Name: Cardiac Stress Test durch Dobutamin induziert und Überwacht durch Herzkatheter in Mäuse (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2013-02-10T14:00:00.000+00:00
Duration: 15 min 45 s
Description: Erfahren Sie, wie man einen dobutamininduzierten Herzstress-Test bei Mäusen durchführt und mittels Herzkatheter überwacht. Diese Methode deckt subklinische Herzerkrankungen bei fettleibigen Mäusen auf.

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Wir danken Dr. Helio Salgado, Renata Lataro und Mauro de Oliveira, School of Medicine der Ribeirão Preto, Universität von Sao Paulo und Dr. Ben Janssen, Cardiovascular Research Institute Maastricht, Maastricht University, für die großzügige Unterstützung während der Setup-Prozess. Diese Arbeit wurde von Fondecyt Gewährung N ° 11090114 DEZA unterstützt

Protokoll wurde von der Ethikkommission der Facultad de Medicina Clinica Alemana-Universidad del Desarrollo zugelassen. I. Vorbereitung Dobutamin Infusion <ol><li> Man löst 10 mg Dobutamin in 20 ml steriles destilliertes Wasser, um eine Stammlösung von 500 ug / ml Dobutamin erhalten. Aliquotieren und bei -20 ° C. Diese Lösung kann für mindestens 3 Monate verwendet werden. </li><li> Auftauen eines Aliquots Dobutamin Stammlösung bei Raumtemperatur. </li><li> Verdünnen Dobutamin Stammlösung in steriler 0,9% NaCl, um Dobutamin funktionierende Lösung, die Konzentration wird anhand der Formel: Dobutamin (pg / ml) = Körpergewicht x 0,2. </li><li> Füllen Sie eine 1 ml Spritze 29Gx1 / 2 &quot;mit Dobutamin funktionierende Lösung. </li><li> Legen Sie die Nadel der Spritze in einen 20 cm PE-10 Röhre. </li><li> Passen Sie die Spritze in die Infusionspumpe nach den Anweisungen des Herstellers. </li><li> Richten Sie die Rampe Infusion in einem Schritt-Für-Schritt-Format mit einer Steigerung von 10 ul / min für jeden Schritt, für 6 Schritten. </li></ol> II. Vorbereiten Pressure Sensor <ol><li> Um Signaldrift, tauchen Drucksensor in sterilem Wasser bei 37 ° C zu minimieren für mindestens 15 min. Nicht einweichen den Katheter mehr als 0,5 cm tief, um zu verhindern, dass hydrostatische Druck wirkt sich auf die Drucksensor. </li><li> Elektronisch den Drucksensor kalibrieren, bei 25 und 100 mmHg. Elektrischen Eingang (V) mit Drucksignal (mmHg) umgewandelt. </li><li> Stellen Sie die Abtastrate von 2 k / s und nutzen Sie den Filter Tiefpass mit einer Grenzfrequenz von 100 Hz. Stellen Sie den Druck auf Null mmHg. </li><li> Markieren Sie den Katheter 15 mm von der Spitze. Entfernt, um das Herz von der Einleitungsstelle erreicht wurde geschätzt durch Echokardiographie, Erfassen der Anwesenheit des Katheters in den linken Ventrikel. </li></ol> III. Vorbereiten Maus für Katheterisierung <ol><li> Gewicht C57BL / 6 männlichen Mäusen, 30-32 Wochen alt. </li><li> Inject intraperitoneal 60 ug / kg Ketamin und 4 ug / kg Xylazin 1. Hinweis: Andere Anästhetika könnte verwendet werden, zum Beispiel: 350 - 450 ug / kg avertin, 50 ug / kg Pentobarbital oder 1,5 - 2% Isofluran 2-3. </li><li> Rasur am Hals mit einem elektrischen Rasierer. </li><li> Setzen Sie den narkotisierten Maus in Rückenlage auf einer vorgewärmten isothermen Heizplatte. Sichern Sie ihre Gliedmaßen mit Lochstreifen. </li><li> Führen Sie einen Zeh Prise vollständige Sedierung bestätigen. </li><li> Führen Sie eine rektale Sonde, um die Körpertemperatur zu überwachen. Mit vaselinized Sonde wird empfohlen. </li><li> Wenn Körpertemperatur von 37 unterscheidet ° C ± 0,5 ° C beträgt, wird es über die Heizplatte. </li><li> Setz Maus nahe der Schnauze Sauerstoffversorgung. </li><li> Platzieren Sie die Maus Halsbereich unter dem Stereomikroskop. </li></ol> IV. Data Acquisition <ol><li> In der LabChartPro 7-Software, wählen Sie einen Kanal für Druck Registrierung und einen Kanal für die Herzfrequenz (HR)Anmeldung. Für letztere, wählen Sie die Option &quot;Zyklische Messungen&quot; und Setup-Messung als Rate. </li><li> Für den Druckkanal den Maßstab: 0 bis 150 mmHg. </li><li> Für HR-Kanal eingestellt Skalenbereich: 200 bis 600 bpm. </li><li> Drücken Sie die Starttaste, um die Registrierung zu beginnen. </li><li> Kommentare einfügen angibt Verfahren durchgeführt werden, zum Beispiel: Anästhesie Verabreichung von Dobutamin Infusion, Dobutamin Konzentration starten, atmende ändert. </li></ol> V. Herzkatheter 4,5 <ol><li> Durchführen einer kleinen Einschnitt auf der rechten Seite in der Nähe des Kiefers. Mit Schere trennen die Haut-Muskel-Bindegewebe. </li><li> Führe eine longitudinale Dissektion (1,5 - 2 cm) auf der rechten Seite der Luftröhre. Trennen die Bindegewebe, Fett und Muskeln mit gekrümmten Zange, um die rechte Arteria carotis in der Nähe der Luftröhre freizulegen. </li><li> Platzieren eines Expanders im Tier rechts um die Halsschlagader freizulegen. PulsierendeDruck durch das Herz erzeugt erleichtert die Identifizierung der Arterie. Die Halsschlagader, die dunkel rot ist, ist auf der rechten Seite. </li><li> Trennen Sie die Arterie von benachbarten Geweben mit gebogenen Pinzette. Der Vagusnerv, der eine weiße Faden ähnelt, liegt entlang der Arterie. </li><li> Schneiden Sie ein 20 cm Stück 6/0 Seidenfaden und &quot;double&quot; ist. </li><li> Führen Sie das &quot;doppelte&quot; Faden unter der Arterie von links nach rechts. Den Faden abschneiden, um getrennte Enden zu erhalten. </li><li> Pass ein Drittel Gewinde (10 cm) unterhalb der Arterie. </li><li> Tie einen festen Knoten in dem Faden in der Nähe des Kopfes positioniert ist, und eine lose ein in der mehr distale Gewinde. </li><li> Tie eine lose Knoten in der Mitte Gewinde, und fixieren das rechte Ende des mittleren Faden nach Heizkissen mit einem Papierband. </li><li> Halten Halsschlagader durch Fallenlassen feuchter steriler 0,9% NaCl. Trocknen Sie überschüssige Flüssigkeit mit Wattestäbchen. </li><li> Dehnen Sie den Unterfaden mit einer Gefäßklemme Klemme. </li><li> Fixieren Sie die Position des hemostat Schere durch pTippen Sie die Haut des Bauches, Stretching den Oberfaden, um den Blutfluss zu verschließen. Überprüfen Sie, ob das Bindegewebe um die Arterie entfernt wurde. Die Arterie sollte voller Blut und beraubt Puls. Verhindern Fäden aus ein Drehmoment Kraft auf die Arterie. </li><li> Machen Sie einen Querschnitt nick in der Nähe der Unterseite der Arterie mit einem Vannas Mikro-Schere. Blutstropfen wird verschüttet werden. </li><li> Legen Sie den Katheter in die Halsschlagader. Achten Sie darauf, die gesamte Drucksensor einzuführen. Stellen Sie sicher, dass es keinen Blutverlust. </li><li> Schieben Sie vorsichtig den mittleren Faden Knoten, um den Katheter in Position zu halten. Nicht zu viel zu komprimieren, ist der Drucksensor sehr instabil. </li><li> Lassen Sie die hemostat Schere aus dem Tier Bauch. </li><li> Halten Sie den Katheter mit der Hand und drücken Sie den mittleren Faden, um den Blutverlust zu vermeiden. Hinweis: Arterie sollte voller Blut. </li><li> Starten Sie die Aufnahme Drucksignalen. </li><li> Wenn der Katheter im Inneren ist, derarteriellen Druck Signal schwankt von 60 bis 70 auf 100-120 mmHg. Die Form des Drucksignals ist in Abbildung 1.A. Hinweis gezeigt: wenn Sie interessiert sind, zu diesem Zeitpunkt können Sie arteriellen Druck aufnehmen, wenn das Signal für mindestens 5 min stabil. HR-Werte wurden aus der Druckwellenformen Prüfung eines Intervalls von 30 Sekunden des Aufzeichnungssignals erhalten. Es ist möglich, auch eine EKG Verfahren zur direkten Messung von HR, entsprechend den Untersuchungen Ziele. </li><li> Schieben Sie den Katheter bis zu einer Änderung in der Form des Drucksignals (Abbildung 1.B) zu beobachten. Sobald der Katheter im Inneren des linken Ventrikels, schwankt das Drucksignal von 0 bis 100 bis 120 mmHg. Wenn es schwierig ist, den Katheter gleiten kann, einzuklemmen tierischen Brust mit zwei Fingern. </li><li> Kontinuierlich zu steuern Atemfrequenz, Körpertemperatur, Anästhesie und Druck Signal. Alle von ihnen sollte stabil bleiben. </li></ol> VI. Die Infusion von Dobutamin <ol><li&gt; Für Jugularvene Kanülisier unbedingt abziehen des Fettgewebes um die Vene, um dessen Perforation zu verhindern. Das chirurgische Verfahren zum Venenverschluss ist ähnlich dem Verfahren für Halsschlagader gezeigt. </li><li> Einführung eines PE-10 Rohr in die Vene. Bestätigen Sie, dass der Blutfluss nicht blockiert rückwärts bewegt den Kolben der Spritze. </li><li> Dobutamin Infusion beginnt mit 10 ul / min und enden mit 60 ul / min. In jedem Schritt wird die Infusionsrate für 2 min 6 gehalten. </li><li> Nach dem letzten Dobutamin Dosis, einschläfern das Tier mit einer Überdosis der Anästhesie. </li></ol> VII. Data Analysis <ol><li> Für die Datenanalyse, wählen Sie den Abschnitt der aufgezeichneten Daten, die Sie interessieren. Achten Sie darauf, um ein Zeitintervall überlegen, wo Drucksignal ist stabil. </li><li> Wählen Sie das Setup-Symbol in der Blood Pressure Modul. Geben Sie die gewählte Art der Drucksignal. </li><li> Automatisch die LabChartPro 7 Software zeigt Mittelwert, Maximumund Minimalwerte für HR, systolischer Druck (P max), der diastolische Druck (P min), enddiastolische Druck (EDP), maximal Überdruck Entwicklung (dP / dtmax) und maximaler Unterdruck Entwicklung (dP / dt min). Darüber hinaus können auf der Herzparametern Druckspur darstellen. </li></ol>

<ol><li>Hart, C. Y., Burnett, J. C., Redfield, M. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+avertin+versus+xylazine-ketamine+anesthesia+on+cardiac+function+in+normal+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Am.+J.+Physiol.+Heart+Circ.+Physiol%22%5BJournal%5D)">Effects of avertin versus xylazine-ketamine anesthesia on cardiac function in normal mice.</a> Am. J. Physiol. Heart Circ. Physiol. 281, H1938-H1945 (2001).</li>
<li>Janssen, B. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+anesthetics+on+systemic+hemodynamics+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Am.+J.+Physiol.+Heart+Circ.+Physiol%22%5BJournal%5D)">Effects of anesthetics on systemic hemodynamics in mice.</a> Am. J. Physiol. Heart Circ. Physiol. 287, H1618-H1624 (2004).</li>
<li>Lorenz, J. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+practical+guide+to+evaluating+cardiovascular%2C+renal%2C+and+pulmonary+function+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Am.+J.+Physiol.+Regul.+Integr.+Comp.+Physiol%22%5BJournal%5D)">A practical guide to evaluating cardiovascular, renal, and pulmonary function in mice.</a> Am. J. Physiol. Regul. Integr. Comp. Physiol. 282, R1565-R1582 (2002).</li>
<li>Lorenz, J. N., Robbins, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Measurement+of+intraventricular+pressure+and+cardiac+performance+in+the+intact+closed-chest+anesthetized+mouse%5BTitle%5D)+AND+%22Am.+J.+Physiol%22%5BJournal%5D)">Measurement of intraventricular pressure and cardiac performance in the intact closed-chest anesthetized mouse.</a> Am. J. Physiol. 272, H1137-H1146 (1997).</li>
<li>Nemoto, S., DeFreitas, G., Carabello, B. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cardiac+catheterization+technique+in+a+closed-chest+murine+model%5BTitle%5D)+AND+%22Contemp.+Top.+Lab+Anim.+Sci%22%5BJournal%5D)">Cardiac catheterization technique in a closed-chest murine model.</a> Contemp. Top. Lab Anim. Sci. 42, 34-38 (2003).</li>
<li>Daniels, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Impaired+cardiac+functional+reserve+in+type+2+diabetic+db%2Fdb+mice+is+associated+with+metabolic%2C+but+not+structural%2C+remodelling%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Physiol.+%28Oxf%29%22%5BJournal%5D)">Impaired cardiac functional reserve in type 2 diabetic db/db mice is associated with metabolic, but not structural, remodelling.</a> Acta Physiol. (Oxf). 200, 11-22 (2010).</li>
<li>De Celle, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Long-term+structural+and+functional+consequences+of+cardiac+ischaemia-reperfusion+injury+in+vivo+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Exp.+Physiol%22%5BJournal%5D)">Long-term structural and functional consequences of cardiac ischaemia-reperfusion injury in vivo in mice.</a> Exp. Physiol. 89, 605-615 (2004).</li>
<li>Huntgeburth, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Transforming+growth+factor+beta+oppositely+regulates+the+hypertrophic+and+contractile+response+to+beta-adrenergic+stimulation+in+the+heart%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Transforming growth factor beta oppositely regulates the hypertrophic and contractile response to beta-adrenergic stimulation in the heart.</a> PLoS One. 6, e26628(2011).</li>
<li>Reddy, A. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cardiac+function+in+young+and+old+Little+mice%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Gerontol.+A.+Biol.+Sci.+Med.+Sci%22%5BJournal%5D)">Cardiac function in young and old Little mice.</a> J. Gerontol. A. Biol. Sci. Med. Sci. 62, 1319-1325 (2007).</li>
<li>Christoffersen, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cardiac+lipid+accumulation+associated+with+diastolic+dysfunction+in+obese+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Endocrinology%22%5BJournal%5D)">Cardiac lipid accumulation associated with diastolic dysfunction in obese mice.</a> Endocrinology. 144, 3483-3490 (2003).</li>
</ol>

Keine Interessenskonflikte erklärt.

Cardiac Stresstest Dobutamin induziert und überwacht durch Herzkatheter ist aufwändig. Dennoch, nachdem das Protokoll hier zu beschreiben und mit einer kurzen Zeit der Ausbildung ist es möglich, bis sechs hämodynamischen Parameter in einem einzigen Experiment, dass dauert ca. 1 Stunde zu beurteilen. Die kritischen Schritte des Protokolls hier präsentiert sind die Kanülierungen der Blutgefäße. Bezüglich der Kanülierung Halsschlagader, sollte der Einschnitt durchgeführt tief genug sein, um die...

<table border="1"><tbody><tr><td></td><td></td><td></td><td> Reagenzien </td></tr><tr><td> PE-50/10 </td><td> Warner Instruments </td><td> 64-0752 </td><td></td></tr><tr><td> Seidenfaden 6/0 HR17 </td><td> Tagum </td><td> SN0713K </td><td></td></tr><tr><td> Xylacin 20 mg / ml </td><td> Laboratorio Centrovet </td><td></td><td></td></tr><tr><td> Ketamin 100 mg / ml </td><td> Drag Pharma </td><td></td><td></td></tr><tr><td> Natriumchlorid 0,9% </td><td> Lab Sanderson SA </td><td></td><td></td></tr><tr><td> Dobutamin Hydrochlorid </td><td> Sigma-Aldrich </td><td> D0676 </td><td></td></tr><tr><td> Spritze U-100 Insulin 29G x ½ &quot; </td><td> Terumo Medical Co. </td><td></td><td></td></tr><tr><td> Dissektionszangen Micro 11,5 cm Style 7 </td><td> LawtonMedizintechnik </td><td> 09-0959 </td><td></td></tr><tr><td> Graefe Pinzette Cvd 0.7mm 7cm </td><td> Lawton Medizintechnik </td><td> 62-0263 </td><td></td></tr><tr><td> Clamps Dieffenbach Bulldog Cl Str. 38 mm </td><td> Lawton Medizintechnik </td><td> 60-010 </td><td></td></tr><tr><td> Vannas Schere 8 cm Str Fh </td><td> Lawton Medizintechnik </td><td> 63-1400 </td><td></td></tr><tr><td></td><td></td><td></td><td> Ausrüstung </td></tr><tr><td> SPR-671 Mikro-Tip-Katheter Druck </td><td> Millar Instrumenten </td><td> 840-6719 </td><td></td></tr><tr><td> PCU-2000 Pressure Control Unit </td><td> Millar Instrumenten </td><td> 880-0129 </td><td></td></tr><tr><td> PowerLab 4/30 </td><td> ADInstruments Pty Ltd </td><td> ML866 </td><td></td></tr><tr><td> LabChartPro 7 </td><td> ADInstruments Pty Ltd </td><td> MLU260 / 7 </td><td></td></tr><tr><td> Legato200 Infusionspumpe </td><td> KdScientific </td><td> KD-KDS210P </td><td></td></tr><tr><td> TCAT-2LV Temperaturregler und isotherme Heizplatte </td><td> PhysiTemp Instruments Inc. </td><td></td><td></td></tr><tr><td> Medical Sauerstoffversorgung </td><td> Indura </td><td></td><td></td></tr><tr><td> Rektalsonde </td><td> ADInstruments Pty Ltd </td><td> MLT1404 </td><td></td></tr><tr><td> Trinokular Mikroskop, axiale Beleuchtung </td><td> LW Scientific </td><td> Z2B-TRI-ETNE, ILP-1502-LTS1, ILP-1502-DGGF </td><td></td></tr></tbody></table>

cardiac stress test durch dobutamin induziert und Überwacht durch herzkatheter in mäuse

Cardiac Stress Test Induced by Dobutamine and Monitored by Cardiac Catheterization in Mice

Dobutamin ist ein β-adrenergen Agonisten mit einem höheren Affinität für den Rezeptor im Herzen (β 1) als für Rezeptoren in den Arterien (β 2) ausgedrückt. Wenn systemisch verabreicht, erhöht es Herzbedarf. So entlarvt Dobutamin anormalen Rhythmus oder ischämische Bereiche potentielles Risiko Herzinfarkt. Überwachung der Herzfunktion während einer Belastungs-Test kann entweder durch ecocardiography oder Herzkatheter durchgeführt werden. Letzteres ist eine invasive, aber genauer und informative Technik, die der ehemalige. Cardiac Stress-Test induziert durch Dobutamin und überwacht durch Herzkatheter wie hier beschrieben durchgeführt ermöglicht, in einem einzigen Experiment die Messung der folgenden hämodynamischen Parameter: Herzfrequenz (HR), systolischer Druck, diastolischer Druck, end-diastolische Druck, maximal Überdruck Entwicklung (dP / dtmax) und die maximale negative Presseure Entwicklung (dp / dt MIN), an der Basislinie und unter Bedingungen steigender Dosen von Dobutamin. Wie zu erwarten, bei normalen Mäusen beobachteten wir eine Dobutamin dosisabhängigen Anstieg der HR, dP / dt max und dP / dt min. Darüber hinaus bei der höchsten getesteten Dosis (12 ng / g / min) der kardiale Dekompensation der fettreichen Diät-induzierten adipösen Mäusen war entlarvt.

Der arterielle Druck wird durch Signal systolischen und diastolischen Druck definiert. Wenn der Drucksensor innerhalb des linken Ventrikels ist, dessen Druck (LVP) Wellenform wird durch einen Abfall auf Null des diastolischen Drucks und dem Auftreten des linken Ventrikels vor Vorhofkontraktion Kontraktion (Abbildung 1). An Ausgangszustand hatte Ketamin-Xylazin anästhesiert normalen Mäusen HR von 280 ± 24, P max von 107 ± 8, P min von 5 ± 1, EDP nach 14 ± 2, dP / dt max v...

Wir beschreiben das Protokoll eine kardiale Stresstest Dobutamin induziert und überwacht durch Herzkatheter bei normalen Mäusen durchzuführen. Auch zeigen wir ihre Anwendung auf subklinische Herzerkrankungen in fettreichen Diät-induzierten adipösen Mäusen zu entlarven.

Cardiac Stress Test durch Dobutamin induziert und Überwacht durch Herzkatheter in Mäuse

Dobutamine is a &beta;-adrenergic agonist with an affinity higher for receptor expressed in the heart (&beta;1) than for receptors expressed in the ...

Kardialer Belastungstest, der durch Dobutamin induziert und durch Herzkatheteruntersuchung bei Mäusen überwacht wird. In diesem Video präsentieren wir eine Schritt-für-Schritt-Beschreibung eines durch Dobutamin induzierten und durch Herzkatheteruntersuchung überwachten Herzbelastungstests, der an normalen Mäusen durchgeführt wurde. Wir werden auch zeigen, wie es angewendet werden kann, um subklinische Herzerkrankungen bei fettreichen diätinduzierten adipösen Mäusen zu demaskieren.Die anästhesierte Maus wird auf eine thermisch regulierte Platte gelegt. Die Sauerstoffzufuhr erfolgt über einen Kunststoffschlauch und die Körpertemperatur wird mit einer Rektumsonde für die Herzkatheteruntersuchung überwacht. Bei einem Eingriff bei geschlossenem Brustkorb wird die Halsschlagader verwendet, da der Zugang über den Drucksensor in der Katheterspitze fein genug ist, um in die Arterie einzudringen und den arteriellen Druck zu messen.Der Katheter wird etwa 10 Millimeter eingeführt. Die arterielle Druckwellenform sieht folgendermaßen aus. Um den ventrikulären Druck zu messen, sollte der Katheter dem geradlinigen ER-Weg folgen und durch die Aortenklappe bis zur Ventrikelkammer führen.Die Form der Druckwelle ändert sich, wenn der Drucksensor in die Ventrikelkammer eintritt, um Dobutamin zu verabreichen. Ein Kunststoffschlauch wird in die Halsvene eingeführt. Das Medikament wird von einer programmierten Pumpe infundiert, die schrittweise ein zunehmendes Volumen der Lösung injiziert.Der kardiale Belastungstest basiert auf der inotropen und chronotropen Wirkung von Dobutamin im Herzen Bei der kardiologischen Leistungsbeurteilung. Die Doppeldomänenstimulation ist ein mächtiges Werkzeug, um eine klinische Erkrankung des Herzens zu behandeln, die normal ist. Die Bedingungen sind nicht nachweisbar.Nun zeigen wir Ihnen, wie Sie S und Instrument einrichten, wie Sie die Herzkatheteruntersuchung durchführen und Infusionen dominieren sowie wie Sie Daten sammeln und analysieren. Alle gezeigten Tierprotokolle wurden von der Ethikkommission der fta genehmigt. Bei der Zubereitung der Dobutamininfusion verdünnen Sie das Aliquot der Dobutamin-Stammlösung.500 Mikrogramm pro Milliliter in 0,9% Natriumchlorid. Die Konzentration der Arbeitslösung wird nach der Formel Dobutamin-Mikrogramm pro Milliliter berechnet, die dem Körpergewicht mal 0,2 entspricht. Füllen Sie eine Spritze mit einem Durchmesser von einem Milliliter 29 Gauge mal einem halben Zoll und führen Sie ein 20 Zentimeter langes P 10-Röhrchen in die Spritzennadel ein.Stellen Sie die Spritze in der Infusionspumpe gemäß den Herstellungsanweisungen ein. Richten Sie die Rampeninfusion in einem Schritt-zu-Schritt-Format mit einer Steigerung von 10 Mikrolitern pro Minute für jeden Schritt ein, in unserem Fall für sechs Schritte. Drucksensor wird vorbereitet.Weichen Sie den Drucksensor mindestens 15 Minuten lang in 37 Grad Celsius heißem Wasser ein, um die Signaldrift zu minimieren. Weichen Sie den Katheter nicht tiefer als 0,5 Zentimeter ein, um zu verhindern, dass hydrostatischer Druck den Drucksensor elektronisch beeinflusst. Kalibrieren Sie den Drucksensor auf 25 und 100 Millimeter.Der elektrische Eingang von Quecksilber wird in ein Drucksignal in Millimetern Quecksilbereinheit umgewandelt. Stellen Sie die Abtastrate auf 2000 pro Sekunde ein und verwenden Sie den Filtertiefpass mit einem Cutoff bei 100 Hertz. Stellen Sie das Drucksignal auf null Millimeter ein. Quecksilber.Markieren Sie den Katheter in einem Abstand von 15 Millimetern von der Spitze. Es wird empfohlen zu wissen, wie nah Sie sich am linken Ventrikel befinden, wenn Sie den Katheter einführen. Bei der Vorbereitung der Maus auf die Katheterisierung wird das Tier mit 60 Mikrogramm pro Gramm Ketamin und vier Mikrogramm pro Gramm Xylazin entsprechend dem Körpergewicht betäubt.Dann wird sein Hals mit einem Elektrorasierer rasiert. Legen Sie die anästhesierte Maus in Rückenlage auf eine erwärmte isotherme Heizplatte. Sichern Sie seine Gliedmaßen mit Papierklebeband.Verwendung von Vaseline für die Sonde. Eine Einführung wird empfohlen. Führen Sie vorsichtig eine rektale Sonde ein, um die Körpertemperatur zu überwachen.Führen Sie eine Zehenkneifung durch, um die vollständige Sedierung zu bestätigen. Weicht die Körpertemperatur von 37 Grad Celsius plus oder minus 0,5 Grad Celsius ab, stellen Sie diese über die Heizplatte ein. Halte die Schnauze der Maus in die Nähe der Sauerstoffzufuhr.Stellen Sie den Sauerstofffluss auf drei Pfund pro Quadratzoll ein. Platzieren Sie den Bereich des Maushalses unter dem Stereomikroskop. Herzkatheteruntersuchung.Führen Sie mit einer Schere einen kleinen Schnitt auf der rechten Seite in der Nähe des Kiefers durch. Trennen Sie das muskuläre Bindegewebe der Haut. Führen Sie eine Längsdissektion auf der rechten Seite der Luftröhre durch.Trennen Sie das Bindegewebe, das Fett und die Muskeln mit einer gekrümmten Pinzette, um die rechte Halsschlagader in der Nähe der Luftröhre freizulegen. Platzieren Sie einen Expander auf der rechten Seite des Tieres, um die Halsschlagader freizulegen. Rechts befindet sich die Halsvene, die dunkelrot ist.Der pulsierende Druck, der vom Herzen erzeugt wird, erleichtert die Identifizierung der Arterie. Trennen Sie die Arterie mit einer gekrümmten Pinzette vom angrenzenden Gewebe. Der Vagusnerv, der einem weißen Faden ähnelt, liegt entlang der Arterie.Schneiden Sie ein 20 Zentimeter langes Stück sechs OTT-Seidenfäden ab und verdoppeln Sie es. Führen Sie den Doppelfaden von links nach rechts unter der Arterie hindurch. Schneiden Sie den Faden ab, um separate Enden zu erhalten.Führen Sie einen dritten Faden unter die Arterie. Binden Sie einen festen Knoten in den Faden in der Nähe des Kopfes und einen losen Knoten in den distaleren Fadentalus. Knoten in der Mitte.Faden Sie das rechte Ende des mittleren Fadens ein und befestigen Sie es mit Papier auf dem Heizkissen. Den Unterfaden mit einer Hämostatklemme mit Klebeband dehnen. Halten Sie die Halsschlagader mit Tropfen Natriumchlorid feucht.Trockne überschüssige Flüssigkeit mit Wattestäbchen ab. Fixieren Sie die Position der Hämostatenschere, indem Sie die Haut des Bauches einklemmen und den oberen Faden dehnen, um den Blutfluss zu verschließen. Vergewissern Sie sich, dass das Bindegewebe um die Arterie entfernt wurde.Die Arterie sollte mit Blut gefüllt sein und es sollte kein Puls geben. Verhindern Sie, dass Gewinde eine Drehmomentkraft auf die Arterie erzeugen. Machen Sie mit einer Mikroschere einen Querschnitt in der Nähe des unteren Teils der Arterie.Führen Sie den Katheter in die Halsschlagader ein. Achten Sie darauf, den gesamten Drucksensor einzuführen. Vergewissern Sie sich, dass kein Blutverlust vorliegt.Passen Sie den Mittelfadenknoten vorsichtig an, um den Katheter an Ort und Stelle zu halten. Üben Sie nicht zu viel Druck aus. Der Drucksensor ist sehr zerbrechlich.Lassen Sie die Blutschere vom Tier lösen. Bauch. Halten Sie den Katheter mit der Hand fest und schieben Sie den Mittelfaden hinein. Um Blutverlust zu verhindern, sollte die Arterie mit Blut gefüllt sein.Beginnen Sie mit der Aufzeichnung von Drucksignalen. Wählen Sie einen Kanal für die Druckmessung und den anderen Kanal für die Herzfrequenzregistrierung. Wählen Sie für die Kontaktplan die Option zyklische Messungen und richten Sie die Messung als Rate ein.Befindet sich der Katheter im Katheter, schwankt das arterielle Drucksignal zwischen 70 und 110 Millimetern. Quecksilber, wenn Sie an dieser Stelle interessiert sind, können Sie den arteriellen Druck sparen. Schieben Sie den Katheter vorsichtig nach oben, um eine Veränderung der Form des Drucksignals zu beobachten.Befindet sich der Katheter in der linken Herzkammer, schwankt das Drucksignal von null über 100 bis 120 Millimeter. Quecksilber, kontrollieren kontinuierlich die Atemfrequenz, die Körpertemperatur, den Anästhesiepegel und das Drucksignal, alle sollten stabil bleiben. Infusion von Dobutamin.Achten Sie bei der Kanülierung der Halsvene darauf, das Fettgewebe um die Vene herum abzuschälen, um eine Perforation zu verhindern. Das chirurgische Vorgehen bei einem Venenverschluss ähnelt dem bei der Halsschlagader. Führen Sie einen PE 10-Schlauch in die Vene ein.Vergewissern Sie sich, dass der Blutfluss nicht durch Rückwärtsbewegung blockiert wird. Der Spritzenkolben mit der Infusionspumpe Dobutaminerguss beginnt mit 10 Mikrolitern pro Minute und endet mit 60 Mikrolitern pro Minute. Bei jedem Schritt wird die Infusionsrate für zwei Minuten aufrechterhalten.Nach der Dobutamin-Stimulation wird das Tier mit einer Überdosis Anästhesie eingeschläfert. Datenanalyse. Wählen Sie für die Datenanalyse den Abschnitt der aufgezeichneten Daten aus, der Sie interessiert.Achten Sie darauf, ein Zeitintervall zu berücksichtigen. Wenn das Drucksignal stabil erscheint, wählen Sie das Setup-Symbol im Blutdruckmodul und geben Sie automatisch den ausgewählten Drucksignaltyp an. Die Software zeigt Maximal- und Minimalwerte von Parametern an, die die Eigenschaften der ausgewählten Druckspur beschreiben.Darüber hinaus können kardiale Parameter auf den für die Druckspur repräsentativen Ergebnissen abgebildet werden. Das arterielle Drucksignal wird durch den systolischen und diastolischen Druck definiert, wenn sich der Sensor im linken Ventrikel befindet. Die Druckwellenform des linken Ventrikels ist gekennzeichnet durch einen Abfall des diastolischen Drucks auf Null und das Auftreten der linksatrialen Kontraktion vor der Ventrikelkontraktion.Die maximale Überdruckentwicklung und die maximale Unterdruckentwicklung sind die erste Ableitung in den Wendepunkten der Kurve. Bei normalen Mäusen steigen der linksventrikuläre Druck und die Herzfrequenz während des Dobutaminergusses progressiv an. Erwartungsgemäß steigen alle untersuchten hämodynamischen Parameter auch dosisabhängig an.Somit sind eine dominante chronotrope Herzfrequenzerhöhung und positive inotrope Effekte im Vergleich zu normalen Mäusen bei fettreichen diätinduzierten adipösen Mäusen nachweisbar. Wir beobachteten einen geringeren Anstieg der Herzfrequenz und eine maximale Überdruckentwicklung, wenn Herzstress induziert wird, was bei der höchsten getesteten Dobutamindosis statistisch signifikant ist. Diese Unterschiede wurden unter Ausgangsbedingungen nicht beobachtet.Dieser kardiale Belastungstest basiert auf der inotropen und chronotropen Anstrengung des WTA-Mittels im Herzen. Jede Zuverlässigkeit hängt von jedem Detail ab. Wir hoffen, dass dieses Video Ihnen hilft, die Technik einzurichten und in kurzer Zeit ein sicheres Ergebnis zu erzielen.Wenn Sie Fragen haben, zögern Sie nicht, uns zu kontaktieren.

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Dieser Artikel beschreibt die Messung der linksventrikulären Funktion von Mäusen mittels Druck-/Volumenanalyse bei verschiedenen Herzfrequenzen.

Herzkatheter in Mäuse, um den Druck Volumen Relationship Maßnahme: Untersuchung der Bowditch Effect

Das Ziel dieses Protokolls ist es, nicht-invasiven Herz strukturelle und funktionelle Veränderungen in einem Mausmodell der Herzkrankheit durch Quer Aortakonstriktion geschaffen beurteilen zu können, unter Verwendung von B- und M-Mode-Echokardiographie und Farbe / Puls-Doppler-Bildgebung.

Beurteilung der Herz Morphologische und funktionelle Veränderungen in Maus-Modell der Quer Aortakonstriktion durch Echokardiographie

Dieses Protokoll bietet eine detaillierte Beschreibung des echokardiographischen Ansatzes für eine umfassende Phänotypisierung der Herz- und Herzklappenfunktion bei Mäusen.

Echokardiographische Ansätze und Protokolle für die umfassende phänotypischen Charakterisierung von Herzklappenerkrankungen bei Mäusen

Während der murinen myokardialen Ischämie/Reperfusionsoperation wird die korrekte Platzierung der okkludierenden Ligatur typischerweise durch sichtbare Beobachtung der Myokardblässe bestätigt. Hierin wird ein Verfahren zur elektrokardiographischen Bestätigung von Ischämie und Reperfusion zur Ergänzung der beobachteten Myokardblässe an männlichen C57Bl/6-Mäusen demonstriert.

Die Bestätigung der myokardialen Ischämie und Reperfusion Injury in Mäusen Oberflächen Pad Elektrokardiographie

Akutem Myokardinfarkt bei Mäusen induziert akute aber unvollständig zeichnet sich Veränderungen in der linken Herzkammer (LV) Funktion. LV-Katheterisierung bei Mäusen in der koronaren Okklusion dient als eine neuartige Methode für eine Echtzeit-Auswertung der LV-Funktion.

Echtzeit-Druck-Volumen-Analyse eines akuten Myokardinfarkts bei Mäusen

Hier beschreiben wir eine einfache und reproduzierbare Methode, die bei Mäusen durch Präzisionsligation der linken vorderen absteigenden Koronararterie durch Mikromanipulation einen Myokardinfarkt oder eine myokardiale Ischämie-Reperfusionsverletzung induzieren kann.

Induktion von Myokardinfarkt und myokardialer Ischämie-Reperfusionsschädigung bei Mäusen

Das Elektrokardiogramm (EKG) ist die Schlüsselvariable zum Verständnis der kardialen Elektrophysiologie. Körperliche Bewegung hat positive Auswirkungen, kann aber auch im Zusammenhang mit Herz-Kreislauf-Erkrankungen schädlich sein. Dieses Manuskript stellt eine Methode zur Aufzeichnung von Echtzeit-EKGs während des Trainings vor, die dazu dienen kann, ihre Auswirkungen auf die kardiale Elektrophysiologie bei Mäusen zu untersuchen.

Echtzeit-Elektrokardiogramm-Überwachung während des Laufbandtrainings bei Mäusen

Das vorliegende Protokoll beschreibt eine modifizierte parasternale Längsachsenansicht zur schnellen und präzisen Lokalisierung der linken anterioren absteigenden Arterie. Dieser Ansatz soll einfacher und benutzerfreundlicher sein und gleichzeitig die Untersuchung dynamischer Veränderungen der koronaren Flussreserve nach myokardialer Ischämie-Reperfusion bei Mäusen erleichtern.

Dynamische Bewertungen der koronaren Flussreserve nach myokardialer Ischämie-Reperfusion bei Mäusen

Dieses Protokoll beschreibt eine Methode zur Induktion einer diabetischen Kardiomyopathie durch eine Kombination aus fettreicher Diät und Streptozotocin-Injektion. Dieser Ansatz zielt darauf ab, einen verlässlichen Rahmen für die wissenschaftliche Erforschung der diabetischen Kardiomyopathie zu schaffen und mögliche Wege für klinische Behandlungsanwendungen zu erkunden.

Modellierung und Bewertung des Modells der murinen diabetischen Kardiomyopathie

Effektive Pulmonalvenenisolation Verwendung eines Kryoballon hängt komplette Pulmonalvene Okklusion. Der Punkt der Okklusion kann effektiv durch die direkte Analyse von Pulmonalvene Druckkurve Analyse während Aufblasen des Ballons mit einem einfachen und reproduzierbare Technik vorhergesagt werden.

Direkte Pressure Monitoring genau vorhersagt Pulmonary Vein Occlusion Während Kryoballon Ablation

Erfahren Sie, wie man einen dobutamininduzierten Herzstress-Test bei Mäusen durchführt und mittels Herzkatheter überwacht. Diese Methode deckt subklinische Herzerkrankungen bei fettleibigen Mäusen auf.

Cardiac Stress Test durch Dobutamin induziert und Überwacht durch Herzkatheter in Mäuse

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