Verwendung der spektralen Reflektometrie zur Bestimmung myelinisierter Axondurchmesser in einem fixierten Maushirnschnitt

Nehmen Sie ein hyperspektrales konfokales Mikroskop mit einer stabilisierten Laserquelle, die für einen breiten Spektralbereich konfiguriert ist, um die Nanostruktur der Myelinscheide des Gehirngewebes zu entschlüsseln.

Verwenden Sie einen Referenzspiegel, um das Reflexionsspektrum der Grundlinie zu erfassen. Entfernen Sie den Spiegel und erhalten Sie ein dunkles Offset-Spektrum für die Korrektur des Detektorrauschens.

Übertragen Sie eine Kammer mit einem fixierten Hirngewebeschnitt auf den Mikroskoptisch.

Richten Sie die Fokusebene auf den interessierenden Gewebebereich aus und stellen Sie eine ausreichende Tiefe sicher, um Interferenzen durch die Glas-Gewebe-Grenzfläche zu minimieren.

Das Laserlicht wird auf die mehrschichtige Myelinscheide der Axone gerichtet.

Bei der Wechselwirkung des Lichts mit dem Myelin kommt es an den Grenzflächen der Schichten zu partiellen Reflexionen, die aufgrund unterschiedlicher Schichtdicken und Brechungsindizes Interferenzmuster erzeugen.

Erfassen Sie Spektralbilder dieser Interferenzmuster.

Nach der Baseline-Korrektur und Signalanalyse zeigt das Reflexionsspektrum die Wellenzahlperiodizität an, was die Bestimmung der myelinisierten Axondurchmesser ermögl