Use of Interferon-&gamma; Enzyme-linked Immunospot Assay to Characterize Novel T-cell Epitopes of Human Papillomavirus

Xuelian Wang; William W. Greenfield; Hannah N. Coleman; Lindsey E. James; Mayumi Nakagawa

doi:10.3791/3657

Verwendung von Interferon-γ enzyme-linked immunospot Assay zur Novel T-Zell-Epitope des humanen P...

JoVE Journal
Immunology and Infection

A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.

JoVE Journal Immunology and Infection

Use of Interferon-γ Enzyme-linked Immunospot Assay to Characterize Novel T-cell Epitopes of Human Papillomavirus

Verwendung von Interferon-γ enzyme-linked immunospot Assay zur Novel T-Zell-Epitope des humanen Papillomvirus Charakterisieren

Full Text

13,020 Views

13:41 min

March 8, 2012

DOI: 10.3791/3657-v

Xuelian Wang¹, William W. Greenfield², Hannah N. Coleman³, Lindsey E. James³, Mayumi Nakagawa³

¹Department of Microbiology and Parasitology, College of Basic Medical Sciences,China Medical University , ²Department of Obstetrics and Gynecology, College of Medicine,University of Arkansas for Medical Sciences , ³Department of Pathology, College of Medicine,University of Arkansas for Medical Sciences

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Die Charakterisierung von T-Zell-Epitopen von Krankheitserregern, die lokalisierte Infektionen verursachen, wie z.B. humane Papillomaviren, ist aufgrund der begrenzten Anzahl von T-Zellen im Umlauf eine Herausforderung. Es wird ein Verfahren beschrieben, bei dem seltene T-Zellen isoliert und ausgehend von einer sehr kleinen Anzahl von Zellen charakterisiert wurden.

Das übergeordnete Ziel dieses Verfahrens ist es, HPV-Antigen-spezifische T-Zell-Klone von Patienten zu isolieren, zu züchten und zu analysieren. Etablieren Sie zunächst eine Zöliakie-T-Zelllinie mit acht Zöliakie, führen Sie einen SBOT-Assay durch und schätzen Sie die Häufigkeit antigenspezifischer T-Zellen. Nach der Isolierung der antigenspezifischen T-Zell-Klone auf der Grundlage der Interferon-Gamma-Sekretion wird ein Hochdurchsatz-Screening-Interferon-Gamma-Sbot-Assay durchgeführt, um epitopspezifische T-Zell-Klone zu identifizieren.

Fahren Sie mit der Charakterisierung der T-Zell-Klone für das minimal optimale Peptid fort. Epitopsequenzen bestimmen auch, ob das Epitop endogen prozessiert ist. Identifizieren Sie das HLA-Restriktionselement und bewerten Sie Kreuzreaktivitäten zu anderen Hochrisiko-HPV-Typen.

View the full transcript and gain access to thousands of scientific videos

Explore More Videos

Interferon-gamma Enzym-linked Immunospot Assay T-Zell-Epitope Humanes Papillomavirus (HPV) Protokoll Isolierung und Charakterisierung seltener T-Zellen HPV-Proteine Peptid-spezifische T-Zellen Loop Electrical Excision Procedure Hochwertige Plattenepithel-Intraepithelläsionen Humanes Papillomavirus Typ 16 (HPV 16) E6- und E7-Proteine IFN-g Enzyme-linked Immunospot (ELISPOT) Assay Synthetische Peptide Epitopspezifische T-Zellen CD8 T-Zell-Isolationskit Miltenyi Biotec