Beurteilung der Muskelkontraktion mit neuromuskulärer Blocker-Behandlung

Beginnen Sie mit einer Platte mit kultivierten myelinisierten Motoneuronen, muskelkontrollierenden Nervenzellen und Myotuben, mehrkernigen Muskelzellen.

Das Motoneuron ist über eine neuromuskuläre Verbindung (NMJ), eine Stelle für die Signalübertragung, mit dem Myotubus verbunden.

Calciumchlorid in die Vertiefung geben.

Beobachten Sie unter einem inversen Mikroskop für Live-Bilder und nehmen Sie einen Film auf.

Kalziumionen dringen in das Motoneuron ein und lösen die Freisetzung von Acetylcholin oder ACh, einem erregenden Neurotransmitter, aus.

Diese Neurotransmitter binden an ACh-Rezeptoren auf den Myotuben, wodurch Natriumionen eindringen und die Kontraktion der Myotuben ausgelöst wird.

Nehmen Sie den Film auf. Die Software generiert dann eine farbcodierte Zeit-Bewegungs-Grafik für die Myotubenkontraktionen, wobei Rot die schnellste Geschwindigkeit und Blau die langsamste Geschwindigkeit darstellt.

Führen Sie als Nächstes einen neuromuskulären Blocker ein, der an ACh-Rezeptoren bindet. Dies verhindert den Natriumeinstrom und schränkt die Kontraktionen der Myotuben ein.

Nehmen Sie den Film erneut auf. Eine Abnahme der roten Farbe deutet auf eine Verringerung der Myotubenkontraktionen hin.

Um die Kontraktionen der Myotuben auszulösen, fügen Sie 25 millimolare Calciumchlorid zu jeder Vertiefung der differenzierten neuromuskulären Verbindungszellen hinzu. Und innerhalb von ein bis zwei Minuten nach der Behandlung stellen Sie die Platte auf den Tisch eines inversen Mikroskops. Nehmen Sie mit der Lebendzellmikroskopie 20 Sekunden lang einen Film der Myotubenkontraktion auf. Am Ende der Aufnahme fügen Sie dem Kulturmedium 300 Nanogramm pro Milliliter Curare hinzu und nehmen Sie den Film weitere 20 Sekunden lang auf, bevor Sie die Filmdatei in einem geeigneten Softwareprogramm zur Analyse von Bewegungsvektoren zur Analyse öffnen.