im lebenden Organismus Calcium-Imaging mit synaptisch lokalisierten Calciumsensoren in Drosophila melanogaster
JoVE-Enzyklopädie der Experimente
Neurowissenschaften
0 Aufrufe • 3:39 Min. • July 8th, 2025
Fixiere eine Fliege, deren Gehirn in einer Bildgebungskammer freigelegt ist.
Die Fliege exprimiert einen genetisch kodierten Kalziumindikator oder GECI, der in den Dendriten des Pilzkörpers oder MB-Neuronen lokalisiert ist.
Verbinden Sie das Außenzelt mit elektrischen Drähten und positionieren Sie eine Nadel zur Geruchsabgabe in der Nähe der Antenne.
Geben Sie ein Puffertröpfchen auf das exponierte Gehirn, positionieren Sie die Fliege unter einem Mikroskop und verbinden Sie die Nadel mit einem Geruchsabgabesystem.
Stimulieren Sie den GECI und geben Sie einen Geruchsreiz ab.
Der Geruchsstoff bindet an die sensorischen Neuronenrezeptoren der Antenne und erzeugt Aktionspotentiale.
Die Aktionspotentiale breiten sich von den sensorischen Neuronen zu den Projektionsneuronen aus, induzieren die Freisetzung von Neurotransmittern und erleichtern den Kalziumeinstrom und die GECI-Fluoreszenz in den postsynaptischen MB-Neuronen.
Wiederholen Sie den Vorgang mit einem zweiten und dritten Odorant.
Wenden Sie anschließend den ersten Duft mit einem Elektroschock und den zweiten ohne auf.
Geben Sie schließlich die drei Gerüche ohne Stöße ab. Zeichnen Sie die Fluoreszenz auf.
Eine im Vergleich zu den
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