Subpiale Genverabreichung im Rückenmark der Maus zur Bewertung der Genexpression

Nehmen Sie eine betäubte Maus, rasieren Sie ihren Rücken und desinfizieren Sie die Haut.

Schnitte die Haut, löse die Muskeln von den Wirbeln und ziehe sie mit Klammern zurück.

Bohren Sie in die Wirbellaminae, um Risse zu erzeugen, und entfernen Sie dann die Knochenfragmente, um die Dura mater, die äußere Rückenmarksmembran, freizulegen.

Schaffen Sie mit einer Nadel eine durale Öffnung und punktieren Sie die darunter liegende Pia mater, um in den subpialen Raum einzudringen und direkten Zugang zum Wirbelsäulengewebe

zu erhalten.

Nehmen Sie eine Verabreichungsnadel, die eine Suspension eines rekombinanten Adeno-assoziierten Virus enthält, die ein fluoreszierendes Protein-exprimierendes Gen trägt, und injizieren Sie die Suspension.

Ziehen Sie die Nadel zurück, nähen Sie die Muskeln und die Haut und lassen Sie die Maus sich erholen.

Das Virus bindet an Rezeptoren auf Neuronen und Gliazellen und wird endozytiert.

Sobald sich das Virus im Zellkern befindet, löst es die Genexpression aus, um fluoreszierende Proteine zu produzieren.

Das subpiale Gentransfermodell ist nun bereit, die Expression von Zielgenen im Rückenmark zu bewerten.

Beginnen Sie damit, das Tier für die Operation richtig zu betäub