Lichtevozierte postsynaptische Reaktionen in Neuronen von Netzhautschnitten von Mäusen

Nehmen Sie einen dunkeladaptierten Netzhautschnitt einer Maus in einer Aufnahmekammer in einem dunklen Raum. Die Netzhaut sitzt auf einer stützenden künstlichen Unterlage, die über ein Deckglas gelegt ist. Perfusionieren Sie die Scheibe mit aCSF.

Das retinale neuronale Netzwerk umfasst Photorezeptoren, die synaptisch mit bipolaren Zellen verbunden sind, die mit Ganglienzellen synapsieren.

Positionieren Sie eine Aufnahmepipette in der Nähe der Netzhaut.

Üben Sie unter einem Mikroskop einen positiven Druck aus, während Sie sich einer Zielganglienzelle nähern.

Schalten Sie auf Unterdruck um, um ein Membranpflaster einzuziehen, und brechen Sie es dann, um eine Kontinuität mit dem Zytoplasma herzustellen.

Im Dunkeln bleibt die Photorezeptormembran depolarisiert, was zur Freisetzung von Neurotransmittern führt.

Neurotransmitter, die an bipolare Zellrezeptoren binden, lösen den Verschluss von Kationenkanälen aus und hemmen die Signalübertragung.

Wenden Sie einen Lichtimpuls an, um die Photorezeptoren zu hyperpolarisieren. Die verminderte Freisetzung von Neurotransmittern löst die Öffnung der Kationenkanäle in bipolaren Zellen aus.

Der

Kationeneinstrom induziert die Freisetzung von Neurotr