Beurteilung der Integrität der Blut-Hirn-Schranke in einem Rattenmodell mit laserinduzierter Hirnverletzung

Nehmen Sie ein Modell für eine anästhesierte Kontrollratte und ein Modell für eine laserinduzierte Hirnverletzung.

Die Laseranwendung auf der rechten Hemisphäre schädigte Zellen und die Blut-Hirn-Schranke (BHS), die Blut vom Hirngewebe trennt.

Injiziere einen Tracking-Farbstoff in die kanülierte Schwanzvene, der durch den systemischen Kreislauf zum Gehirn wandert.

Der Farbstoff bindet an Plasmaproteine und gelangt durch die beschädigte BHS ins Hirngewebe.

Euthanasiere die Ratten.

Perfundiere die Ratten durch das Herz, um den Farbstoff aus dem Kreislauf zu entfernen.

Extrahieren und schneiden Sie das Gehirn, isolieren Sie die Scheiben von der verletzten Hemisphäre und homogenisieren Sie sie.

Behandeln Sie mit einer sauren Lösung, um Proteine zu denaturieren, wobei der proteingebundene Farbstoff freigesetzt wird.

Zentrifugieren und isolieren Sie den farbstoffhaltigen Überstand. Fügen Sie Alkohol hinzu, um die Fluoreszenz des Farbstoffs zu verbessern.

Übertragen Sie die Lösung auf eine Mikroplatte. Bei Anregung deutet eine höhere Fluoreszenzintensität im verletzten Gehirn auf eine laserinduzierte BHS-Schädigung hin.

Um die Häufigkeit von Brüchen der Blut-Hirn-Schranke zu beurteilen, laden Sie