Erdungselektrode für eine Referenz der Basisspannung.

Positionieren Sie anschließend die Stimulations- und Aufzeichnungselektroden auf der Scheibe.

Legen Sie einen elektrischen Impuls an.

Der Puls stimuliert die Neuronen und löst die spannungsgesteuerte Öffnung des Natriumkanals und den Einstrom von Natriumionen aus, was zu einer Änderung des Membranpotentials führt.

Dadurch wird ein Aktionspotential induziert, das von der Aufzeichnungselektrode gemessen wird, und die fluoreszierenden Eigenschaften des VSD verändert.

Setzen Sie die Gehirnscheibe einer bestimmten Wellenlänge aus, um den VSD anzuregen und die Fluoreszenzemission auszulösen.

Nach der Stimulation schließen sich die Natriumkanäle, während sich die spannungsgesteuerten Kaliumkanäle öffnen, was den Ausfluss von Kaliumionen fördert.

Dadurch verändert sich das Membranpotential wieder und damit die Fluoreszenz des V