Ex-vivo-Verfahren für High Resolution Imaging von Cilia Motilität in Nagetier Atemwegsepithelien

Das übergeordnete Ziel dieses Verfahrens ist es, die respiratorische CLIA-Motilität und den CLIA-generierten Fluss anhand frisch isolierter Maustrachea zu visualisieren und zu quantifizieren. Dies wird erreicht, indem zunächst eine flache Bildgebungskammer vorbereitet wird. Die nächsten Schritte des Verfahrens sind die Entnahme und Montage des Trachealgewebes für die Bildgebung.

Anschließend wird gezeigt, wie die C-Motilität und die CLIA-generierte Strömung mit einem inversen Mikroskop mit Hochgeschwindigkeitsvideografie durch ein 100 XDIC-Objektiv visualisiert und aufgezeichnet werden können. Der letzte Schritt besteht darin, das Video zu analysieren, indem die CLIA-Beat-Frequenz und der CLIA-generierte Flow mit der Image J-Software quantifiziert werden. Letztendlich können die Ergebnisse Veränderungen der respiratorischen CLIA-Motilität und des CLIA-erzeugten Flusses durch Hochgeschwindigkeits-Videomikroskopie zeigen.