Name: Intravitrealen Injektion zur Einrichtung Ocular Krankheiten Modell (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2007-10-01T12:45:27.000+00:00
Duration: 5 min 37 s
Description: Lernen Sie die intravitreale Injektionstechnik zur Erstellung von Augenerkrankungsmodellen. Diese Methode zeigt, wie Linsenschäden und Blutungen durch den richtigen 45-Grad-Winkel vermieden werden.

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Die Studie des Glaukoms in diesem Labor wird von der National Glaucoma Research von American Health Assistant Foundation unterstützt.

<ol><li> Bereiten Sie die Glaspipetten mit Pipetten Abzieher, verbinden Sie es zu einem 1ml Spritze, und versiegeln Sie die Verbindung mit Parafilm. Ziehen Sie 2 ml der Lösung in die Spitze der Pipetten und erhalten für die Injektion bereit. </li><li> Betäuben die Ratte durch intraperitoneale Injektion von Ketamin (80mg/kg) und Xylazin (8mg/kg) (Volumen-Verhältnis bei 2:1). </li><li> Einen Tropfen von 0,5% Alcaine der Ratte Augen, als topische Anästhetika vor intravitrealen Injektion. </li><li> Position der Ratte und setzen die überlegene nasalen Bereich des Auges. </li><li> Verwenden Sie eine 30-Gauge-Nadel zu durchstechen die überlegene nasal Sklera auf der Ebene der par plana. Berühren Sie nicht die Augenmuskeln und Gefäße. </li><li> Geben Sie dem Augapfel leichten Druck loszuwerden eine kleine Menge von Glaskörper durch die Punktionsloch aus der hinteren Kammer. </li><li> Führen Sie die Spitze der Glaspipette durch die Punktionsloch in einem 45 °-Winkel durch die Lederhaut in den Glaskörper. Inject 2 ml Lösung in die hintere Kammer und halten in für etwa ein paar Sekunden, dann entfernen Sie vorsichtig die Nadel. Berühren Sie das Objektiv und intraokularen Gefäße. </li><li> Nach intravitrealen Injektion, gelten Augenheilkunde Tobrex Salbe auf die Ratte Auge um Infektionen zu vermeiden. </li></ol>

<ol><li>Chiu, K., Lam, T. T., Ying Ku, W. W., Caprioli, J., Kwong Kwong, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Calpain+and+N-methyl-d-aspartate+%28NMDA%29-induced+excitotoxicity+in+rat+retinas%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Research%22%5BJournal%5D)">Calpain and N-methyl-d-aspartate (NMDA)-induced excitotoxicity in rat retinas.</a> Brain Research. 1046, 207-215 (2005).</li>
<li>Fisher, D., Pavlidis, M., Thanos, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cataractogenic+lens+injury+prevents+traumatic+ganglion+cell+death+and+promotes+axonal+regeneration+both+in+vivo+and+in+culture%5BTitle%5D)+AND+%22Investigative+Ophthalmology+%26+Visual+Science%22%5BJournal%5D)">Cataractogenic lens injury prevents traumatic ganglion cell death and promotes axonal regeneration both in vivo and in culture.</a> Investigative Ophthalmology & Visual Science. 41, 3943-3954 (2000).</li>
<li>Ji, J. -Z., Elyaman, W., Yip, H. K., Lee, V. W. H., Yick, L. -W., Hugon, J., So, K. -F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((CNTF+promotes+survival+of+retinal+ganglion+cells+after+induction+of+ocular+hypertension+in+rats%3A+the+possible+involvement+of+STAT3+pathway%5BTitle%5D)+AND+%22European+Journal+of+Neuroscience%22%5BJournal%5D)">CNTF promotes survival of retinal ganglion cells after induction of ocular hypertension in rats: the possible involvement of STAT3 pathway.</a> European Journal of Neuroscience. 19, 265-272 (2004).</li>
<li>Lam, T. T., Abler, A. S., Kwong, J. M. K., Tso, M. O. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((N-Methyl-D-Aspartate+%28NMDA%29-Induced+Apoptosis+in+Rat+Retina%5BTitle%5D)+AND+%22Investigative+Ophthalmology+%26+Visual+Science%22%5BJournal%5D)">N-Methyl-D-Aspartate (NMDA)-Induced Apoptosis in Rat Retina.</a> Investigative Ophthalmology & Visual Science. 40, 2391-2397 (1999).</li>
</ol>

Die Tiere wurden nach dem Protokoll für die Verwendung von tierischem in der Forschung durch den Ausschuss für den Einsatz von lebenden Tieren in Forschung und Lehre (CULATR) der University of Hong Kong und der Association for Research in Vision and Ophthalmology Statements für das genehmigte behandelt Verwendung von Tieren in Ophthalmic and Vision Research.

Gute intravitrealen Injektion ist nützlich für die Gründung Tiermodell sowie direkte intraokulare Behandlung. Erstens sollte der Injektionsstelle nicht stören Netzhaut-Struktur. Zweitens, Blutungen zu vermeiden, um das Risiko einer Infektion zu verringern. Drittens Objektiv sollte unangetastet an traumatische Katarakt zu vermeiden. Am wichtigsten ist es, die Unterbrechung des normalen Auges Struktur zu reduzieren.

<table><tbody><tr><td>Operationsmikroskop </td><td>Olympus Corporation</td><td>OME</td><td></td></tr><tr><td>Glaspipetten </td><td>World Precision Instruments, Inc.</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Pipettenzieher </td><td>David Kopf Instruments</td><td></td><td></td></tr><tr><td>1-ml-Spritzen</td><td></td><td></td><td>Einmalgebrauch</td></tr><tr><td>30-G-Nadeln</td><td></td><td></td><td>Einmalgebrauch</td></tr><tr><td>Ketamin</td><td>Aldasan</td><td></td><td>Anästhetikum</td></tr><tr><td>Xylazin</td><td>Aldasan</td><td></td><td>Anästhetikum</td></tr><tr><td>Alcaine</td><td>Alcon</td><td></td><td>0,5 % Proparakainhydrochlorid</td></tr><tr><td>Tobrex</td><td>Alcon</td><td></td><td>Salbe, 3 % Tobramycin.</td></tr></tbody></table>

intravitrealen injektion zur einrichtung ocular krankheiten modell

Intravitreous Injection for Establishing Ocular Diseases Model

Intravitreale Injektion ist eine weit verbreitete Technik in Visual Sciences Forschung. Es kann benutzt werden, um Tiermodelle mit Augenerkrankungen oder als direkte Anwendung der lokalen Behandlung zu etablieren. Dieses Video stellt, wie man einfache und kostengünstige Tools verwenden, um die intravitreale Injektion Vorgang zu beenden. Die Verwendung einer 1 ml Spritze, statt eines hemilton Spritze verwendet wird. Praktische Tipps, wie Sie geeignete Injektionsnadeln mit Glas-Pipetten mit perfekten Tipps, und wie man ganz einfach verbinden die Nadel der Spritze mit der Glaspipette dicht zusammen, gegeben sind. Zur Durchführung einer guten intravitrealen Injektion, gibt es drei Aspekte zu beachten: 1) an der Injektionsstelle sollte nicht stören Netzhaut Struktur, 2) Blutung sollte vermieden werden, um das Risiko einer Infektion zu verringern; 3) Objektiv sollte unangetastet an traumatische Katarakt zu vermeiden. Kurz gesagt, ist der wichtigste Punkt, um die Unterbrechung des normalen Auges Struktur zu reduzieren. Um zu vermeiden, Unterbrechung der Netzhaut, war die überlegene Nasenregion der Ratte Auge gewählt. Außerdem wurde der Einstichstelle der Nadel an der par planar, was etwa 1,5 mm von der Limbus-Region der Ratte Auge war. Eine kleine Menge des Glaskörpers wird sanft durch das Punktionsloch geschoben, um den Augeninnendruck vor der Injektion zu reduzieren. Mit dem 45 ° Einspritzwinkel, ist es weniger wahrscheinlich, dass traumatische Katarakt in der Ratte Auge verursachen, wodurch Komplikationen und der Einfluss von linsenförmigen Faktoren. Bei dieser Operation gab es kein Schneiden der Bindehaut und der Augenmuskeln, keine Blutungen. Mit schnellen und leichten Verletzungen, kann eine erfolgreiche intravitrealen Injektion in Minuten erledigt werden. Die Injektion gesetzt in diesem Protokoll beschriebenen ist spezifisch für intravitreale Injektion. Allerdings können die Methoden und Materialien vorgestellt hier auch für andere Injektionsverfahren in Drug-Delivery an das Gehirn, Rückenmark oder anderen Organen in kleine Säugetiere verwendet werden.

Intravitreale Injektion ist eine weit verbreitete Technik in Visual Sciences Forschung für Augenerkrankungen oder als direkte Anwendung der lokalen Behandlung. Dieses Video demonstriert ein Protokoll für die intravitreale Injektion mit einer 1 ml Spritze mit Glaspipette. Nützliche Tipps zum Vermeiden von massiven Blutungen und Linse beschädigen gegeben sind.

Intravitrealen Injektion zur Einrichtung Ocular Krankheiten Modell

Die intravitreale Injektion ist eine weit verbreitete Technik in der Forschung der Visuellen Wissenschaften. Sie kann zur Etablierung von Tiermodellen für Augenerkrankungen oder als ...

Hallo, ich bin TU vom Guso-Labor. Heute werde ich Ihnen zeigen, wie man eine intravitreäre Injektion durchführt, um ein Tiermodell zu erzeugen oder das Fortschreiten einer Augenerkrankung zu verhindern. Hier sehen Sie die schematische Darstellung.Um die Lage der Injektionsnadel im roten Auge zu zeigen. Die Nadel wird in das hintere Kammer unter einem Winkel von 45 Grad zur Narbenoberfläche eingestochen. Durch Verwendung dieses 45-Grad-Winkels können wir eine Verletzung der Linse vermeiden.Bei der intravitrealen Injektion führen wir die intraokulare Injektion und die Operation am Operationsmikroskop durch. Die Rötung wird durch ein Ketamin- und Xylazin-Cocktail-Anästhetikum beseitigt. Lokalanästhetikum und antibiotische Salbe werden ebenfalls verwendet.Wir verwenden Glasgefäße pro Tier, um die Injektion durchzuführen. Wir verwenden einen vorbereiteten Puller, um die Glasgefäße herzustellen. Anschließend müssen wir die sehr scharfe Spitze des Glasgefäßes entfernen.Wir können es mit 1 Million Spritzen verbinden. Wir versiegeln die Verbindungsstelle mit Parfüm. Dann können wir mit diesem Glasrohr zwei Mikroliter der Injektionslösung schön langsam aufziehen und das Rote unter das Mikroskop legen.Geben Sie einen Tropfen Lokalanästhetikum auf die Oberfläche und lassen Sie die überschüssige Flüssigkeit ablaufen. Verwenden Sie eine 30-G-Nadel, um durch die Sklera zu punktieren. Die Nadel steht senkrecht zur Skleraoberfläche, und nur die Nadelspitze wird eingeführt.Sie können sehen, dass aus dem Einstichloch etwas Vires austritt. Vorsichtig andrücken, um mehr Witches zu entfernen, sodass wir mehr Platz gewinnen. In der hinteren Augenkammer des roten Auges die Spitze des Glasperlpads unter einem Winkel von 45 Grad zur Narbenoberfläche in den Vire einführen.Vermeiden Sie eine Verletzung der Linse. Injizieren Sie langsam. Injizieren Sie keine Luftblase in das Es. Warten Sie einige Sekunden, bevor Sie die Nadel herausziehen.Dann Antibiotikasalbe auf das Auge auftragen. Die Hauptaufgabe bei der intravitrealen Injektion besteht darin, die Manipulation am Auge zu minimieren. Wir müssen intraokulare Blutungen, Linsenverletzungen und Netzhautablösungen vermeiden.

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Research

Forschung

JoVE Journal

Biology

Biologie

Dieses Video zeigt eine Methode zur Generierung eines Mausmodells der geprimten mykobakteriellen Uveitis (PMU) zur Untersuchung der postinfektiösen Uveitis. Bei der Induktion von PMU durch intravitreale Injektion von hitzeabgetötetem Mycobacterium tuberculosis bei einer Maus, die zuvor mit demselben Immungen immunisiert wurde, wird das Fortschreiten der chronischen Entzündung im Auge mittels Bildgebung und histopathologischer Untersuchung...

Ein Mausmodell der geprimten mykobakteriellen Uveitis zur Untersuchung der postinfektiösen Uveitis

Dieses Video demonstriert eine in vivo Bildgebungstechnik zum Nachweis und zur Quantifizierung von Augenentzündungen in einem Mausmodell der postinfektiösen Uveitis. Die Technik, die als optische Kohärenztomographie (OCT) bekannt ist, erzeugt hochauflösende Schnittbilder des Auges zur Beurteilung des Krankheitsverlaufs.

Optische Kohärenztomographie zur Beurteilung von Uveitis im Mausmodell

Quelle: Park, S. W., et al. Limbaler Zugang-Subretinale Injektion von viralen Vektoren für die Gentherapie im retinalen Pigmentepithel von Mäusen. J. Vis. Exp. (2015)Das Video beschreibt die Methode zur subretinalen Injektion von viralen Vektoren in das retinale Pigmentepithel (RPE) in einem Mausmodell. Es beschreibt das Verfahren von der Anästhesie und der Augenvorbereitung bis hin zur präzisen lentiviralen Vektorverabreichung, um die Genintegration und -expression im RPE sicherzustellen.

Subretinale Injektion von viralen Vektoren in das retinale Pigmentepithel in einem Mausmodell

Kaninchen werden häufig verwendet, um die Pharmakokinetik von intraokularen Arzneimitteln zu untersuchen. Wir beschreiben ein Verfahren zur Durchführung pharmakokinetischer Studien von intraokularen Arzneimitteln mit Kaninchenaugen.

Die Verwendung von Kaninchenaugen in pharmakokinetischen Studien von intraokulare Drugs

Hier zeigen wir einen neuartigen Ansatz zur Verwendung von hochauflösenden spectral-Domain optische Kohärenztomographie (HR-SD-OCT) Lieferung der Gen-Therapie-Agenten in den subretinalen Raum zu unterstützen, beurteilen seine areal Abdeckung und Photorezeptor Vitalität zu charakterisieren.

Höchste Auflösung Maus optische Kohärenztomographie, intraokulare Injektion in die retinale Gentherapie Forschung unterstützen

Wir beschreiben hier eine Methode der intravitrealen Injektion und der anschließenden bakteriellen Quantifizierung im Mausmodell der bakteriellen Endophthalmitis. Dieses Protokoll kann erweitert werden, um die Immunantworten des Wirts und die bakterielle und die Genexpression zu messen.

Intravitreale Injektion und Quantifizierung von Infektionsparametern in einem Mausmodell der bakteriellen Endophthalmitis

Dieses Protokoll beschreibt die Schritte zur Induktion der Primed Mycobacterial Uveitis (PMU) bei Mäusen. Diese Methode beschreibt die Schritte, um eine zuverlässige und robuste Augenentzündung im Mausmodellsystem zu erzeugen. Mit diesem Protokoll erzeugten wir uveitische Augen und entzündete Augengenossen von einzelnen Tieren zur weiteren Auswertung mit immunologischen, transkriptomischen und proteomischen Assays.

Primed Mycobacterial Uveitis (PMU) als Modell für postinfektiöse Uveitis

Intravitreale Injektionen wurden im Schafauge mit dem Ziel durchgeführt, eine viral vermittelte Gentherapie an die Netzhaut zu verabreichen.

Intravitreale Injektionen in das Schafauge

Dieses Protokoll beschreibt eine Technik zur intrakameralen Injektion bei Ratten unter Verwendung eines zentralen Hornhautschnitts und eines langen Tunnels in die Vorderkammer. Diese Injektionsmethode minimiert das Risiko einer versehentlichen Gewebeschädigung und verbessert dadurch die Präzision und Reproduzierbarkeit.

Intrakamerale Injektion bei Ratten mit geringem Risiko für Nebenwirkungen

Dieses Protokoll beschreibt eine einzigartige Technik, die einen transkonjunktivalen Ansatz verwendet, um Zugang zum Sehnerv der Ratte für Injektionen zu erhalten.

Transkonjunktivaler Zugang zur Injektion in den Sehnerv der Ratte

Diese Studie stellt eine Methodik für die Verabreichung von Therapeutika in die Netzhaut und die Sehnerven der erwachsenen Ratte vor. Darüber hinaus wird eine einzigartige Gewebeentnahmemethode für eine Top-Down-Entnahme des Sehnervs und der Netzhaut bei einer erwachsenen Ratte eingeführt.

Okuläre therapeutische Verabreichung und fortgeschrittene Gewebeentnahme bei erwachsenen Ratten

Lernen Sie die intravitreale Injektionstechnik zur Erstellung von Augenerkrankungsmodellen. Diese Methode zeigt, wie Linsenschäden und Blutungen durch den richtigen 45-Grad-Winkel vermieden werden.

Intravitrealen Injektion zur Einrichtung Ocular Krankheiten Modell

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