Matrixbasiertes Tumorinvasionsmodell unter Verwendung von Mikroglia-Glioblastom-Co-Kultur

Beginnen Sie mit der Zugabe einer kalten Suspension von Glioblastom- und Mikrogliazellen, die jeweils mit einem bestimmten Fluoreszenzfarbstoff gefärbt sind, in eine kalte Polymermatrixlösung.

Der kalte Zustand verhindert die vorzeitige Polymerisation der Matrix.

Übertragen Sie dann die Mischung in einen porösen Kammereinsatz innerhalb einer Kulturplatte.

Inkubieren, um eine Matrixpolymerisation zu ermöglichen, und ein Gel bilden, das die Zellen einbettet.

Geben Sie serumfreies Medium in die Einlage und serumhaltiges Wachstumsmedium in die Vertiefung darunter, dann inkubieren.

Die chemischen Faktoren im Serum fördern die Zellmigration in Richtung des serumreichen Mediums.

Darüber hinaus sezernieren Mikroglia Signalmoleküle, die mit Glioblastomzellen interagieren.

Dies verstärkt die Migration der Glioblastomzellen zur Unterseite des porösen Ansatzes, ähnlich wie bei der Wanderung von einem Tumor in das umliegende Gewebe.

Entfernen Sie die Zellen von der Oberseite der Kammer.

Fixieren Sie nun die restlichen Zellen mit einem Fixiermittel und waschen Sie sie mit Puffer ab. Die ausgeprägte Fluoreszenz der Zellen hilft, die Zellmigration zu verfolgen.

Tauen Sie den Matrix-Mix über Nacht