JoVE-Enzyklopädie der Experimente
Neurowissenschaften
0 Aufrufe • 3:18 Min. • April 28th, 2025
Nehmen Sie ein Herzperfusionsgerät, das mit einem Datenerfassungssystem verbunden ist.
Positionieren Sie einen Mehrelektrodenkatheter sowohl für die elektrische Stimulation als auch für die Herzrhythmusüberwachung.
Nimm ein Mausherz mit einer Kanüle, die in die Aorta eingeführt wurde, und verbinde es mit dem Gerät.
Perfundieren Sie das Herz mit einem sauerstoffhaltigen Perfusionspuffer, um die physiologische Durchblutung nachzuahmen.
Führen Sie den Katheter in den rechten Vorhof und Ventrikel ein.
Das kardiale Leitungssystem, bestehend aus Schrittmacherzellen und Leitungsfasern, koordiniert die synchronisierte Kontraktion der Herzkammern.
Wenden Sie elektrische Stimulation durch den Katheter an, um die elektrophysiologischen Zustände des Herzens zu stabilisieren.
Schließen Sie die Kammer, um eine stabile Temperatur zu erhalten.
Wenden Sie eine kontrollierte Stimulation an, um die Herzaktivität zu Beginn zu messen.
Erhöhen Sie als nächstes die Stimulationsfrequenz, um den normalen Rhythmus des Herzens zu überschreiben und unregelmäßige Rhythmen auszulösen, die von den Ventrikeln ausgehen, bekannt als ventrikuläre Arrhythmie.
Nach der Stimulation deutet die Rückkehr des Herzens zu einem normalen Rhythmus auf eine Widerstandsfähigkeit gegen Herzrhythmusstörungen hin, während anhaltende abnormale Rhythmen auf Anfälligkeit hinweisen.
Beginnen Sie damit, das Wasserbad zu starten und die Perfusionslösung mit einer Mischung aus 95 % Sauerstoff und 5 % Kohlendioxid darin zu platzieren. Passen Sie dann vor dem Anbringen des Herzens die Pumprate so an, dass bei der Montage an der Apparatur keine Luftblasen in der Kanüle zurückbleiben. Stellen Sie in den allgemeinen Einstellungen den angestrebten Perfusionsdruck auf 80 Millimeter Quecksilbersäule ein und starten Sie die Aufnahme.
Verwenden Sie einen elektrophysiologischen Katheter mit Platinelektroden und einer Elektrodenoberfläche von 0,5 x 0,5 Millimetern und einem Elektrodenabstand von 0,5 Millimetern für die Datenaufzeichnung und Stimulation mit einem dafür vorgesehenen digitalen Stimulusgenerator. Platzieren Sie dann den Katheter in der Nähe des Bereichs, in dem das Herz nach der Befestigung am Gerät positioniert wird. Befestigen Sie dann die Kanüle schnell an der Langendorff-Apparatur und stellen Sie sicher, dass keine Blasen in der Kanüle zurückbleiben. Schalten Sie den Perfusionsdruck auf 80 Millimeter Quecksilbersäule um, was eine konstante Druckperfusion ermöglicht.
Führen Sie den Katheter vorsichtig in den rechten Vorhof und die rechte Herzkammer ein, ohne das Herz zu berühren oder zu beschädigen, und befestigen Sie den Katheter mit Klebeband an der Kanüle. Beginnen Sie dann die Stimulation mit der vorbereiteten Zykluslänge von 100 Millisekunden für eine anfängliche 20-minütige Äquilibrierungsperiode. Schließen Sie abschließend die Kammer, um eine stabile Temperatur zu ermöglichen.
Beginnen Sie mit einer programmierten Stimulation über die distalen oder proximalen Elektroden des Katheters bei doppelter atrialer oder ventrikulärer Stimulationsschwelle, um die elektrophysiologischen Parameter zu bewerten. Führen Sie dann eine programmierte zusätzliche Stimulation oder Burst-Pacing-Protokolle in Übereinstimmung mit den Lambeth-Konventionen durch, um die Entstehung ventrikulärer Arrhythmien zu bewerten.