Modellierung der Metastasierung von Hirntumoren durch Injektion von Krebszellen in die innere Halsschlagader

Beginne mit einer betäubten Maus mit einer freiliegenden Arteria carotis communis.

Die CCA gabelt sich in die Arteria carotis externa (ECA), die das Gesicht mit Blut versorgt, und die Arteria carotis interna (ICA), die das Gehirn mit Blut versorgt.

Lege zuerst eine Naht um die ECA und ziehe sie fest.

Fügen Sie dann eine enge Naht auf dem CCA unterhalb der Injektionsstelle hinzu, um den Blutfluss zu blockieren.

Führen Sie einen feuchten Papierstreifen unter den CCA ein, um ihn zu stützen.

Platzieren Sie einen losen Knoten über der Injektionsstelle, dann injizieren Sie Krebszellen in den CCA.

Aufgrund des vernähten ECA wandern die Zellen zum ICA, um das Gehirn zu erreichen.

Entfernen Sie nach der Injektion die Nadel und ziehen Sie den distalen Knoten des CCA fest, um einen Rückfluss zu verhindern.

Schneiden Sie abschließend die Nähte, entfernen Sie den Streifen, spülen Sie ihn mit Kochsalzlösung aus und schließen Sie die Wunde.

Im Laufe der Zeit vermehren sich die migrierten Krebszellen und entwickeln Tumore im Gehirn.

Positionieren Sie eine feine Pinzette unter der Arteria carotis externa und führen Sie eine 5-0 Seidennaht unter die Arterie. Verknoten und festziehen Sie die Naht und schneiden Sie die überschüssige Linie ab. Positionieren Sie eine feine Pinzette unter der Arteria carotis communis und führen Sie eine 5-0-Seidennaht unter die Arterie.

Binde einen Knoten und ziehe die Naht an einer Position proximal zur vorgeschlagenen Injektionsstelle fest. Schneiden Sie die überschüssige Naht ab und lassen Sie etwa 10 Millimeter der Linie übrig. Schneiden und befeuchten Sie einen Streifen fusselarmer Einwegwischer von etwa 10 x 5 Millimetern.

Falten Sie den Streifen und platzieren Sie ihn unter der Halsschlagader an der vorgeschlagenen Injektionsstelle. Dadurch wird das Gefäß während der Injektion gestützt. Auf der Arteria carotis communis rostral zur vorgeschlagenen Injektionsstelle wird eine dritte Ligatur mit einem losen Knoten platziert. Diese wird erst nach der Injektion festgezogen.

Rühren Sie die Zellsuspension vorsichtig und ziehen Sie 200 Mikroliter Zellsuspension mit einer 31-Gauge-Nadel in eine Insulinspritze. Laden Sie die Spritze in den Spritzentreiber, der mit einem aktivierenden Fußpedal verbunden ist.

Befestigen Sie eine feine Kanüle mit einer 31-Gauge-Nadel an der Spritze und grundieren Sie die Linie. Prüfen Sie, ob die Halsschlagader gut positioniert und unter Druck steht. Führen Sie mit zwei fein abgewinkelten Pinzetten, von denen eine sanft auf das Ende der ersten Ligatur gespannt wird und die andere die 31-Gauge-Nadel hält, die Nadel langsam mit der Fase nach oben in das Lumen des Blutgefäßes ein, wobei Sie darauf achten, dass es nicht durchstochen wird.

Injiziere langsam 100 Mikroliter der zuvor vorbereiteten Zellsuspension mit 10 Mikrolitern pro Sekunde in die Arteria carotis. Dadurch werden 2,5 mal 10 bis die fünften Zellen in das Blutgefäß abgegeben. Eine erfolgreiche Injektion kann durch die Entfernung von Blut aus dem Karotisblutgefäß visualisiert werden.

Heben und ziehen Sie die lose Ligatur sofort nach dem Zurückziehen der Nadel vorsichtig an, um Rückfluss und Blutungen zu verhindern. Schneiden Sie überschüssige Nähte ab und entfernen Sie das Stück angefeuchtete, fusselarme Einwegwischer.

Spülen Sie mit einer P200-Pipette die Operationshöhle zweimal mit 150 bis 200 Mikrolitern sterilem Wasser oder Kochsalzlösung. Nachdem Sie nach Blutungen gesucht haben, positionieren Sie das Weichgewebe, die Speicheldrüsen und die Haut über der Halsschlagader und der Luftröhre. Verschließen Sie die Hautschicht des Schnitts mit einem Nahtnadelhalter, einer Pinzette und einem resorbierbaren oder nicht resorbierbaren 6-0-Monofilament-Nahtmaterial in einem kontinuierlichen Muster.