Name: 3-Dimensional Resin Casting und Imaging of Mouse Pfortader oder intrahepatische Gallengang-System (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2012-10-25T13:00:00.000+00:00
Duration: 8 min 47 s
Description: Lernen Sie die dreidimensionale Harzabdrucktechnik zur Visualisierung der Pfortader und intrahepatischen Gallengänge bei Mäusen. Diese Methode ermöglicht die detaillierte Analyse vaskulärer Architekturen in situ.

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Diese Arbeit wurde durch Zuschüsse aus dem National Institutes of Health (NIH), SSH (R01-DK078640), aus dem Howard Hughes Medical Institute (HHMI) durch die HHMI / Vanderbilt University Certificate Program in Molecular Medicine, um TJW (GRDOT56006779), die unterstützt Vanderbilt Diabetes Research and Training Center (P30-DK020593) und der Vanderbilt Digestive Disease Research Center (P30-DK058404), die Core Services.

Ein. Bereiten Kanüle <ol><li> Warm eine 1-Zoll langen Abschnitt der PE10-Schlauch mit Ihren Fingerspitzen und strecken, so dass der Schlauch dünn wird. Anmerkung: die Größe des Gefäßes oder Gangs zu kanüliert werden den Grad der Dehnung zu bestimmen. Die Kanüle muss Gallengang wirft gut gedehnt werden kann aber nur dann erforderlich, bis mäßig gedehnt werden, um innerhalb der größeren Pfortader angepasst werden. </li><li> Schneiden Sie das gestreckte Schlauch an einer Diagonale eine abgeschrägte Spitze zu generieren. </li><li> Schneiden Sie die andere Kante des Schlauchs an einen 5-6 Zoll-Segment zu schaffen. </li><li> Einfügen einer 32 Gauge, ½ Zoll Injektionsnadel in die nicht abgeschrägte Kante des Schlauchs. </li></ol> 2. Bereiten Spritze mit PBS <ol><li> Füllen Sie eine 3 ml Spritze mit PBS. </li><li> Schrauben Sie die Spritze auf die Injektionsnadel mit angeschlossenem gezogen PE10 Schlauch zuvor vorbereitet. </li><li> Flick Spritze und Push Spritzenkolben, dass PBS zu gewährleisten, hat die Nadel und Schläuche gefülltes gibt keine Luftblasen in der Spritze. </li><li> Legen Sie die gefüllte Spritze mit PBS in eine Spritze-Halter aus Modelliermasse geformt. Diese Halterung hält die Spritze stetig, während der Schlauch in den Kanal eingeführt wird. </li></ol> 3. Andere Set-up <ol><li> Wiegen 0,1 g Katalysator in einen kleinen Behälter, z. B. eine Vertiefung einer 24-Well-Platte. </li><li> Ziehen Sie 1 ml Harz in eine 3 ml Spritze. Anmerkung: die relativen Mengen des Katalysators und des Harzes eingestellt werden, um Aushärtungszeit zu verändern. Sinkende Menge des Katalysators kann jedoch erhöht gegossen Schrumpfung und führen zu einer weniger wünschenswert Stimmen. Hinweis: Beim Umgang mit Harz, Vorsichtsmaßnahmen ergreifen, um Kontakt mit Harz oder Einatmen der Dämpfe Harz zu vermeiden. Tragen Sie immer Schutzhandschuhe und führen Sie die Schritte mit Harz in einem gut belüfteten Raum, wie einer chemischen Abzugshaube </li><li> Schneiden Sie ein Stück von 5,0 Seidennaht von ca. 5 cm als einer Ligatur verwendet werden. </li></ol> 4. Bereiten Maus <ol&gt; <li> Sacrifice erwachsenen Maus. Legen Sie mit der Maus auf den Rücken und öffnen Sie die Bauchhöhle. </li><li> Lay Maus auf Binokular Plattform. Positionieren Sie eine 15 ml konischen Röhrchen senkrecht der Unterseite der Maus, um die Sichtbarkeit und Zugänglichkeit der Leber zu erhöhen. </li><li> Befeuchten Sie ein Wattestäbchen mit PBS und verwenden Sie es, um die Leber nach oben und weg von Ihnen, um die dorsale Ansicht der Leber zusammen mit dem extrahepatischen Pfortader oder Choledochus Setzen kippen. </li><li> Für Pfortader Abgüsse, können Sie verhindern die Blutgerinnung durch Spülen der Vene mit Raumtemperatur PBS. Bringen Sie eine Nadel in eine 3 ml Spritze mit PBS gefüllt und Nadel in extrahepatischen Pfortader so weit von der Leber, wie Sie können. Schieben PBS durch in die Pfortader. Machen Sie einen nick in der gemeinsamen Cardinalvene Blut abfließen. Benutzen Sie einen nassen Wattestäbchen zur Massage der Leber, verbessert Blut Entwässerung. Dieser Schritt ist für den Gallengang empfohlen und eventuell nicht notwendig, dass alle Gefäßsystems. Hinweis: Dieser Schritt kann auch perfo werdenRMED mit 4% Paraformaldehyd anstelle von PBS. Verwendung von 4% Paraformaldehyd kann vaskuläre Integrität und führen zu einer genaueren gegossenen erhöhen, speziell von kleineren Gefäßstrukturen. </li></ol> 5. Kanülieren extrahepatischen Pfortader oder Choledochus <ol><li> Verwenden gekrümmten Zange, um das chirurgische Nahtmaterial Ligatur unterhalb der Pfortader oder Gallengang passieren, ungefähr ¼ Zoll von der Leber. </li><li> Binden Sie die Naht in einem lockeren gemeinsamen Knoten. Ziehen Sie die Knoten. </li><li> Wenn Sie mit einem offenen System arbeiten, kann es hilfreich sein zu binden und ziehen eine Ligatur am anderen Ende des Systems. Wenn Sie die gemeinsame Cardinalvene geöffnet haben, um das Blut aus der Pfortader abfließen, binden eine Ligatur um ihn herum, um den Druck in der Pfortader zu erhöhen und zu verhindern, Harz Leckage in der zentralen Lebervene. </li><li> Verwenden Frühjahr Schere einen kleinen Schnitt in der Pfortader oder Gallengang, etwa ¼ Zoll unter der Naht Knoten zu machen. Diese cut sollte dringen nicht mehr als der Hälfte des Durchmessers der Pfortader oder Gallengang. </li><li> Mit # 5 Zangen, halten Sie die Pfortader oder Gallengang an der Stelle des Schnittes und legen abgeschrägte Ende des Schlauches in den Gallengang. </li><li> Schieben Spitze des Schlauchs an der Pre-gebundenen Blattschraube und zur Leber. </li><li> Test für Kanülierung Genauigkeit durch die Injektion von PBS durch die Kanüle und beobachten, um zu sehen, ob es die Pfortader oder Gallengang gelangt. </li><li> Ziehen Sie die Ligatur um die Kanüle in Position zu halten. </li></ol> 6. Resin Cast der Pfortader oder intrahepatischen Gallengang <ol><li> Fügen abgemessene 1 ml Harz abgemessene 0,1 g Katalysator und gründlich mischen. Vermeiden Erzeugung von Luftblasen. </li><li> Zeichnen Harz-Katalysator-Gemisch wieder in den 3 ml Spritze. Entfernen Sie alle Luftblasen durch leichtes Ausklopfen der Spritze und Vertreibung Blasen. Hinweis: zum Gießen kleine Strukturen, kann es hilfreich sein, um eine Vakuumkammer verwenden, um sehr kleine Luftblasen aus th entfernene Harz und verbessern Gussqualität. Um Zeit für diesen Schritt zu ermöglichen, wird es erforderlich sein, den Katalysator / Harz-Verhältnis von dem oben vorgeschlagen, um Harzhärtung verlangsamen verringern. </li><li> Vorsichtig wieder PBS-haltigen Spritze mit Harz enthaltenden Spritze, so dass die 32-Gauge-Nadel an der Kanüle. </li><li> Langsam und vorsichtig Harz in die Pfortader oder Gallengang, bis Widerstand ansteigt und Leber gefüllt ist. </li><li> Verwenden nassen Wattestäbchen sanft massieren Leber und fördern eine gleichmäßige Füllung. </li><li> Entfernen Kanüle aus der Struktur und schnell wieder anziehen Ligatur Harz zu verhindern. </li><li> Lassen Maus lag bei Raumtemperatur Wohnung für 20 min, während das Harz härtet, dann entfernen Sie Leber. </li><li> Fahren Sie mit dem entweder für die Beseitigung oder Mazeration der Leber. </li></ol> 7. Klare Leber für Visualisierung in situ <ol><li> Fix die Leber in 4% Paraformaldehyd über Nacht bei 4 ° C, Schaukeln. </li><li> Waschen Sie die Leberin PBS für mindestens vier Stunden, Schaukeln. An dieser Stelle können Sie trennen die Leberlappen, falls gewünscht. </li><li> Entwässern in 50% Methanol und anschließend in 100% Methanol für mindestens vier Stunden jeden, Schütteln bei Raumtemperatur. </li><li> Deaktivieren Sie die Leber in einer 1:2-Lösung von Benzylalkohol und Benzylbenzoat (BABB) für mindestens 24 Stunden, Schaukeln. Längere Waschzeiten notwendig sein. Wenn die Leber nicht vollständig nach 2-3 Tagen klar, wieder auf 100% Methanol für 24 Stunden zu verschieben und wiederholen BABB Lichtung. </li><li> Tauchen Leber in BABB in einem Glas Petrischale für die Bildgebung in situ. </li></ol> 8. Mazerieren Lebergewebe <ol><li> Entfernen der Leber von Mäusen und in einem 50 ml konischen Röhrchen mit Wasser. Warten Sie 1 Stunde zur vollständigen Aushärtung. Separate Leberlappen falls gewünscht. </li><li> Gießen Sie das Wasser und bewegen Leber zu einer Glasflasche. Tauchen in 15% KOH. Lassen Sie über Nacht bei Raumtemperatur. Nicht rocken. </li><li> Vorsichtig abgießen KOH und waschen Besetzung in destilliertem Wasser. Hinweis: Die Besetzung ist very zerbrechlich und sollte mit äußerster Vorsicht behandelt werden. Verhindern, dass die Besetzung beim Hinzufügen oder Entfernen von Flüssigkeit aus dem Rohr. </li><li> Wenn Harz gegossenen sauber ist, sanft auf einem Kimwipe zum Trocknen lag, dann zu einem Behälter abgelegt werden übertragen. </li></ol> 9. Repräsentative Ergebnisse Eine erfolgreiche Besetzung der Pfortader oder Gallengang zeigen ein kontinuierliches Netzwerk von immer kleiner Zweige, die sich aus dem Hilus der Leber Peripherie. Abbildung 1 zeigt eine Pfortader gegossen als visualisierte in situ nach BABB Lichtung. 1A die Besetzung des gesamten linken Leberlappen und die Form und Größe der Besetzung zeigt. Abbildung 1B zeigt eine Nahaufnahme der gleichen Besetzung, was die Eindringen des Harzes in die kleinsten Pfortaderäste an der Leber Peripherie. Abbildung 2 zeigt eine Pfortader Besetzung, KOH ma durchlaufen hatceration. 2A zeigt die gesamte linke Leberlappen und 2B ist eine Nahaufnahme der kleinen peripheren Äste. Diese Technik wurde auch erfolgreich auf die intrahepatischen Gallengang eingesetzt und veröffentlicht sowohl mit dem BABB Clearing und KOH Mazeration Techniken 1,2,7. Häufige Probleme sind unvollständig ausfüllt, demonstriert Blasen in dem Harz, und Überlauf in umgebenden Systemen oder Geweben. Abbildung 3, wie eine unvollständige Füllung (3A), Blasen (3A) und einen Überlauf von Harz aus der Pfortader zu erkennen, um die Zentralvene (3B). Alle Bilder sind aufgenommen mit einem Leica MZ 16 FA Stereoskop und QImaging RETIGA 4000R Kamera. <img alt="Abbildung 1" src="/files/ftp_upload/4272/4272fig1.jpg" /> Abbildung 1. BABB geräumten Resin der Leber links lobe Pfortader. A. Resin gegossen zeigt eine hierarchische Verzweigung Struktur, die sich aus dem Hilus der Leber Peripherie. Resin erscheint in gelber Farbe in blau getönt Leberlappen. B. Eine Nahaufnahme zeigt, dass Harz zu füllen, um kleine Äste in der Leber Peripherie erstreckt. Resin ist weißlich über gelöscht Leber. Maßstab = 1 mm. <img alt="Abbildung 2" src="/files/ftp_upload/4272/4272fig2.jpg" /> Abbildung 2. Tissue-mazerierten Resin der Leber links lobe Pfortader. A. Resin ganzer Leberlappen gegossen zeigt viele Niederlassungen in unterschiedlichen Größen. B. Close-up zeigt, kleine Äste in der Peripherie der Leber. Weiche Auftreten von kleinen Zweigen stellt Harzfüllung von sinusförmigen Räume und kann oder kann nicht auf Harz sichtbar wirft und die scheinbare Niederlassung Dichte zu erhöhen, falls vorhanden. Resin ist in der Farbe weiß. Maßstab = 1 mm. Abbildung 3. Gemeinsame Probleme mit Harz Würfe. A. Eine unvollständige Füllung des linken Lappens Pfortader ist durch einige oder alle Stimmen Niederlassungen nicht gelingt, auf die Leber Peripherie erweitern offensichtlich. Diese Besetzung zeigt auch Blasen, sichtbar als Pausen in der kontinuierlichen Besetzung (Pfeil). B. Durch die Nähe der Pfortader und zentrale Vene Niederlassungen in einigen Orten wird die Pfortader Harz oft geben und füllen Sie die zentrale Vene. Dies erkennt man, wenn zwei unterschiedliche hilar Niederlassungen (Pfeile) und zwei verzweigte Strukturen, die unterschiedliche Muster und Überschneidungen haben sollen. Unterscheidung zwischen technischen Fehlern und wahre morphologische Veränderungen kann auf zwei Arten erfolgen. Erstens sollte das Gußgefüge der Struktur erwartet bezogen auf 2-dimensionale Analyse oder andere Verfahren verglichen werden. Zweitens ist es wichtig, führen mehrere Wiederholungen, und wenn möglich, zu quantifizieren structure und statistische Analysen, um die Reproduzierbarkeit zu bestimmen und wenn es eine statistisch signifikante morphologische Veränderung zwischen und in verschiedenen experimentellen und Querlenker.

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</ol>

Keine Interessenskonflikte erklärt.

Wir haben die spezifischen Beispiele, wie die Pfortader und intrahepatische Gallengang Systemen der Leber umgewandelt werden kann beschrieben, aber diese Technik kann auf praktisch jedem anderen Duktus oder Gefäßsystem mit geringen Anpassungen aufgebracht werden. Frühere Arbeiten haben die Machbarkeit dieser Technik in mehreren Arten, darunter Maus 1,2,7-9, Entlein 10,11, Kaninchen 12,13, Hund 14 und Schwein 15, und in vielen Organen, einschließlich nasaler Stopfbuc...

<table border="1"><tbody><tr><td> Namen Reagenz </td><td> Firma </td><td> Katalognummer </td><td> Kommentare </td></tr><tr><td> PE10 Polyethylenschlauch </td><td> Fisher Scientific </td><td> 1417012P </td><td></td></tr><tr><td> 5-0 chirurgische schwarzen geflochtenen Seide </td><td> Roboz Surgical </td><td> SUT-15-1 </td><td></td></tr><tr><td> Steriject 32 G x 13 mm Nadel </td><td> Air-tite </td><td> TSK3213 </td><td></td></tr><tr><td> Frühling Schere </td><td> Fine Science Tools </td><td> 15000-08 </td><td></td></tr><tr><td> Number 5 Zangen </td><td> Fine Science Tools </td><td> 91150-20 </td><td></td></tr><tr><td> Mercox II Kit </td><td> Ladd Research </td><td> 21247 </td><td></td></tr><tr><td> Benzylalkohol </td><td> Fisher Scientific </td><td> 1816-04 </td><td> Only für BABB-Clearing erforderlich </td></tr><tr><td> Benzylbenzoat </td><td> MP Biomedicals, LLC </td><td> 154839 </td><td> Nur für BABB-Clearing erforderlich </td></tr><tr><td> Phosphat-gepufferte Salzlösung (PBS) </td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td> Modelliermasse </td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td> Maßstab </td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td> Laborscheren </td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td> 15 ml cap Polypropylenröhrchen </td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td> 4% paraformaldahyde </td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td> 15% Kaliumhydroxid (KOH) </td><td></td><td></td><td> Nur für Mazeration erforderlich </td></tr><tr><td> Rasierklinge </td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td> 100% Methanol </td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td> 3 ml Luer-Lock-Spritze </td><td></td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

3-dimensional resin casting und imaging of mouse pfortader oder intrahepatische gallengang-system

3-Dimensional Resin Casting and Imaging of Mouse Portal Vein or Intrahepatic Bile Duct System

In Organen, ist die richtige Architektur von vaskulären und duktalen Strukturen für die richtige physiologische Funktion unentbehrlich, und die Bildung und Aufrechterhaltung dieser Strukturen ist ein hoch regulierten Prozess. Die Analyse dieser komplexen 3-dimensionalen Strukturen hat sich stark auf beiden 2-dimensionalen Prüfung im Bereich oder auf Farbstoffinjektion Studien abhängt. Diese Techniken sind jedoch nicht in der Lage, eine vollständige und quantifizierbare Darstellung der duktalen oder Gefäßstrukturen sie vorgesehen sind aufzuklären bereitzustellen. Alternativ erzeugt der Natur der 3-dimensionalen Kunststoffharz Abgüsse eine permanente Momentaufnahme des Systems und ist ein neuartiges und nützliches Verfahren weithin zur Visualisierung und Quantifizierung von 3-dimensionalen Strukturen und Netze. Ein entscheidender Vorteil des Harzes Gießsystem ist die Fähigkeit, die intakt und verbunden oder kommuniziert, Struktur eines Blutgefäßes oder Kanal zu bestimmen. Die Struktur von vaskulären und ductal-Netzwerke sind entscheidend für Organfunktion, und diese Technik hat das Potential Studie von vaskulären und Duktus-Netzwerke in mehrfacher Hinsicht zu unterstützen. Gießharz kann verwendet werden, um normale Morphologie und funktionelle Architektur eines luminalen Struktur analysieren, Entwicklungsstörungen morphogenetischen Veränderungen und aufzudecken morphologischen Unterschiede im Gewebe Architektur zwischen Normal-und Krankheitszuständen werden. Frühere Arbeiten haben Harz Gießen zu studieren Verwendete beispielsweise architektonischen und funktionalen Mängeln in der Maus intrahepatischen Gallengang System, die nicht in 2-dimensionale Analyse der Struktur reflektiert wurden 1,2, Veränderungen im Gehirn Gefäßsystem eines Alzheimer Mausmodell 3 , Pfortader Abnormalitäten in Portal hypertensiven und Leberzirrhose Mäusen 4, Entwicklungsschritte in Ratten lymphatischen Reifung zwischen unreifen und adulte Lunge 5, sofortige mikrovaskulären Veränderungen in der Rattenleber, Pankreas und Niere in Antwort auf chemische Schädigung in6. Hier präsentieren wir ein Verfahren zur Erzeugung einer 3-dimensionalen Resin einer Maus vaskuläre oder Milchgangsystem, die speziell auf die Pfortader und intrahepatischen Gallengang. Diese Umwandlungen können durch Löschen oder Mazerieren des Gewebes visualisiert werden und kann dann analysiert werden. Diese Technik kann auf nahezu jedem Gefäß-oder duktalen System angewendet werden und wäre direkt anwendbar für jeden Studie anfragenden in die Entwicklung, Funktion, Wartung, oder der Verletzung eines 3-dimensionalen duktalen oder vaskuläre Struktur.

Ein Verfahren zur Visualisierung und Quantifizierung der 3-dimensionalen Struktur von Maus Pfortader oder intrahepatischen Gallengang wird beschrieben. Dieses Harz gegossenen Technik kann auch auf andere duktalen oder vaskulären Systemen angewendet werden und ermöglicht<em&gt; In situ</em&gt; Visualisierung oder Quantifizierung eines Systems intakt kommunizieren Architektur.

3-Dimensional Resin Casting und Imaging of Mouse Pfortader oder intrahepatische Gallengang-System

In Organen ist die korrekte Architektur vaskulärer und duktaler Strukturen für eine ordnungsgemäße physiologische Funktion unerlässlich, und die Bildung und ...

Das übergeordnete Ziel dieses Verfahrens besteht darin, einen dreidimensionalen Abguss eines vaskulären oder ductalen Gewebes zu erzeugen. Dies wird erreicht, indem zunächst die Zielstruktur, beispielsweise die Vena portae, präpariert und kaniert wird, wobei der Katheter an Ort und Stelle fixiert wird. Anschließend wird das Harz vorbereitet, in die Vena portae injiziert und zum Aushärten belassen. Anschließend wird die Leber entfernt und das Gewebe fixiert oder makert. Schließlich wird die Leber geklärt und die Gussstruktur sichtbar gemacht. Letztendlich können Ergebnisse erzielt werden.Diese Methode zeigt Veränderungen in der Architektur des vaskulären oder duktalen Gewebes durch visuelle Analyse oder Quantifizierung mittels Mikro-CT. Obwohl diese Methode Einblicke in die Architektur der Leber ermöglicht, kann sie ebenso auf die vaskulären oder duktalen Systeme jedes Organs angewendet werden, einschließlich Gehirn, Lunge, Pankreas und Nieren.Um die Kanüle vorzubereiten, erwärmen Sie mit den Fingerspitzen einen etwa einen Zoll langen Abschnitt PE-10-Schlauch und ziehen ihn vorsichtig, sodass er dünner wird. Schneiden Sie den gedehnten Schlauch schräg ab. Um eine abgeschrägte Spitze

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Forschung

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Medicine

Medizin

In diesem Artikel präsentieren wir Ihnen eine einfache, praktische Technik für zerebrovaskuläre Casting, das einfach durchzuführen ist und kann zur Abbildung des Gefäßbaumes der erwachsenen Gehirn der Maus eingesetzt werden.

Zerebrovaskuläre Casting der erwachsenen Maus für 3D-Imaging und morphologische Analyse

Dieses Video beschreibt ein bildgebendes Verfahren zur Beobachtung und Untersuchung der intravaskulären Dynamik eines Mauslebergewebes mittels Multiphotonenmikroskopie nach Stabilisierung des Organs. Die Multiphotonenmikroskopie ermöglicht die Abbildung von biologischem Gewebe mit hoher räumlicher Auflösung in vivo.

Imaging Fixture Support Mouse Liver Staging für Multiphotonenmikroskopie basierte Gefäßvisualisierung: Eine stabilisierungsgerätgestützte Bildgebungstechnik zur Gewinnung mehrdimensionaler Bilder von Blutgefäßen in der Mausleber

Dieses Video beschreibt das Verfahren zum Gießen von Gallensystemharz, um die 3D-Gallenarchitektur zu verstehen. Diese Technik ermöglicht Einblicke in den Innendurchmesser und die Netzwerkkonnektivität des Gallensystems, die für die Analyse der Leberregeneration verwendet werden könnten.

Gießen von Gallensystemharz: Eine Technik zur Analyse der 3D-Architektur des Gallensystems im Mausmodell unter Verwendung von röntgendichter Harzinjektion

Werkzeuge, die zur Visualisierung der Gefäßregeneration verwendet werden, erfordern Methoden zur Gegenüberstellung der Gefäßbäume. Dieser Film demonstrierte eine filigrane Injektionstechnik, die verwendet wurde, um einen optimalen Kontrast der Gefäßbäume zu erreichen, und veranschaulichte die potenziellen Vorteile, die sich aus einer detaillierten Analyse der resultierenden Probe mittels μCT und histologischer Serienschnitte ergeben.

Visualisierung von Gefäß- und Parenchymregeneration nach 70% Teilhepatektomie in normalen Mäusen

Es wurde ein chirurgisches Verfahren entwickelt, um Brusttumorzellen über eine Pfortaderinjektion in die Mausleber zu bringen. Dieses Modell ermöglicht die Untersuchung der späten Stadien der Lebermetastasierung in einem vollständig immunkompetenten Wirt, einschließlich der Extravasation von Tumorzellen, der Aussaat, des Überlebens und des Metastasierungsauswuchses in der Leber.

Ein Portal Veneninjektion Modell zur Untersuchung der Leber Metastasierung von Brustkrebs

Das Ziel dieser Technik ist die ex vivo Visualisierung von pulmonalen arteriellen Netzwerken von frühpostnatalen und erwachsenen Mäusen durch Lungeninflation und Injektion einer radio-opaque polymerbasierten Verbindung über die Lungenarterie. Mögliche Anwendungen für gegossenes Gewebe werden ebenfalls diskutiert.

Vaskuläres Gießen von Erwachsenen und frühpostnatalen Mauslungen für Micro-CT Imaging

Portalveneninjektion von Darmkrebs (CRC) Organoiden erzeugt stromareiche Lebermetastasen. Dieses Mausmodell der CRC-Lebermetastasierung stellt ein nützliches Werkzeug dar, um Tumor-Stroma-Interaktionen zu untersuchen und neuartige Stroma-gerichtete Therapeutika wie Adeno-assoziierte virusvermittelte Gentherapien zu entwickeln.

Portalveneninjektion von Darmkrebs-Organoiden zur Untersuchung der Lebermetastasierung Stroma

Die Doppelharzguss-Mikrocomputertomographie (DUCT) ermöglicht die Visualisierung, Digitalisierung und Segmentierung von zwei röhrenförmigen Systemen gleichzeitig, um die 3D-Analyse der Organarchitektur zu erleichtern. DUCT kombiniert die Ex-vivo-Injektion von zwei röntgenopaken Harzen, gefolgt von Mikro-Computertomographie-Scanning und Segmentierung der tomographischen Daten.

DUCT: Doppelharzguss mit anschließender Mikro-Computertomographie zur 3D-Leberanalyse

Das vorliegende Protokoll optimiert die Methoden der  Leber-in-situ-Perfusion/Dezellularisierung und der Zwei-Photonen-Mikroskopie, um eine zuverlässige Plattform zur Visualisierung der Dynamik des Remodells der extrazellulären Matrix (EZM) während der nicht-alkoholischen Steatohepatitis (NASH) zu schaffen.

3D-Bildgebung der extrazellulären Matrix der Leber in einem Mausmodell der nicht-alkoholischen Steatohepatitis

In diesem Protokoll diskutieren wir die Implementierung eines Modells für eine erfolgreiche orthotope Lebertransplantation (OLT) bei Mäusen. Darüber hinaus werden auch Adjuvantien zur weiteren Analyse der Durchgängigkeit von Transplantaten nach erfolgreicher OLT in einer Maus diskutiert, insbesondere unter Verwendung von Mikrocomputertomographie (microCT)-Scans.

Erfolgreiche orthotope Lebertransplantation bei Mäusen mittels Mikrocomputertomographie-Angiographie

Dieses Protokoll führt ein hochmodernes, wiederverwendbares hepatisches Bildgebungsinstrument (RHIT) für die intravitale Mikroskopie (IVM) lebender Mäuse ein, das die Gewebestabilität für schnelle und akute Experimente verbessert. Das 3D-gedruckte Design des RHIT bietet kosteneffiziente Produktion, Skalierbarkeit und Vielseitigkeit und ermöglicht eine längere Beobachtung der Stoffwechselprozesse bei Mäusen unterschiedlicher Größe.

Wiederverwendbares Leberbildgebungsgerät: Ein wiederverwendbares 3D-gedrucktes Werkzeug für die hepatische intravitale Mikroskopie

Lernen Sie die dreidimensionale Harzabdrucktechnik zur Visualisierung der Pfortader und intrahepatischen Gallengänge bei Mäusen. Diese Methode ermöglicht die detaillierte Analyse vaskulärer Architekturen in situ.

3-Dimensional Resin Casting und Imaging of Mouse Pfortader oder intrahepatische Gallengang-System

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