Name: Femoral arterielle und venöse Katheterisierung zur Blutentnahme, Drug Administration und Conscious Blutdruck und Herzfrequenz-Messungen (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2012-01-24T12:00:00.000+00:00
Duration: 9 min 38 s
Description: Lernen Sie die chronische Katheterisierung der Femoralarterie und -vene bei Ratten für kardiovaskuläre Forschung. Diese Methode ermöglicht Blutdruckmessungen und Blutentnahmen bei wachen Tieren.

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Die Autoren danken Dr. Andrew King, PhD und Katrina König für den Beitrag der Abbildungen erkennen. NIH: R00HL087927.

1. Vor Beginn Surgical Procedure Hinweis: Vor Beginn jedes Tier Verfahren sicher, dass Sie die entsprechende Berechtigung durch Ihre Institution / Organisation erhalten. Wie bei allen Überleben Operationen, stellen Sie sicher, dass die Operation unter sterilen Bedingungen durchgeführt wird und die entsprechende Schmerzmittel und Antibiotika nötig sind für ein erfolgreiches Ergebnis verwendet. <ol><li> Vor Beginn der Katheterisierung Verfahren bewerten die Katheter durch Spülen sie mit einer sterilen Kochsalzlösung, um sicherzustellen, sie sind offen. </li><li> Anesthetize der Ratte. </li><li> Bereiten Sie die Ratte für den chirurgischen Eingriff. <ol class="lalpha"><li> Shave das Fell von der chirurgischen Regionen, die die Rückseite des Halses (zwischen den Schulterblättern) und dem inneren Schenkel Region zählen. </li><li> Mit Betadine und einem 70% igem Ethanol schrubben bzw. scheuern die rasierte chirurgischen Regionen beginnend in der Mitte und eine kreisförmige Schwung nach außen. WiederholenDieses 3-mal für jede Region, endet mit einem abschließenden Reinigung mit 70% Ethanol. </li><li> Legen Sie das Tier auf eine sterile Oberfläche und legen sterilen Tuch über OP-Bereich. (Die Verwendung von Press-n-Seal ist eine ideale chirurgische Abdeckung ermöglicht dem Forscher, um das Tier während des gesamten Verfahrens zu überwachen.) </li></ol></li><li> Sicherstellen, dass alle chirurgischen Instrumente für den chirurgischen Eingriff sterilisiert worden sind. </li></ol> 2. Vorbereitung der OP-Bereiche für Katheterplatzierung <ol><li> Mit der Ratte über anfällig (auf dem Bauch), machen etwa ein ½-Zoll (12 mm) horizontaler Schnitt auf der Rückseite des Halses auf der Ebene der Schulterblätter mit einer Schere oder ein Skalpell, dann stumpfen sezieren eine subkutane "pocket" in der Rückseite in etwa die Größe von einem Viertel. Dies wird als ein Bereich genutzt werden, um eine kleine Menge an Schläuchen, die für das Wachstum der Tiere und / oder Bewegung zu kompensieren findet, dh so, dass der Katheter nicht auf herausgezogen und somit entfernt von der Arterie war es Platzd in. (Alternativ kann dieser Schritt unmittelbar vor dem Tunnel der Katheter durchgeführt werden.) </li><li> Legen Sie die Ratte auf den Rücken (Rückenlage) und einen Einschnitt in der Leistengegend [ungefähre ½ Zoll (12 mm) Schnitt entlang der natürlichen Neigung des Hinterbein. </li><li> Blunt sezieren, um das Bindegewebe (Abb. 1) trennen (können stumpfen Spitze Schere, Hämostatika, Wattestäbchen, etc. verwenden) (in der Regel, indem Sie den stumpfen Spitzen Schere und / oder einem Wattestäbchen in einem 45 Grad-Winkel dies sorgt für einfachere Lokalisierung der region of interest), bis die Arteria und Vena femoralis freigelegt werden. <ol class="lalpha"><li> Die Vene wird dunkel in der Farbe rot und die Arterie ist klarer und heller als die Vene. Die Nerven, die entlang der Arterie läuft ist weißlich in Ton. </li></ol></li><li> Blunt sezieren im Beinbereich zu einer kleinen offenen Bereich unter der Haut (zB Tasche, etwa die Größe von einem Viertel) an der Innenseite des Beines zu machen für die Platzierung eines kleinen Ausschnitts des catheter (wieder zu berücksichtigen Tierbewegungen zu nehmen und das Wachstum des Tieres, wenn chronische Platzierung). </li><li> Setzen Sie den Haken in den Schnitt-Bereich, so dass Sie in vollem Umfang können die Arterie und Vene. </li><li> Mit feiner Spitze Pinzette vorsichtig trennen die Nerven (weißlich), die entlang der Femoralarterie weg von der Arterie und Vene ist. (Abbildung 2) Achten Sie darauf, nicht geschnitten oder Schäden an den Nerven. </li><li> Trennen Sie die Arterie und Vene als eine Einheit und versucht, eine ca. ¼ inch (5-7 mm) Länge Abschnitt der Arterie / Vene freizulegen. </li><li> Wiederholen Sie den Vorgang bei der Trennung der Vene von der Arterie. Halten Sie Ihre chirurgischen Instrumente (dh feine Spitze Pinzette), die senkrecht zu den Schiffen und trennen die Schiffe in parallel. Dies hilft bei der Vermeidung Reißen, Stechen oder Beschädigung der Gefäße. Indem Sie die feine Spitze Pinzette vorsichtig zwischen Arterie und Vene von unten und langsam Öffnen der Zange und Wiederholung dieser, werden Sie langsam trennen die Schiffe. Hinweis: wenn Sie reißen oder beobachten einigeBlutungen mit einem sterilen Wattestäbchen und / oder 2 x 2 Gaze und Druck auf den Bereich, bis die Blutung gestoppt wurde, dann mit der Operation fortsetzen. </li></ol> 3. Tunneling der Katheter <ol><li> Legen steriler Kochsalzlösung getränkt 2 x 2 Gaze über den Schnitt und drehen Sie das Tier auf seinem Magen. </li><li> Legen Sie die Rochester Pean Pinzette (lange Gerade Pinzette) in den Einschnitt auf der Rückseite, die bisher gemacht wurde und Führung der Zange subkutan den Rücken hinunter auf die Ebene der Hüfte [sicherzustellen, dass die Spitzen der Hämostatika up sind, hingewiesen (nicht in Richtung der Wirbelsäule ) nicht zu verletzen das Rückenmark]. Bei etwa der Hüfte drehen Sie den hemostat Spitze in Richtung der Schnitt, die in das Bein Region gemacht wurde und drücken Sie die Spitze des Hämostatika aus dem vorbereiteten Bein Schnitt. </li><li> Fassen Sie das Ende der Katheter (nicht das Ende, das in die Arterie / Vene eingeführt wird) mit der Zange und ziehen Sie den Katheter durch den Hohlraum, was gemachtund schließlich aus dem Hals Einschnitt. </li><li> Legen Sie die entsprechende abgestumpft-Spitze Spritze mit 20 U / ml Heparin / Kochsalzlösung auf das Ende des jeweiligen Katheter gefüllt und füllen die Katheter (sicherstellen, dass keine Luftblasen) mit dem heparinisierten / Kochsalzlösung. Wieder einmal überprüfen, ob die Katheter-Patents sind und keine Schäden an den Kathetern zu kommen. Verlassen Sie die Spritzen an das Ende des Katheters Linien, damit keine Luft in der Lage, in den Katheter Linien und biegen die Ratte auf den Rücken wieder. </li></ol> 4. Einsetzen der Katheter in die Femoral Vene und Arterie (Abb. 3) <ol><li> Legen Sie ein gefaltetes Stück sterile 4,0 Seide / Faden unter der V. femoralis und dann schneiden die Seide auf das gefaltete Ende. Es gibt jetzt zwei Stücke aus Seide unter die Vene werden. Oder alternativ, Platz 2 Stück von 4,0 Seide unter die Vene einzeln. </li><li> Trennen Sie die Seide, die Sie unter der Vene gelegt, ein Stück in Richtung des Beines (distalen Ende) und die andere in Richtung des Körpers. Tdh eine lose Ligatur auf der Seite, die dem Körper, dann mit kleinen Hämostatika, fassen Sie die Seide und ziehen gelehrt, aber nicht festziehen des Knotens. Ziehen Sie das andere Stück Seide so weit wie möglich in Richtung des Beines (distalen Ende) und binden diese in einen dreifachen Knoten, fassen Sie die Seide mit kleinen Hämostatika und ziehen gelehrt. Diese Methode erlaubt die Vene mit Blut zu füllen, so dass es einfacher, die den Schnitt, die zum Einführen des Katheters (Schritt 4) erforderlich sind zu machen. </li><li> 1-2 Tropfen von Lidocain auf die Vene. </li><li> Mit dem Vanna Mikro-Präparierschere, einen kleinen Einschnitt in die Vene ca. ¼ über und in einem Winkel von 45 Grad. </li><li> Legen Sie spitzen Pinzette (45 Pinzetten) in den Einschnitt und mit einem anderen Pinzette, sorgfältig in die Vene Katheter zu ernähren. Öffnen Sie vorsichtig die Pinzette, die in die Vene gelegt werden, da dies ermöglicht dem Forscher, sanft Ort der Katheter unter der Zange und in die Vene. </li><li> Wenn der Katheter vollständig eingeführt ist (entx. 6-7 cm) (Bei der Herstellung der Katheter eine Markierung auf dem Katheter gelegt, um dem Chirurgen bei der Identifizierung, wenn der Katheter vollständig eingeführt ist behilflich) (dies legt den Katheter in die Bauch-Hohlvene), ziehen Sie die vordere Ligatur um die Vene und Katheter, binden einen dreifachen Knoten (sicherstellen, dass es nicht das Verschließen der Vene). Verwenden Sie den Seidenfaden in der Nähe des Beines (posterior Ligatur) wieder sichern den Katheter (triple Knoten) und sorgen für die Platzierung. Langsam ziehen wieder die Spritze, bis es ein wenig Blut sichtbar in den Katheter, die sicherstellen, dass die Naht Knoten nicht zu eng, und dass der Katheter ist funktional hilft. Nach der Überprüfung, drücken Sie den Kolben, bis das Blut nicht mehr sichtbar in den Katheter. Hinweis: Es ist möglich bis 2 Katheter in die Vena femoralis einfügen, wenn nötig. </li><li> Wiederholen Sie die Schritte 9-13, um eine Femoralarterie Katheter mit folgenden Ausnahmen Ort: <ol class="lalpha"><li> Binden Sie die Seide am nächsten zu dem Bein (hinten) mit einem dreifachen Knoten und ziehen taught vor Bindung der lockeren Ligatur in der Nähe des Körpers (anterior) bevor der Schnitt für die Platzierung von Kathetern. Dadurch wird die Arterie mit Blut macht es leichter zu schneiden füllen. Sicherstellen, dass die proximale Naht gezogen wird gelehrt, um die Arterie vor verschließen zum Schneiden der Arterie. Dadurch wird vermieden, Blutverlust, wenn der Schnitt gemacht wird. </li><li> Legen Sie den arteriellen Katheter ca. 5 cm aus der Femoralarterie (dies legt den Katheter in der Aorta). </li><li> Bei der Befestigung des Katheters mit der Naht sicher, dass die Naht nicht zu eng und das Verschließen des Katheters. </li></ol></li></ol> 5. Chirurgische Wrap-up <ol><li> Machen Sie einen Cent zu Quartal große Schleife in der Kathetern und auf der Innenseite des Beins (die Schleife in den Bereich, der stumpf seziert früher war fit). Nach der Platzierung beider Katheter, sichern Sie sie mit 1-2 Stichen von 5,0 chirurgisches Nahtmaterial in die Muskelschicht. </li><li> Schließen Sie den Schnitt mit 4,0 Ethilon mit nicht-kontinuierlichen Sutures. </li><li> Schalten Sie die Ratte auf den Bauch und machen eine weitere Schleife in den Katheter über die Größe von einem Viertel und in der Tasche im Rücken seziert. Schließen Sie den Schnitt mit einer Naht. </li><li> Mit einem Rückgang von vetbond, sichern Sie den Katheter in den Rücken. </li><li> Klemmen Sie den Katheter in der Nähe der Rückseite Schnitt mit gepolstertem Hämostatika und entfernen Sie die Spritzen von den Enden. </li><li> Fit der Ratte mit einem Halteseil-type-Jacke, Mütze die Katheter (die Heparin-Lock zu erhalten), und entfernen Sie die gepolsterte Hämostatika. </li></ol> - Für die langfristige Wartung ersetzen Katheter Kochsalzlösung mit 20 U / ml Heparin / Kochsalzlösung. 6. Wartung der Katheter (Sterile Handschuhe sollten während des Eingriffs getragen werden) <ol><li> Klemmen Sie den Katheter mit gepolsterten Zange. </li><li> Entfernen Sie den Katheter anschließen. </li><li> Legen Sie eine stumpfe Spitze Spritze mit Schloss-Lösung auf den Katheter. </li><li> Ausspannen Pinzette. </li><li> Füllen Sie den Katheter mit dem Schloss-Lösung (Volumen ist pre-Determined-typisch 0,3 ml). </li><li> Klemmen Sie den Katheter, während Spülung keine Rückfluss von Blut in die Katheterspitze zu verhindern und entfernen Sie die Spritze. </li><li> Ersetzen Sie den Katheter anschließen. </li><li> Ausspannen Pinzette und schieben Sie den Stecker in leicht um sicherzustellen, kein Blut in die Spitze des Katheters. </li></ol> 7. Blutprobenentnahme (Sterile Handschuhe sollten während des Eingriffs getragen werden) Klemmen Sie den Katheter mit gepolsterten Zange. <ol><li> Entfernen Sie den Katheter anschließen. </li><li> Ziehen Sie langsam Lock-Lösung mit einem stumpfen Spitze Spritze und entsorgen. </li><li> Bringen Probenahme Spritze an den Katheter langsam zurückziehen Probe. </li><li> Klemmen Sie den Katheter mit gepolsterten Zange und legen Sie eine Spritze mit Schloss-Lösung auf den Katheter und re-fill den Katheter mit dem Schloss-Lösung. </li><li> Klemmen Sie den Katheter, während das Nachfüllen der Katheter mit der Lösung. </li><li> Setzen Sie den Katheter anschließen. </li><li> Entfernen Sie den gepolsterten Zange und schieben t er plug in etwas weiter. </li></ol> 8. Drug Infusion <ol><li> Klemmen Sie den Katheter mit gepolsterten Zange. </li><li> Entfernen Sie den Katheter anschließen. </li><li> Ziehen Sie langsam Lock-Lösung mit einem stumpfen Spitze Spritze und entsorgen. </li><li> Bringen Medikament gefüllte Spritze an den Katheter und ziehen den Stoff in das Tier. <ul><li> Man kann mit einem 3-Wege-Hahn sowie ein Zwischenprodukt, wenn mehrere Injektionen erforderlich sind, erfordern somit weniger Flüssigkeit als Infusion in das Tier. </li><li> kann man auch legen eine konstante Infusionsspritzenpumpe mit einem sterilen Filter für kontinuierliche Infusionen. </li></ul></li><li> Clamp mit gepolsterten Zange und legen Sie eine Spritze mit Schloss-Lösung auf den Katheter und re-fill den Katheter mit dem Schloss-Lösung. </li><li> Klemmen Sie den Katheter, während das Nachfüllen der Katheter mit der Lösung. </li><li> Setzen Sie den Katheter anschließen. </li><li> Entfernen Sie den gepolsterten Zange und schieben Sie den Stecker in ein kleines Stück weiter. </li></ol>e "&gt; 9. Blutdruck und Herzfrequenz Sampling <ol><li> Klemmen Sie den arteriellen Katheter mit gepolsterten Zange und entfernen Sie den Katheter anschließen. </li><li> Befestigen Sie den arteriellen Linie auf den Druckaufnehmer. </li><li> Follow Herstellung Anweisungen zur Verwendung der Software für den Blutdruck Sammlung. </li><li> Zum Abschluss der Überwachung des Blutdrucks Zeitraum, mit gepolsterten Zange Klammer des Katheters aus und trennen Sie vom Wandler. </li><li> Spülen Sie den Katheter mit dem Schloss-Lösung und ersetzt die Katheterstopfen wie oben beschrieben. </li></ol> 10. Repräsentative Ergebnisse Ein Vertreter der Blutdruck gemessen wurde von einer bewussten frei beweglichen Tieren genommen und ist in Abbildung 4 dargestellt. Phenylephrin (3 ug / kg, iv), einen Alpha-1-adrenergen-Rezeptor-Agonist, wurde in die Vena femoralis Linie, um den Blutdruck zu erhöhen verabreicht werden, bei gleichzeitiger Messung des Blutdrucks aus der Femoralarterie Linie. Phentolamin (4 mg / kg, iv)einem nicht selektiven alpha-adrenerge Antagonist, wurde dann verabreicht werden, um den Blutdruck zu senken. <img alt="Abbildung 1" src="/files/ftp_upload/3496/3496fig1.jpg" data-altupdatedat="1788238805000" data-alt="Abbildung 1"> Abbildung 1. Stumpfe Präparation von Gewebe. Mit der Ratte auf den Rücken, werden Sie ungefähr eine ½ Zoll (12 mm) Schnitt auf den Winkel der Hinterlauf gemacht haben und mit stumpfen Schere oder Hämostatika Sie stumpfen sezieren das Bindegewebe um die Arteria und Vena femoralis aussetzen wird. <img alt="Abbildung 2" src="/files/ftp_upload/3496/3496fig2.jpg" data-altupdatedat="1788238805000" data-alt="Abbildung 2"> Abbildung 2. Trennung von Arteria und Vena femoralis aus Bindegewebe. <img alt="Abbildung 3" src="/files/ftp_upload/3496/3496fig3.jpg" data-altupdatedat="1788238805000" data-alt="Abbildung 3"> Abbildung 3. Katheterplatzierung. Mit Vanna Mikro-Präparierscheren Ort einen kleinen Schnitt ca. ¼ der Weg durch das Schiff zu einem Winkel von 45 Grad (oben) und Platz spitzen Pinzette in the Schnitt und mit einer anderen Pinzette füttern den Katheter in das Gefäß (Mitte). Schließlich, nach Abschluss der Platzierung des Katheters Nahtmaterial der Katheter (unten). <img alt="Abbildung 4" src="/files/ftp_upload/3496/3496fig4.jpg" data-altupdatedat="1788238805000" data-alt="Abbildung 4"> Abbildung 4. Representative Blutdruck messen Sie von einer bewussten frei beweglichen Tier entnommen.

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Arterielle und Venenkatheterverfahren haben in der Vergangenheit sowohl akut und chronisch-Monitor Blutdruck, Blut-Probe eingesetzt und liefern Substanzen in der experimentellen Ratten-Tiermodell 1-4. Ein großer Vorteil dieser OP-Besetzungen ist, dass es Verfahren zur Überwachung, einschließlich Blutentnahme, Medikamentengabe und Überwachung des Blutdrucks, um mit minimalen Störungen und / oder Stress für das Tier 1 durchgeführt werden kann. Zahlreiche Forscher haben Protokolle geschrieben und haben spezielle Methoden, mit denen ihr Labor führt die Operation 5-8. Das Video und Illustrationen zeigen, was unser Labor gefunden hat, erfolgreich zu sein im Hinblick auf die femoralen arteriellen und venösen Katheterisierung Verfahren. Ratten werden in der Regel im Labor für eine Vielzahl von wissenschaftlichen Studien wegen ihrer geringen Größe und Bequemlichkeit in der Handhabung verwendet. Es gibt mehrere Orte, an denen eine chronischeKatheter kann innerhalb eines Tieres gestellt werden, einschließlich der Halsschlagader, Bauchschlagader, Halsschlagader und der Femoralarterie, um nur einige zu nennen. Die Ratte femoral Standort für chronische Katheterisierung führt zu einer erhöhten Länge der Katheter Durchgängigkeit und hatte die schnellste Erholung der präoperativen Tier Gewicht im Vergleich zu anderen Standorten Katheter 9. Zahlreiche Forscher haben verwendet Verweilkatheter für akute sowie chronische Blutentnahme 1-5,11-13. In vielen Studien mehrere Blutabnahmen sind eines Tieres erforderlich und externe Kanülierung / Katheterisierung ist eine Methodik, die vorteilhaft aufgrund ihrer nicht-traumatischer Natur ist, außerdem kann es geschehen, während das Tier bei Bewusstsein ist, wird also nicht durch die Wirkung von Anästhetika beschränkt und auch das Tier frei bewegen 1,10. Die beste Methode, mit der Blutproben zu erhalten und zu Stresshormone bei Nagern zu messen ist seit langem 6,13 debattiert. Im Hinblick auf die Pharmakokinetik studies erlaubt Katheterisierung der Forschung Tier wiederholt Blutproben mit minimaler Zurückhaltung bei der Verwendung eines chronisch implantierten Katheter-System. Darüber hinaus haben Studien reduzierte basale Konzentrationen von Adrenalin, Noradrenalin und Dopamin im Plasma von sich frei bewegenden Ratten (Vena Katheter) im Vergleich zu Tieren, die behandelt worden sind (30 Sekunden) und oder zurückhaltend (5 Minuten) 14 gezeigt. Eine weitere Methode, mit der Zunahme der Belastung zu erkennen, um durch Messung Plasma Corticosteron Ebenen. Bisher wurde vermutet, dass auch nach drei Minuten vor vier Tagen chirurgischen Recovery-Zeiten, dass Plasma-Corticosteron Ebenen in der chronischen kanülierten Ratten 15 wurden erhöht. Allerdings haben die jüngsten Verbesserungen in der Methodik ermittelt, dass es keine Unterschiede in der Baseline-Plasma-Corticosteron Ebenen in die Jugularvene kanülierten Ratten im Vergleich zu uncannulated Ratten 16. Darüber hinaus HPLC-Methode für Corticosteron Analyse ergab auch, dass corticosterFallstecker durch Zurückhaltung Stress erhöht, aber stabil, nachdem Vena Katheterisierung 16. Ein zusätzlicher Einsatz von chronischer Katheterisierung ist die Messung von Blutdruck und Herzfrequenz bei Nagetieren. Es gibt mehrere Methoden, die genutzt werden, um den Blutdruck und die Herzfrequenz in der Ratte zu messen sind, dazu gehören die nicht-invasive Schwanz Manschette Methoden, Radiotelemetrie Verfahren und direkte Verweilkatheter. Jede Methode hat ihre Vor-und Nachteile, die im Detail in anderen Publikationen beschrieben sind. Indwelling Flüssigkeit gefüllte Katheter kann in mehrere Arterien innerhalb der Ratte implantiert werden. Die Femoralarterie ist nur eine Arterie, die für diese Maßnahme verwendet werden können. Für Blutdruck / Herzfrequenz misst, ist das distale Ende des Katheters mit einem kalibrierten Druckmessumformer verbunden. Der Katheter kann in eine schützende Feder, die an einem Schwenkarm verbunden ist, um freie Bewegung des Tieres erlauben untergebracht werden, oder an eine Schaltfläche chirurgischentisch an das Tier implantiert. Dauerkatheter haben den Vorteil der Minimierung der langfristigen Belastung des Tieres 17,18. Neben den Materialien sind preiswert, ist die Kalibrierung einfach für Druck misst und kontinuierliche langfristige Maßnahmen können unter den Bedingungen der relativ geringen Belastung für viele Wochen 19 bezogen werden. Wir wäre nachlässig, wenn wir nicht erwähnen, dass es Nachteile dieser Technik, einschließlich, es ist ein chirurgisch-invasive Technik ist, ist die Wartung des Katheters erforderlich, um die Durchgängigkeit, Schäden an der Arterie durch die Implantation des Katheters und die Aufrechterhaltung Potenzial der Infektion um einige zu nennen. Bei chronischen Maßnahmen des Blutdrucks direkte Aufnahmen von chronisch implantierten arteriellen Katheter sind technisch anspruchsvoll, aber sind genauer und kann kontinuierlich, ohne die Tiere getan werden. Tail-Manschette Messungen sind weniger genau, aber sie nicht operiert werden und kann auch wiederholthg. Tail-Manschette Methoden erfordern sowie Handhabung Erwärmung des Tieres bis zum Schwanz Schiffe erweitern, um den Nachweis der Puls 20 zu erleichtern. Handhabung und den zusätzlichen Hitzestress kann Auswirkungen auf den Blutdruck-Messungen, also nicht, dass wirklich genau misst. Außerdem sieht die non-direct tail-cuff-Methode nicht zulassen, einfach gleichzeitige Blutentnahme oder Medikamentengabe. Eine weitere Methode, durch die direkte Maßnahme erreicht werden kann, ist mit telemetrischen Methoden. Telemetry ermöglicht hochwertige Aufnahmen des Blutdrucks (und andere Maßnahmen) kontinuierlich für längere Zeit in der bewussten frei beweglichen Tieren ohne Zurückhaltung oder Anästhetika 18. Allerdings, Telemetrie-Geräte, während ideal sind sehr teuer. Wenn die Telemetrie Vergleich gehören Katheterisierung Vorteile: verringerte &quot;setup&quot; und Betriebskosten, die Fähigkeit, leicht zu verwalten Drogen und leicht nehmen Blutproben in bewusster frei beweglichen Tieren. Die administriertion von Medikamenten und Substanzen, und, um Blutproben aus der Forschung Tier kann geschehen, während minimal der Tiere zu stören, damit Minimierung von Stress für das Tier und damit für eine genauere Messung werden.

<html><table border="1"><tbody><tr><td> Name </td><td> Typ </td><td> Firma </td><td> Katalog-Nummer </td></tr><tr><td> Arteriellen Katheter </td><td> Verbrauchsmaterial </td><td> SAI Infusion </td><td> RFA-01 </td></tr><tr><td> Venenkatheter </td><td> Verbrauchsmaterial </td><td> Scientific Commodities, Inc. </td><td> BB518-20 &amp; BB31785-V / 2 </td></tr><tr><td> 27g 1 / 2 &quot;stumpfen Nadel </td><td> Ausrüstung </td><td> Integrierte Dispensing Solutions, Inc. </td><td> 9991113 </td></tr><tr><td> 23g 1 / 2 &quot;stumpfen Nadel </td><td> Ausrüstung </td><td> Integrierte Dispensing Solutions, Inc. </td><td> 9991109 </td></tr><tr><td> <a href="http://www.adinstruments.com/products/hardware/research/product/PL3508/" target="_blank">PowerLab/8SP</a> </td><td> Ausrüstung </td><td> <a href="http://www.adinstruments.com/" target="_blank">ADInstruments</a> </td><td>w.adinstruments.com/products/hardware/research/product/PL3508 / &quot;target =&quot; _blank &quot;&gt; ML765 </td></tr><tr><td> <a href="http://www.adinstruments.com/products/hardware/research/product/FE224/" target="_blank">Quad-Brücke</a> </td><td> Ausrüstung </td><td> <a href="http://www.adinstruments.com/" target="_blank">ADInstruments</a> </td><td> <a href="http://www.adinstruments.com/products/hardware/research/product/FE224/" target="_blank">ML118</a> </td></tr><tr><td> <a href="http://www.adinstruments.com/products/software/research/LabChart-Software/" target="_blank">LabChart 7,2</a> </td><td> Software </td><td> <a href="http://www.adinstruments.com/" target="_blank">ADInstruments</a> </td><td></td></tr><tr><td> <a href="http://www.adinstruments.com/products/hardware/research/product/MLT844/" target="_blank">BP Transducer mit Hahn &amp; Cable</a> </td><td> Ausrüstung </td><td> <a href="http://www.adinstruments.com/" target="_blank">ADInstruments</a></td><td> <a href="http://www.adinstruments.com/products/hardware/research/product/MLT844/" target="_blank">MLT844</a> </td></tr><tr><td> Single Channel Swivel </td><td> Ausrüstung </td><td> Instech </td><td> 375/22PS </td></tr><tr><td> Single Axis-Counter Balance Swivel Mount </td><td> Ausrüstung </td><td> Instech </td><td> CM375BP </td></tr><tr><td> Covance Infusion Harness </td><td> Ausrüstung </td><td> Instech </td><td> CIH105 </td></tr><tr><td> Table Top Isofluran-Narkose-Einheit </td><td> Ausrüstung </td><td> Protech International, Inc. </td><td> 61020 </td></tr><tr><td> Rodent Anesthesia Mask </td><td> Ausrüstung </td><td> Protech International, Inc. </td><td> RAM-02 </td></tr><tr><td> Rodent Induction Kammer </td><td> Ausrüstung </td><td> Protech International, Inc. </td><td> RIC-01 </td></tr><tr><td> Anästhesie Gas Filterbehälter </td><td> Ausrüstung </td><td> Protech Internationalenal, Inc. </td><td> 80120 </td></tr><tr><td> Tabletop Laminar Flow Hood </td><td> Ausrüstung </td><td> Sentry Air Systems, Inc. </td><td> SS-200-WSL </td></tr><tr><td> Oster Golden A5 </td><td> Ausrüstung </td><td> Oster Professional Products </td><td> 78005-140 </td></tr><tr><td> Fiber Optic Light mit Dual-Schwanenhals-Führer </td><td> Ausrüstung </td><td> LW Scientific, Inc. </td><td> ILL-1502-DGG1 </td></tr><tr><td> Deltaphase Isotherme Pad </td><td> Ausrüstung </td><td> Braintree Scientific </td><td> 39DP </td></tr><tr><td> Wattestäbchen </td><td> Verbrauchsmaterial </td><td> Solon Manufacturing Company </td><td> 36200 </td></tr><tr><td> Gazetupfer 2 &quot;x2&quot; </td><td> Verbrauchsmaterial </td><td> Kendall cherheit </td><td> 2146 </td></tr><tr><td> 5-0 Nylonfaden </td><td> Verbrauchsmaterial </td><td> Ethicon </td><td> 661G </td></tr><tr><td> 4-0 Seidenfaden </td><td> Verbrauchsmaterial </td><td> Deknatel </td><td> 8-S, 136075-0208 </td></tr><tr><td> Gewebekleber </td><td> Verbrauchsmaterial </td><td> 3M </td><td> 1469SB </td></tr><tr><td> Splinter &amp; Fasszange </td><td> Ausrüstung </td><td> George Tiemann &amp; Company </td><td> 160-55 </td></tr><tr><td> Studentische Tissue Zange </td><td> Ausrüstung </td><td> Feine Science Tools, Inc. </td><td> 91121-12 </td></tr><tr><td> Micro Pinzetten / Pinzette Bracken </td><td> Ausrüstung </td><td> George Tiemann &amp; Company </td><td> 10-1942 </td></tr><tr><td> Extra Fine Graefe Zange </td><td> Ausrüstung </td><td> Feine Science Tools, Inc. </td><td> 11152-10 </td></tr><tr><td> Olsen-Hegar Nadelhalter </td><td> Ausrüstung </td><td> Feine Science Tools, Inc. </td><td> 12002-12 </td></tr><tr><td> Studentische Halsted-Mosquito Hemostat </td><td> Ausrüstung </td><td> Feine Science Tools, Inc. </td><td> 91308-12 </td></tr><tr><td> Rochester Pean Kraftp </td><td> Ausrüstung </td><td> Biomedical Research Instruments, Inc. </td><td> 31-1640 </td></tr><tr><td> Studentische Chirurgische Schere </td><td> Ausrüstung </td><td> Feine Science Tools, Inc. </td><td> 91402-12 </td></tr><tr><td> Dumont Pinzetten </td><td> Ausrüstung </td><td> Feine Science Tools, Inc. </td><td> 11251-35 </td></tr><tr><td> Micro Präparierscheren </td><td> Ausrüstung </td><td> George Tiemann &amp; Company </td><td> 160-210 </td></tr><tr><td> Strabismus Schere </td><td> Ausrüstung </td><td> Feine Science Tools, Inc. </td><td> 14075-11 </td></tr><tr><td> Hartman Hemostat </td><td> Ausrüstung </td><td> Feine Science Tools, Inc. </td><td> 13003-10 </td></tr><tr><td> Tissue Scissors </td><td> Ausrüstung </td><td> George Tiemann &amp; Company </td><td> 160-150 </td></tr><tr><td> Retractor </td><td> Ausrüstung </td><td> Custom Made </td><td></td></tr></tbody></table>

femoral arterielle und venöse katheterisierung zur blutentnahme, drug administration und conscious blutdruck und herzfrequenz-messungen

Femoral Arterial and Venous Catheterization for Blood Sampling, Drug Administration and Conscious Blood Pressure and Heart Rate Measurements

In mehreren Bereichen der Studie, die das Kreislaufsystem in Laborstudien Zugang erforderlich ist. Pharmakologische Studien an Ratten mit chronisch implantierten Kathetern ermöglichen ein Forscher, um effektiv und human zu verwalten Substanzen, führen wiederholte Blutentnahme und hilft bei der bewussten direkten Messungen von Blutdruck und Herzfrequenz. Sobald der Katheter implantiert langfristige Probenahme ist möglich. Durchgängigkeit und Katheter Leben hängt von mehreren Faktoren ab, einschließlich der Sperre Lösung, Spülen Regime und Katheter Material. Dieses Video demonstriert die Methodik der Femoralarterie und Katheterisierung der Ratte. Darüber hinaus wird das Video demonstrieren die Verwendung der femoralen venösen und arteriellen Katheter zur Blutentnahme, Medikamentengabe und die Nutzung des arteriellen Katheter in den Messungen von Blutdruck und Herzfrequenz in eine bewusste frei beweglichen Ratten. Eine Leine und Geschirr an einem Schwenk-System wird damit das Tier ho werdeneingesetzt und haben Proben entnommen, indem die Forscher mit minimalen Unterbrechungen für das Tier. Zur Aufrechterhaltung Durchgängigkeit des Katheters ist eine sorgfältige tägliche Pflege des Katheters erforderlich mit Lock-Lösung (100 U / ml heparinisierten Kochsalzlösung), maschinell geschliffen stumpfe Spitze Injektionsnadeln und die Verwendung von Spritzenvorsatzfilter, Verunreinigungen zu minimieren. Mit einer sorgfältigen aseptischen chirurgischen Techniken, richtige Katheter Materialien und sorgfältige Wartung Katheter-Techniken ist es möglich, Patent-Katheter und gesunde Tiere für längere Zeit (mehrere Wochen) aufrecht zu erhalten.

Chronische Katheterisierung von Blutgefäßen in der Ratte ist oft für die Verwaltung von Stoffen erforderlich, erhalten Blutprobe über einen Zeitraum oder für den direkten bewussten Blutdruckmessungen. Femoralarterie Katheterisierung der Ratte und entsprechende Messungen des Blutdrucks in der bewussten Tier nachgewiesen werden.

Femoral arterielle und venöse Katheterisierung zur Blutentnahme, Drug Administration und Conscious Blutdruck und Herzfrequenz-Messungen

In vielen Forschungsbereichen ist der Zugang zum Kreislaufsystem in Laborstudien erforderlich. Pharmakologische Studien an Ratten unter Verwendung chronischer ...

Das übergeordnete Ziel dieses Verfahrens besteht darin, die Methodik der Katheterisierung der Arteria femoralis und der Vena femoralis für chronische und akute Anwendungen zu veranschaulichen. Dies wird erreicht, indem zunächst eine Tasche im Unterschenkel für die Katheterplatzierung präpariert wird. Der zweite Schritt besteht darin, die Arteria femoralis und die Vena femoralis zu isolieren und sie für die Katheterplatzierung vorzubereiten.Der dritte Schritt besteht darin, die Katheter in der Vena femoralis und der Arteria femoralis einzuführen und zu befestigen. Der letzte Schritt ist der chirurgische Abschluss, einschließlich der Befestigung der Katheter, um deren Bewegung während der Tierbewegung oder des Wachstums zu verhindern. Die Schnitte werden verschlossen und das Tier wird unter sorgfältiger aseptischer chirurgischer Technik in eine Tether-Jacke mit korrekter Katheterplatzierung und -pflege eingebracht.Es ist möglich, patente chronische Katheter für zukünftige Blutentnahmen, die Verabreichung von Medikamenten oder die Messung von Blutdruck und Herzfrequenz zu erhalten. Eine visuelle Demonstration dieser Methode ist entscheidend. Die derzeit verfügbaren Abbildungen und Textprotokolle enthalten nur unzureichend die notwendigen detaillierten visuellen Darstellungen, die zur Umsetzung dieser Methode erforderlich sind.Die Durchführung des Verfahrens erfolgt durch Dr. Carrie Northcott. Nach Anästhesie, Rasur und Desinfektion des Versuchstieres legen Sie eine sterile Abdeckung über die Operationsstellen. Beginnen Sie dann mit einem horizontalen Schnitt von etwa einem bis eineinhalb Zentimeter Länge am Rücken des Rattenschädels auf Höhe der Schulterblätter, wozu Sie eine Schere mit stumpfen Spitzen verwenden. Präparieren Sie eine subkutane Tasche in der Größe einer 25-Cent-Münze im Rücken des Tieres. Bedecken Sie den Schnitt mit einem sterilen, in Kochsalzlösung getränkten Mulltupfer. Drehen Sie dann die Ratte auf den Rücken und führen Sie einen etwa ein bis eineinhalb Zentimeter langen Schnitt entlang des Winkels des Hinterbeins durch. Halten Sie nun die stumpfe Schere in einem Winkel von 45 Grad und dissezieren Sie innerhalb des Schnitts, um das Bindegewebe zu lösen, bis die Arteria femoralis und Vena femoralis freigelegt sind.Nachdem man stumpf einen weiteren kleinen, etwa viertelstückgroßen Hautlappen unterschnitten hat, diesmal entlang der Innenseite des Beins, setzt man Haken in den Schnittbereich ein, um die Arterie und Vene vollständig einsehbar zu machen. Anschließend löst man mit feinen Pinzetten vorsichtig den Nerv, der entlang der Arteria femoralis verläuft, unter Schonung des Nervs von Arterie und Vene. Danach werden Arterie und Vene gemeinsam als Einheit freigelegt, wobei ein Abschnitt von etwa einem halben bis einem Zentimeter Länge beider Gefäße sichtbar gemacht wird.Halten Sie die Pinzette nun senkrecht zu den Gefäßen und trennen Sie die Gefäße parallel, um Schäden zu vermeiden. Beginnen Sie damit, etwas 5-cm-Gaze in steriler Kochsalzlösung anzufeuchten. Legen Sie die Gaze danach über die Inzisionen und drehen Sie die Ratte auf den Bauch, wobei sichergestellt werden muss, dass die Spitze der Hämostaten nach oben und nicht Richtung Wirbelsäule zeigt.Setzen Sie eine lange, gerade Rochester-Zange ein. Führen Sie sie vier Schritte in den Schnitt am Rücken des Tieres ein und leiten Sie sie subkutan entlang des Rückens bis zur Hüftgegend auf Höhe der Hüften. Drehen Sie die Zange in Richtung des Schnitts und schieben Sie die Spitze der Zange aus dem vorbereiteten Beinschnitt heraus.Dann die Enden der Katheter, die gegenüber den mit der Pinzette einzuführenden Enden liegen, vorsichtig greifen. Die Katheter vorsichtig durch den Rücken und am Hals herausziehen. Inzision. Abgestumpfte Nadeln an Spritzen mit einer Heparin-Salzlösung von 20 Einheiten pro Milliliter füllen und anschließend in die Katheterenden einführen, wobei darauf geachtet werden muss, dass keine Luftblasen entstehen; die Katheter füllen und überprüfen, ob die Katheter durchgängig sind.Schließlich die Spritzen am Ende der Leitungen befestigt lassend, drehe man die Ratte erneut auf den Rücken. Zunächst lege man ein gefaltetes Stück steriler 4-0-Seide unter die Femoralvene und schneide dann die Seide am gefalteten Ende durch, sodass sich zwei Stücke Seide unter der Vene befinden.Danach die beiden Seidenfäden trennen, wobei ein Fadenstück distal in Richtung des Beins des Tieres gezogen und das andere proximal in Richtung des Körpers gezogen wird. Mit der Naht auf der proximalen Seite, näher am Körper, eine lose Ligatur knoten. Diese nicht vollständig festziehen.Fassen Sie nun die Seide am Knoten mit einer kleinen Hämostaseklemme und ziehen Sie sie straff, ohne den Knoten fester zu ziehen. Ziehen Sie das andere Seidenstück so weit wie möglich in Richtung des Beins, um eine gute Länge des Gefäßes zum Arbeiten zu erhalten. Verwenden Sie dazu eine Pinzette.Binden Sie diese Naht zu einem Dreifachknoten. Verschließen Sie das Gefäß. Geben Sie ein bis zwei Tropfen Lidocain mit der van-Mikro-Dissektionspinzette auf die Vene.Führen Sie einen kleinen Schnitt in einem Winkel von 45 Grad und etwa ein Drittel bis ein Viertel in die Vene hinein durch. Greifen Sie dann vorsichtig den Venenkatheter mit einer Pinzette. Danach führen Sie die feine Spitze einer 45-Grad-Pinzette in den Schnitt ein.Öffnen Sie die 45-Grad-Zange vorsichtig innerhalb der Vene und setzen Sie dann den venösen Katheter behutsam unter der Zange hindurch, um ihn in die Vene einzuführen. Sobald sich der Katheter im Gefäß befindet, halten Sie ihn stets mit einer Zange fest, bis er sicher im Tier befestigt ist; andernfalls besteht die Gefahr, dass der Katheter herausfällt, sobald die Ligatur erreicht wird. Lösen Sie den Knoten, indem Sie die Hähnchenzange justieren, sodass das Seidenmaterial nicht mehr straff gespannt ist und der Katheter vollständig eingeführt werden kann.Wenn der Katheter vollständig eingeführt ist, ziehen Sie die proximale Ligatur um die Vene im Katheter fest, indem Sie einen dreifachen Knoten mit dem Seidenfaden in der Nähe des Beins binden. Für eine distale Ligatur binden Sie den Seidenfaden um den Katheter. Ziehen Sie dann die Spritze langsam zurück, bis eine kleine Menge Blut im Katheter sichtbar ist, um sicherzustellen, dass der Knoten nicht zu fest ist.Nachdem überprüft wurde, dass der Katheter funktionsfähig ist, den Kolben so weit niedrücken, bis kein Blut mehr sichtbar ist. Anschließend einen dreifachen Knoten in das Seidenfadenmaterial einbinden, um sicherzustellen, dass der Katheter nicht aus der Vene austritt. Danach auf ähnliche Weise die Femoralarterie katheterisieren.Legen Sie kurz vier Ohm Seide unter die Arterie. Trennen Sie dann die beiden Seidenstücke, indem Sie eines distal in Richtung des Beins des Tieres ziehen und das andere proximal in Richtung des Körpers ziehen. Im Gegensatz zur Vene ziehen Sie beim Katheterisieren der Arterie zuerst das distale Seidenstück in Richtung des Beins und binden diese Naht. Mit einem Dreifachknoten, der den Gefäßverschluss verursacht, da das Blut vom Herzen zum Bein fließt. Dies führt dazu, dass sich das Gefäß erweitert. Nun verbleibt das proximale Seidenstück; legen Sie eine lockere Ligatur an, greifen Sie die Seide am Knoten mit kleinen Hämorrhagieklemmen und ziehen Sie sie straff, ohne den Knoten festzuziehen.Tragen Sie anschließend ein bis zwei Tropfen Lidocain auf die Arterie auf. Führen Sie einen kleinen Schnitt in einem Winkel von 45 Grad durch, etwa ein Drittel bis ein Viertel durch die Arterie hindurch, halten Sie das Lumen mit einer Pinzette geöffnet und schieben Sie den Katheter in die Arterie. Verknoten Sie dann mithilfe der proximalen Ligatur einen dreifachen Knoten um Arterie und Katheter.Überprüfen Sie anschließend den Blutfluss im Katheter und binden Sie die distale Ligatur wie zuvor. Nachdem Sie sichergestellt haben, dass der Katheter funktionsfähig ist, drücken Sie den Kolben so lange herunter, bis kein Blut mehr sichtbar ist, und beenden Sie das Binden eines dreifachen Knotens im Seidenfaden. Um sicherzustellen, dass der Katheter nicht herauskommt, formen Sie eine münzgroße Schleife – etwa von der Größe einer 10-Cent- bis 25-Cent-Münze – in den Kathetern und platzieren Sie diese an der Innenseite des Beins.Nachdem beide Katheter platziert wurden, sichern Sie sie mit ein bis zwei Stichen aus fünf-oh-chirurgischem Nahtmaterial in der Muskelschicht. Schließen Sie den Einschnitt mit durchgehenden Nähten unter Verwendung von vier-oh-lon, und machen Sie dann, nachdem die Ratte auf den Bauch gedreht wurde, eine weitere Schleife in den Kathetern in etwa der Größe einer 25-Cent-Münze und platzieren Sie diese in der im Rückenbereich des Tieres präparierten Tasche. Schließen Sie den Einschnitt mit Nähten.Danach mit einem Tropfen Vet-Bond die Katheter am Rücken befestigen. Die Katheter nahe der Rückeninzision mit gepolsterten Hämostaten abklemmen und die Spritzen von den Enden entfernen. Schließlich wird die Ratte mit einer Anschlussvorrichtung (Tether-Typ) und dazugehöriger Weste ausgestattet, wobei die Katheter durch die Feder an der Weste geführt werden.Setzen Sie die Spritzen wieder auf die Katheter. Entfernen Sie die Hämostasen und ziehen Sie die Jacke fest. Danach ersetzen Sie die Hämostasen und kürzen Sie die Katheter.Verschließen Sie nun die Katheter, um die Heparinsperrung aufrechtzuerhalten, und entfernen Sie die Hämostaten. Beginnen Sie damit, den Katheter mit gepolsterten Pinzetten zu klemmen. Anschließend entfernen Sie den Katheter.Stecken Sie eine Kanüle mit stumpfem Ende auf und setzen Sie eine Spritze mit Verschlusslösung mit Verriegelungssystem auf den Katheter, öffnen Sie die Klemme der Pinzette und füllen Sie anschließend den Katheter mit 0,3 Millilitern Verschlusslösung. Klemmen Sie den Katheter und entfernen Sie die Spritze. Ersetzen Sie danach den Katheterstopfen und öffnen Sie die Pinzette.Schieben Sie den Verschluss schließlich leicht nach innen, um sicherzustellen, dass sich kein Blut in der Katheterspitze befindet. Nach der chirurgischen Genesung können Blutdruckmessungen am wachen, frei beweglichen Tier durchgeführt werden. Die Ausrüstung, die für diese Messungen verwendet wird, umfasst das Power Lab, acht sp, die Quad-Brücke und den Blutdrucktransducer, wie mit den gestrichelten Linien gekennzeichnet.In diesem Experiment wurde ein Phenyl-, Rine- und Alpha-1-adrenerger Rezeptoragonist über die Femoralvenenleitung verabreicht. Der Blutdruck des Tieres wurde gleichzeitig über die Femoralarterienleitung gemessen, und wie in der Abbildung zu sehen ist, stieg der Pulsdruck, dargestellt im oberen Diagramm, sowie der mittlere arterielle Druck, dargestellt im unteren Diagramm, unmittelbar nach Gabe des Medikaments an. Die Herzfrequenz hingegen sank vorübergehend und stieg danach allmählich wieder auf das Ausgangsniveau vor der Verabreichung von Phenylephrin an.Nachdem das Tier die Wirkungen des alpha-adrenergen Agonisten überwunden hatte, führte die Gabe des nicht-selektiven alpha-adrenergen Antagonisten Phentolamin, gekennzeichnet durch die zweite gestrichelte Linie, zu einer Abnahme des Blutdrucks des Tieres. Wenn diese Technik einmal beherrscht ist, kann sie erneut innerhalb von 20 bis 30 Minuten durchgeführt werden.

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Forschung

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Medicine

Medizin

Vaskuläre Zugänge zur Messung der Hämodynamik, zur Bereitstellung von Flüssigkeiten und zur Durchführung von Blutproben sind wichtig für jede Kleintiermodellstudie. Wir stellen eine Technik zur Implantation von Kathetern in die Halsschlagader und die Vena jugularis communis bei einer anästhesierten Ratte vor, um sie an ein System zur Durchführung von Monitoring, Infusionen und Probenahmen anzuschließen.

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Femoral arterielle und venöse Katheterisierung zur Blutentnahme, Drug Administration und Conscious Blutdruck und Herzfrequenz-Messungen (Video) | JoVE Journal

Femoral arterielle und venöse Katheterisierung zur Blutentnahme, Drug Administration und Conscious Blutdruck und Herzfrequenz-Messungen

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