Implantation eines Elektrodenarrays und einer optischen Faser in den Hippocampus der Maus

Nehmen wir eine bewegungsunfähige, betäubte Maus, deren Schädel freigelegt ist.

Bohren Sie die Löcher rostral zur Koronalnaht und oberhalb des Kleinhirns.

Führen Sie zur Implantatstabilisierung Edelstahlschrauben in die Bohrstellen rostral zur Koronalnaht ein.

Setzen Sie die Masse- und Referenzschrauben über dem Kleinhirn ein, um elektrisches Rauschen zu minimieren.

Decken Sie diese Schrauben mit Zement ab, um Muskelartefakte während der Aufnahmen zu vermeiden. Befestigen Sie die anderen Schrauben mit Zement.

Bohren Sie Löcher in den Schädel und legen Sie das Hippocampusgewebe frei. Tragen Sie Kochsalzlösung auf, um die Hydratation des Gewebes aufrechtzuerhalten.

Senken Sie die optische Faser und das Elektrodenarray durch die Löcher in den Hippocampus ab, um eine optische Stimulation und eine gezielte Aufzeichnung der neuronalen Aktivität zu ermöglichen.

Tragen Sie warmes Wachs um die Implantationsstelle auf, um das Gewebe zu schützen.

Umhüllen Sie das Implantat und den Schädel mit Zement, um sie zu stabilisieren.

Löten Sie die Erdungs- und Referenzdrähte an das Elektrodenarray, um eine stabile elektrische Verbindung zu gewährleisten.

Decken Sie die Drähte mit Zement ab.

Bringen Sie die Maus zur Wiederherstellung in ihren Käfig zurück.

Beginnen Sie damit, vier Löcher mit einem Durchmesser von 0,8 Millimetern in den gereinigten Schädel des anästhesierten Tieres zu bohren. Bohren Sie zwei Löcher rostral zur koronalen Naht und zwei oberhalb des Kleinhirns. Platzieren Sie anschließend Knochenschrauben aus Edelstahl zur Erdung und Stabilisierung des Implantats. Positionieren Sie die Erdungsschraube, die mit einem Kupferdraht verbunden ist, über dem Kleinhirn. Decken Sie die Schraube vollständig mit Zement ab, um Muskelartefakte während der elektrophysiologischen Aufzeichnungen zu vermeiden.

Baue einen Zementring, der alle Schrauben verbindet. Führen Sie eine Kraniotomie oberhalb der Implantationsstelle durch. Tragen Sie dann etwa 1 Mikroliter sterile Kochsalzlösung auf die Oberfläche des Gehirngewebes auf. Verwenden Sie die Stereotax, um das Drahtarray langsam in die Kraniotomie abzusenken. Tragen Sie dann etwa 5 Mikroliter warmes flüssiges Wachs über die Implantationsstelle auf, um das Hirngewebe zu schützen. Tragen Sie Zement um das Drahtgitter auf und bedecken Sie den Schädel mit Zement. Tragen Sie einen Tropfen Flussmittel auf den vorgelöteten Erdungsdraht oder den vorgelöteten Draht auf, der mit der Erdungsschraube verbunden ist, und schmelzen Sie die Drähte mit einer Lötmaschine zusammen. Decken Sie zum Schluss das gesamte Erdungskabel mit Zement ab.