JoVE-Enzyklopädie der Experimente
Neurowissenschaften
0 Aufrufe • 4:05 Min. • August 8th, 2025
Beginnen Sie mit anästhesierten Mäusen, die auf ein Positionierungsgerät gelegt werden, wobei ihr Rücken parallel zur Rückenlehne des Stuhls und senkrecht zum Sitz steht.
Die Mäuse werden in einer Kopf-und-Vorwärts-Haltung positioniert und mit Stuhlgurten gesichert.
Platzieren Sie mit einer Mikropipette, die mit einem Neuronen-Targeting-Peptid-siRNA-Komplex beladen ist, einen Tropfen in der Nähe eines Nasenlochs, damit die Maus die Lösung auf natürliche Weise einatmen kann.
Drücken Sie den Kopf der Maus während der Inhalation vorsichtig nach unten, um zu verhindern, dass die Lösung in die Lunge abfließt.
Halten Sie kurz inne, wiederholen Sie dann die Verabreichung im anderen Nasenloch.
Wiederholen Sie den Vorgang für die restlichen Mäuse.
Der Komplex dringt in die Nasenschleimhaut ein, von wo aus er in die Riech- und Trigeminusnerven eindringt und durch diese hindurch zum Gehirn gelangt.
Im Gehirn bindet der Komplex an neuronale Rezeptoren, durchläuft eine Endozytose und erleichtert die intrazelluläre siRNA-Verabreichung.
Die siRNA wird Teil des RISC-Komplexes, der bei Bindung an die Ziel-mRNA das Gen-Silencing induziert.
Um mit diesem Verfahren zu beginnen, beurteilen Sie den Anästhesiegr
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