Mikroskopische Bildgebung von Neuronen in einem Mausgehirnschnitt mittels Golgi-Cox-Metallic-Färbung

Beginnen Sie mit einem dicken Hirnabschnitt, der mit Golgi-Cox-Lösung gefärbt wurde, um Neuronen selektiv abzudunkeln, und mit Cresylviolett gegengefärbt wurde, um die Gehirnregion hervorzuheben.

Legen Sie sie auf einen Objektträger, der mit einem Clearingmittel vorbehandelt wurde, um die Gewebetransparenz zu verbessern.

Legen Sie den Objektträger auf den Mikroskoptisch, tragen Sie Silikonöl auf und senken Sie die Objektivlinse ab, bis sie mit dem Öl in Berührung kommt.

Silikonöl passt sich dem Brechungsindex der Objektivlinse und des Objektträgers an und ermöglicht so eine detaillierte Bildgebung.

Fokussieren Sie sich auf das Beispiel, passen Sie dann die Belichtung und den Weißabgleich der Kamera an, um eine optimale Bildqualität zu erzielen.

Fokussieren Sie auf die obere Ebene, um die obere Begrenzung festzulegen, und dann auf die untere Ebene, um die untere Grenze zu setzen.

Passen Sie den Abstand zwischen Bildern mit ausreichender Überlappung an, um Details von neuronalen Projektionen zu erfassen.

Wiederholen Sie die Bildgebung an verschiedenen Stellen, um interessante Bereiche zu erfassen, und überlagern Sie dann diese Bilder, um eine dreidimensionale Darstellung der Neuronen