Schnelle Bestimmung der Wärmeleistung und nozizeptiven Grenzwerts bei diabetischen Ratten

Das übergeordnete Ziel dieses Verfahrens ist es, die thermische nozizeptive Schwelle von Kontroll- und Diabetikerratten zu bestimmen. Der erste Schritt besteht darin, ein Tier auf die inkrementelle Heizplatte und das Analgesiemessgerät zu legen. Anschließend wird die Temperatur der Heizplatte allmählich erhöht, während sich die Oberfläche erwärmt.

Das Tier wird nicht auf anstößige Verhaltensweisen beobachtet. Wenn dieses Verhalten beobachtet wird, wird die Heizung gestoppt und die Temperatur der Platte zu diesem Zeitpunkt aufgezeichnet. Letztendlich können Ergebnisse erzielt werden, die Veränderungen der thermischen nozizeptiven Schwelle bei Tieren zeigen, die mit Analgetika behandelt wurden oder an einer schmerzhaften diabetischen Neuropathie leiden.

Der Hauptvorteil dieser Technik gegenüber bestehenden Methoden wie der Heizplatte, die normalerweise als Superschwellentemperatur eingestellt wird, besteht darin, dass unsere Methoden die Temperatur der Platte allmählich erhöhen, was eine genaue Bestimmung der thermischen nozizeptiven Schwelle ermöglicht. Die thermische nozizeptive Schwelle (TNT) wird mit Hilfe der inkrementellen Heizplattenanalgesie, des Messgeräts oder des IH pam bestimmt. Zu den Komponenten dieses Systems gehören eine Beobachtungskammer aus Plexiglas, eine temperaturgesteuerte Aluminiumplatte, eine Tastatur für die Programmierung und ein Fußschalter für die Fernsteuerung des Geräts.

Die Daten werden mit einer maßgeschneiderten Software auf einem Computer in der Nähe gesammelt. Alternativ können Ausdrucke über eine serielle Schnittstelle am Gerät gedruckt werden. Platzieren Sie einen Spiegel hinter der Plexiglaskammer, um die Sichtbarkeit des Verhaltens des Tieres zu erhöhen.

Stellen Sie anschließend die gewünschten Heizraten sowie die anfänglichen Standby- und Endabschalttemperaturen ein. Drücken Sie den Fußschalter, um das System zu starten und zu stoppen. Vergewissern Sie sich, dass die anfänglichen Standby- und Endabschalttemperaturen sowie die Zeit, die zum Erreichen der Endtemperatur benötigt wird, aufgezeichnet werden.

Auf Wunsch kann der Experimentator das System an sich selbst testen. Ziehen Sie die Hand im Moment des Schmerzes von der Metallplatte zurück. Die Wahrnehmung darf weder der Haut schaden noch später Unbehagen hervorrufen.

Beginnen Sie die Akklimatisierung am Vorabend, indem Sie Käfige auf den Prüfstand stellen, auf dem der Test stattfinden wird. Zwei Stunden vor dem Test. Schalten Sie die IH-Pfanne ein, um die Tiere mit den Hintergrundgeräuschen des Geräts vertraut zu machen.

An dieser Stelle kann das System wie zuvor gesehen eingerichtet und getestet werden. Nachdem sich die Tiere an die Umgebung gewöhnt haben, setzen Sie eine Ratte vorsichtig in die Plexiglaskammer auf der warmen Oberfläche. Lassen Sie das Tier die Kammer einige Minuten lang erkunden.

Beginnen Sie mit dem Testen. Sobald das Tier sich wohl fühlt, um den Versuch zu starten, drücken Sie den Fußschalter, um mit dem Erhitzen der Platte zu beginnen. Beobachte das Verhalten des Tieres, während sich die Platte erhitzt.

Im Allgemeinen werden Personen, die mit dieser Methode noch nicht vertraut sind, Schwierigkeiten haben, da die Identifizierung von massenhaft beleidigendem Verhalten nicht immer einfach ist und Übung erfordert. Kein offensives Verhalten ist durch das Lecken, Schütteln oder Anheben einer der Hinterporen gekennzeichnet. Es ist nützlich zu beachten, dass das erste beobachtete Verhalten das Lecken der vier Poren sein kann, gefolgt von einer Reaktion der Hinterporen.

Wenn ein äußerst anstößiges Verhalten beobachtet wird, drücken Sie den Fußschalter, um den Versuch zu beenden und das Tier zurück in seinen Heimatkäfig zu bringen. Die Temperatur, die dieses Verhalten hervorruft, wird als thermische nozizeptive Schwelle oder TNT des Kontrolltieres angesehen. Das Gerät wird gereinigt und der Test für das nächste gesehene Tier wiederholt.

Hier sind die thermischen nozizeptiven Schwellenwerte von normalen jungen erwachsenen Ratten und Mäusen. Die Daten hier zeigen, dass die TNT von Ratten nicht variierte, wenn sie über einen Zeitraum von vier Tagen getestet wurden. In ähnlicher Weise war die TNT von Mäusen zwischen verschiedenen Altersgruppen konsistent.

In diesem Beispiel wurde das TN TS von jungen erwachsenen STZ-Diabetikern wiederholt gemessen. Eine stetige Abnahme der thermischen nozizeptiven Schwellen ist ab zwei Wochen nach der Induktion von Diabetes zu beobachten. Hier wurde das IH pam verwendet, um die akuten antinozizeptiven Eigenschaften des schmerzstillenden Wirkstoffs zu testen.

A, die Verbindung erzeugte bei Kontrolltieren im Vergleich zu denen, die Vehikel erhielten, eine milde analgetische Wirkung. Die Analgesie war jedoch bei diabetischen Tieren, die den Wirkstoff erhielten, im Vergleich zu Vehikelkontrollen ausgeprägter. Beim Versuch dieses Verfahrens ist es sehr wichtig, daran zu denken, das Verhalten des Tieres kontinuierlich zu überwachen, insbesondere diejenigen, die in der Nähe des Zeptus T des Tieres auftreten.