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Beginnen Sie mit einer immobilisierten, anästhesierten Maus mit rasiertem Kopf.
Tragen Sie eine Augensalbe auf und desinfizieren Sie die Kopfhaut mit Jod.
Entfernen Sie das überschüssige Jod und decken Sie die Maus mit einem chirurgischen Tuch ab.
Machen Sie einen Schnitt in der Mittellinie, um den Schädel freizulegen und die Wunde zu reinigen.
Markieren Sie einen Kreis auf einer Seite des Schädels, der auf die Hirnrinde abzielt.
Der Kortex enthält motorische und sensorische Neuronen, die für die Signalübertragung zwischen Gehirn und Körper entscheidend sind.
Bohren Sie kreisförmig durch den Schädelknochen über der Markierung und entfernen Sie dann den Knochenlappen, um die Hirnrinde freizulegen.
Positionieren Sie eine sterilisierte Impaktorsonde über der exponierten Stelle. Schlagen Sie die Sonde über das Gewebe, um hohen Druck zu erzeugen.
Dieser Druck führt zu einem Trauma in der Hirnrinde, stört die motorischen und sensorischen Neuronen und beeinträchtigt die Signalübertragung.
Reinigen Sie die Wunde und nähen Sie sie. Das Mausmodell mit Schädel-Hirn-Trauma ist bereit für weitere Experimente.
Um eine einseitige Kraniektomie durchzuführen, bestätigen Sie ein fehlendes Ansprechen auf das Einklemmen der Zehe in der anästhesierten Maus und fixieren Sie die Maus in einem stereotaktischen Rahmen. Tragen Sie mit einem sterilen Wattestäbchen eine antibiotische Augensalbe auf die Augen und eine Lösung auf Jodbasis auf den rasierten Kopfhautbereich auf. Entfernen Sie das Jod mit 70 % Ethanol und decken Sie das Tier mit einem gefensterten OP-Tuch ab.
Machen Sie einen 1,5 bis 2 Zentimeter großen Schnitt in der Mittellinie auf der Kopfhaut und verwenden Sie sterile Wattestäbchen, um die Wunde zu reinigen und die Faszie links von der Mittellinie bei Bregma zu reinigen. Verwenden Sie eine Impaktorsonde, um die Kraniektomiestelle zu identifizieren, und setzen Sie den stereotaktischen Referenzpunkt x gleich 0, y gleich 0 auf Bregma. Stellen Sie die Sonde seitlich auf zwei Millimeter links von der Mittellinie ein. Verwenden Sie einen chirurgisch sicheren Marker mit feiner Spitze, um einen Kreis mit einem Durchmesser von fünf Millimetern um den vermuteten Aufprallbereich zu markieren.
Heben Sie den Schlagkörper an, drehen Sie ihn aus der Position und vervollständigen Sie den 5-Millimeter-Kreis. Bringen Sie den Schlagkörper kurz wieder in Position, um die Genauigkeit des 5-Millimeter-Kreises zu überprüfen. Heben Sie dann den Schlagkörper an und drehen Sie ihn aus der Position und verwenden Sie ein Hochgeschwindigkeits-Mikromotor-Kit-Handwerkzeug, das mit einer runden Spitze eines 0,6- oder 0,8-Millimeter-Vogelbohrers ausgestattet ist, um bei maximaler Geschwindigkeit von 70 % bis 80 % ein offenes Loch in den Schädel zu bohren. Üben Sie leichten Druck auf den Schädel aus, während Sie entlang des 5 Millimeter großen Umfangsumrisses bohren, um diesen Rand zu verdünnen, und heben Sie den resultierenden Knochenlappen mit einer Pinzette an.
Das Durchbohren von Nahtlinien kann zusätzliche Schwierigkeiten bereiten, da der Knochen unterbrochen ist und zusätzlichen Druck erfordert. Blutgefäße können in enger Verbindung stehen, so dass Blutungsereignisse wahrscheinlich sind.
Um eine leichte Verletzung des kontrollierten kortikalen Aufpralls zu induzieren, reinigen Sie die Impaktorsonde mit einem sterilen Alkoholvorbereitungspad und bringen Sie die Impaktorsonde wieder in Position über dem freiliegenden Kortex. Senken Sie die Sonde ab, bis sie die Dura Mater-Oberfläche berührt, und markieren Sie diese Position als z gleich 0. Ziehen Sie den Kolben zurück, bewegen Sie sich auf z gleich minus 1 Millimeter, und entladen Sie den Kolben, um auf den Kortex aufzutreffen. Heben Sie sofort den Kolben an und bewegen Sie den Arm aus der Position, spülen Sie die Hirnrinde mit einem großzügigen Volumen Kochsalzlösung und verwenden Sie einfache unterbrochene Stiche und 5-0-Seidennaht, um den Schnitt auf der Kopfhaut zu schließen.