Bestimmung einer Test-Wachstumshormon-Wirkung auf Kisspeptin-Neuronen mit einer Ganzzell-Patch-Klemme
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Neurowissenschaften
0 Aufrufe • 5:28 Min. • July 8th, 2025
Sichern Sie einen transgenen Hypothalamusschnitt der Maus in einer mit aCSF perfundierten Aufnahmekammer.
Die Scheibe enthält fluoreszierende Fusionsprotein-exprimierende Kisspeptin-Neuronen, die für die Regulation des Fortpflanzungssystems entscheidend sind.
Eine Mikropipette, bestehend aus einer Aufzeichnungselektrode, wird in eine interne Lösung eingebaut
.Lokalisieren Sie mikroskopisch ein fluoreszierendes Kisspeptin-Neuron.
Üben Sie positiven Druck auf die Pipette aus und schieben Sie sie in Richtung des Zielneurons. Bei Kontakt entsteht durch den Druck eine Vertiefung auf der neuronalen Membran.
Üben Sie einen kurzen Unterdruck aus, wodurch eine hochohmige Abdichtung zwischen der Mikropipette und der Membran entsteht.
Stellen Sie die Haltespannung auf das physiologische Ruhepotential des Neurons ein, um genaue Messungen zu ermöglichen.
Wenden Sie kurze Unterdruckimpulse an, um die Membran zu durchbrechen und eine Ganzzellkonfiguration herzustellen.
Bestätigen Sie die Lebensfähigkeit des Neurons, indem Sie die Parameter überwachen.
Führen Sie ein Test-Wachstumshormon ein, das Signalwege auslöst und Veränderungen des Membranpotentials des Neurons induziert.
Messen Sie die Verän
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