Echtzeit-Calcium-Bildgebung eines medialen präfrontalen Kortex der Maus mit einem Miniskop

Nehmen wir eine anästhesierte transduzierte Maus, der eine Gradientenindexlinse implantiert wurde, die auf den medialen präfrontalen Kortex abzielt, wo Neuronen genetisch kodierte Kalziumindikatoren exprimieren.

Entfernen Sie den Objektivdeckel und reinigen Sie die Oberfläche, um eine klare Lichtdurchlässigkeit zu gewährleisten.

Befestigen Sie das Miniskop an der Objektivhalterung.

Passen Sie die Position des Miniskops an, um die optimale Fokusebene zu ermitteln. Diese Einstellung sorgt für eine übersichtliche Visualisierung der neuronalen Zellkörper.

Trennen Sie das Kabel und lassen Sie die Maus wiederherstellen.

Schließen Sie das Kabel an das Miniskop an und übertragen Sie die Maus in eine Kammer mit einem Verhaltensaufzeichnungs-Setup.

Während der Bildgebung sendet das Miniskop Licht aus, um die Kalziumindikatoren anzuregen, die beim intrazellulären Kalziumeinstrom fluoreszieren.

Die Gradientenindex-Linse leitet diese optischen Signale aus dem tiefen Hirngewebe an das Miniskop weiter, wodurch die Lichtstreuung reduziert und die Visualisierung der neuronalen Aktivität in Echtzeit ermöglicht wird.

Verarbeiten Sie die aufgezeichnete transiente Kalziumaktivität mit Verhaltensbeobachtungen,