Untersuchung einer Hirnverletzung einer Zebrafischlarve mit großflächiger Rastertransmissionselektronenmikroskopie
JoVE-Enzyklopädie der Experimente
Neurowissenschaften
0 Aufrufe • 3:22 Min. • July 8th, 2025
Nehmen Sie in Harz eingebettete, chemisch fixierte ultradünne Hirnschnitte von gesunden und hirngeschädigten Zebrafischlarven, die auf einem Ein-Loch-Gitter montiert sind.
Die Schnitte sind mit Schwermetallen gefärbt, um den Bildkontrast bei der mikroskopischen Bildgebung zu verbessern.
Legen Sie das Gitter in einen Probenhalter und bringen Sie den Halter in die Mikroskopiekammer.
Richten Sie das Gitter unter der Elektronenkanone aus, wodurch ein Elektronenstrahl erzeugt wird.
Ein Array von elektromagnetischen Linsen und Spulen fokussiert den Elektronenstrahl auf die Abschnitte.
Verschieben Sie den Probenhalter, um die Schnitte in einem Rastermuster zu scannen.
Wenn der Elektronenstrahl die Gewebeschnitte durchläuft, streuen die gefärbten elektronendichten Bereiche mehr Elektronen, während die ungefärbten Bereiche die Elektronen übertragen.
Der Detektor sammelt diese Elektronensignale und erstellt so hochauflösende Bilder des Gehirns.
Im Vergleich zur Kontrolle weist das verletzte Gehirn phagozytäre Mikroglia auf, die zahlreiche intrazelluläre Einschlüsse enthalten, ein charakteristisches Merkmal der verletzungsinduzierten Neurodegeneration.
Um die Probe in das Rasterelektronenmikr
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