T-Labyrinth Erzwungener Wechsel und die Links-Rechts-Discrimination Aufgaben für die Beurteilung der Arbeitsbedingungen und Referenz-Gedächtnis bei Mäusen

Die modifizierte Automatic-Teammates-App mit Verfolgungssystem wird gezeigt. Diese App besteht aus weißen Kunststoffbahnen mit 25 Zentimeter hohen Wänden. Die MA ist durch einen automatischen Faden in sechs Bereiche unterteilt, die zum Bereich A führen. Ein Bereich ist ein STA-Fach.

S zwei ist eine Ähnlichkeit der Teammitglieder. A eins unter A zwei sind jeweils der linke unter dem rechten Arm. Die Bereiche P eins und P zwei vergleichen die Verbindungswege aus den Bereichen A eins oder A zwei mit A eins, sodass die Maus in das statische Fach zurückkehren kann.

Die Türen öffnen sich in diesem Film automatisch nach unten, als Demonstration; eine der Türen wird manuell betätigt. Diese verbesserten Vorrichtungen ermöglichen es uns, INB-Mikro-SSIS in der molekularen Physiologie und gentechnischen Methode während der Leistung von Teammitgliedern zu verwenden. Das N steht mit einem Punkt vor dem Spender, wobei Kreisperioden als Futterbelohnung verwendet werden; ein Futterdispenser drückt eine Flasche heraus, gefolgt von der entsorgten Flasche.

Sie können beobachten, wie die Futterportion aus dem Futterausgabegerät auf das Futtertablett ausgegeben und anschließend unter das Gelände abgeworfen wird. Die Maus wird von einem Sensor erfasst und von einem Computer aufgezeichnet. In der Praxis gibt das Programm des Video-Tracking-Systems die Futterportion automatisch aus, sodass bis zum Ende der Sitzung kein manuelles Eingreifen erforderlich ist. Die CCD-Kamera ist oberhalb des Versuchsaufbaus montiert und ermöglicht es dem Computer, das Verhalten der Maus als Bilddatei aufzuzeichnen. Die App Parus wird mit 100 Lux Beleuchtung pro Quadratzentimeter beleuchtet.

Wir empfehlen, dass die Appell einen schallisolierten Raum aufstellt, um die ethnischen OID-Räume, die die Umgebung umgeben, zu reduzieren, wobei eine Woche vor den Betriebssitzungen begonnen wird, täglich die Masse zu wiegen und jeder Maus eine Bewertungsgeschwindigkeit zur Gewöhnung an die Zeit und an ein Set mit Standardfuttertraining für die Platte zur Verfügung zu stellen, um während des gesamten Experiments 80 % bis 85 % der frei gefütterten 40-Gramm-Gewichtsklasse beizubehalten. Am Tag nach Erreichen des Zielgewichts werden alle Käfige mit den Mäusen mindestens 30 Minuten vor Beginn des ersten Versuchs in den schallisolierten Raum gebracht, um direktes Licht im Raum zu vermeiden. Neuere Beleuchtungen erfordern, dass Käfige nicht auf dem obersten Regal platziert werden.

Bevor Sie die Maus in die Operatoren platzieren, müssen Sie diese zuerst mit einer Zunge abwischen, um Ihr superhypochlorisches Wasser freizulegen und eine Verzerrung basierend auf ProAct-Signalen zu vermeiden. Heute sechs enge Geister pro Maus in die Mitte geben, jeweils mit den sechs Geboten und einer Periode in jedes Fach der Futterautomaten. Setzen Sie alle Mäuse einzeln in den Perus und lassen Sie sie frei laufen.

Erforschen Sie die Perus mit allen Dosierungen oder innerhalb von 30 Minuten vor Beginn. Einen Tag nach der Arbitration werden die Mäuse täglich einer Blutentnahme unterzogen, wobei die Tür geschlossen bleibt und die Pellets im Futterzug deponiert werden. Setzen Sie die Maus in den linken Arm, falls die Maus die Pellets innerhalb von fünf Minuten AOPs konsumiert; danach überführen Sie die Maus in den rechten Arm und beginnen das Vor-Training erneut. Dieses Trainingsverfahren wird bis zu fünfmal täglich wiederholt und fortgesetzt, bis die Maus die Pellets aufgenommen hat.

Mehr als 80 % der Versuchsperioden verbrachte die Maus im statischen Kompartiment. Die Türen werden geöffnet, und die Maus betritt bevorzugt einen Arm, kehrt anschließend jedoch von selbst in das Startkompartiment zurück. Danach erhält die Maus bei zukünftigen Entscheidungen die Wahlmöglichkeit.

Jetzt wird der Arm, der dem vierten Arm gegenüberliegt, betreten. Anschließend kehrt die Maus von selbst in die statische Box zurück, und der Vorgang wird wiederholt. Dies wird bis zu 10-mal pro Tag bei Kontroll- und Versuchstieren durchgeführt.

Mit diesen Kriterien können Sie die Mäuse weiterhin in der verzögerten Retentionstestung untersuchen, indem Sie Verzögerungen von 3, 10, 30 oder 60 Sekunden zwischen der ersten Wahl und der vollständigen Wahl der Nomen einfügen. Dies ist ein Arbeitsblatt zur Aufzeichnung der Informationen für diese Aufgabe, einschließlich eindeutiger Maus-ID, Genotyp, Ohrlochmuster und Platz für die manuelle Aufzeichnung der Ergebnisse im Land-Anwendungsprogramm. Wählen Sie die Plug TM Online-Eingabeprojekt-ID aus.

Beispielsweise Eingabesitzung für den Namen der Masterlinie. Beispielsweise Testdatum, Eingabeparameter wie Formel mit vom C-Kameraausschnitt erfasstem Bild, Zeitpunkt und Größe des Bedieners. Danach Versuchs-ID eingeben.

Beispielsweise muss die Stationsnummer der Referenzdatei zugeordnet oder diese Aufgabe über ein Dropdown-Menü benannt werden, wobei die gewählte Nummer, die Zeitbegrenzung für Maschinenfehler und die Strafzeit einzugeben sind. Anschließend werden die Werte für Helligkeit und Kontrast anhand des aufgenommenen Bildes eingestellt, gefolgt von einem speziellen kurzen Binärbild. Schließlich, nach Überprüfung, ob die interessierenden Bereiche erfasst wurden, kann das vollständige Muster festgelegt werden, sodass das Programm für die Erprobung bereit ist.

Nehmen Sie die Maus vorsichtig auf und setzen Sie sie in das Startfach. Klicken Sie auf den Startknopf und erzwingen Sie die Auswahl. Nach dem Start sehen Sie Live- und Binärbilder sowie Läsionen im Intervall.

In diesem Fall war das Testtier heute im Feld mit dem rechten Arm ED, die Maus betrat die Kammer, und die Tür war geöffnet. Vollständig nach unten bewegt, wurde die Periode am linken Arm ausgegeben. Da die Maus den linken Arm betrat, wurde die Antwort als korrekt gewertet.

Die Ergebnisse der Antworten werden im unteren Lichtfenster auf dem Monitor angezeigt. Hier zeigen die Beispielbilder in Echtzeitwiedergabe, die bei Geist vorgeführt werden, dass die Wörter geschlossen sind, und der gelbe Zyklus zeigt die Kreuzperiode an. Eine Maus wird pro Tag in einer Sitzung 10 aufeinanderfolgenden Versuchen unterzogen.

Maus täglich trainiert, um einen mittleren korrekten Antwortprozentsatz von 80 % zu erreichen; die Reaktionslatenz, die zum Abschluss der Sitzung benötigte Distanz zur Plattform und die Anzahl der Fehlversuche werden automatisch vom Programm berechnet. Nach jeder Sitzung wird die Maus in ihren Heimkäfig zurückgebracht. Reinigen Sie die Plattform und den Spender, wischen Sie die Plattform mit einem Papiertuch ab und reinigen Sie sie anschließend gründlich mit klarem Wasser, um Verzerrungen aufgrund von Geruchsresten zu vermeiden. Falls die kontrollierten unter den experimentellen Mäusen diese Kriterien erfüllen und Sie die Tiere anschließend in der verzögerten Gedächtnisaufgabe testen möchten, wählen Sie einfach im Programmmenü die verzögerte Datei aus und beginnen Sie die nächste Sitzung.

Das Verfahren ähnelt dem Post-Aktivitäts-Test, jedoch entweder vom linken zum rechten Arm, es ist immer Ed As im Post-Retentions-Test und Anwendungsprogramm. Wählen Sie einen abweichenden Dateinamen für diese Aufgabe und den Mäusenamen aus dem Dropdown-Menü, setzen Sie eine Maus in die Startkammer. Klicken Sie auf die Starttaste, und die Auswahl führt jetzt los.

In diesem Fall wird der Auslesearm stets mit der Periode gebissen. Eine Maus wird üblicherweise pro Tag in einer Sitzung 10 bis 20 aufeinanderfolgende Versuche durchlaufen. Die Mäuse werden täglich trainiert, bis ein Kriterium von durchschnittlich 80 % korrekter Antworten erreicht ist.

Die Ergebnisse werden automatisch nach den Mäusen berechnet. Anhand dieser Kriterien können zusätzliche Sitzungen mit den Mäusen durchgeführt werden, um die Speicheraufbewahrung zu bewerten, und dies erfolgt, indem die Verzögerung zwischen den Sitzungen eingefügt wird, oder um das Verhaltensniveau zu bewerten. Durch das Wechseln des Zielortes in den gegenüberliegenden Arm über verschiedene Durchläufe und Sitzungen hinweg wurde das Video zur Person korrigiert, die diesen Prozess durch ein kompliziertes heterogenes M steuert und durch Typ LI in der forcierten Automatisierungsaufgabe kontrolliert wird.

Das Ergebnis zeigt eine funktionierende Arbeitsgedächtnisleistung bei mutierten Mäusen mit CBR-Störung in der Disc-Aufgabe; diese Mäuse bewältigen die Aufgabe problemlos, und selbst nach einer einmonatigen Verzögerung weisen sie keine Beeinträchtigung im Bus-Lernen auf. Die Mutanten hingegen zeigten eine beeinträchtigte Leistung. Der Teammates-Test ist einer der am häufigsten verwendeten VerhaltensTests zur Beurteilung von Wandel- und Referenzgedächtnis.

Bei Nagetieren haben wir die Testvorrichtung verbessert, die mehrere Vorteile bietet. Erstens öffnen sich die Schiebetüren automatisch, und die Maus kann nach jedem Durchgang von selbst in die S-Box eintreten. Diese Automatisierung des MA verringert den Zeitaufwand und die Mühe, die zum manuellen Betrieb der War- und Futterdosierer erforderlich sind.

Und in unserem Labor wird ein Experiment gleichzeitig von bis zu vier Teammitgliedern durchgeführt. Zweitens ermöglicht die Apparatur die Anwendung von Techniken, die eine Verkabelung am Kopf erfordern, wie beispielsweise die in-vivo-Mikrodialyse, die in-vivo-Elektrophysiologie oder die in-vivo-Optogenetik, da sich die Schiebetüren nach unten öffnen. Schließlich ist das Labyrinth so konstruiert, dass die Maus sich nur vorwärts bewegen kann, nicht rückwärts, was eine gleichmäßige Fortbewegung der Maus ermöglichen könnte.

In diesem Video stellen wir diese modifizierte automatische Teammate-Vorrichtung vor, und unsere Protokolle stammen von Dr. Hiro Pash. In unserem Labor wird Hirotaka die Protokolle mithilfe dieser modifizierten automatisierten Vorrichtung in diesem Film demonstrieren. Hirotaka, wie war Ihr erster Eindruck vom Teammate-Test mit dieser verbesserten Vorrichtung?

Mein erster Eindruck war, dass die Apparatur und das Softwareprogramm sehr benutzerfreundlich sind und der Test leicht durchführbar ist. Glauben Sie, dass jeder mit diesem Gerät und Programm umgehen kann, oder ist eine spezielle Schulung erforderlich? Dem stimme ich teilweise zu.

Jeder kann lernen, mit den Operatoren umzugehen. Für die Durchführung der Testverfahren ist keine besondere Schulung erforderlich. Gibt es Tipps oder Dinge, auf die Sie während der Testdurchführung achten sollten?

Ja. Ich achte sorgfältig darauf, die Motivation für die in Mengen verabreichte Nahrung aufrechtzuerhalten, indem ich das Körpergewicht täglich kontrolliere. Individuelle Unterschiede in der Motivation können zu Variationen in der Leistung der Teammitglieder führen.