Name: Fertigung von Geräten und Instrumenten für eine einfachere Rat Liver Transplantation (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2013-05-05T14:00:00.000+00:00
Duration: 8 min 2 s
Description: Lernen Sie die Herstellung des Quick-Linker-Geräts für orthotope Rattenlebertransplantationen mit einfachen Labormaterialien. Diese Methode erleichtert chirurgische Eingriffe und verbessert die Reproduzierbarkeit für Forscher.

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Die Studie wurde von der Artères Stiftung, der Astellas Foundation Europe und der Boninchi Foundation unterstützt. CT wurde von der Swiss National Science Foundation (SCORE Zuschuss 3.232.230-126.233) unterstützt.

1. Griff: Konzeption und Gestaltung <ol><li> Sichern einer Nr. 10 C-Skalpell auf einem Holzbrett mit einem Band. </li><li> Schild am Zentrum des Rings unter dem Mikroskop. Es sollte 1,2 cm direkt aus dem Hain des Skalpell entfernt werden. </li><li> Bohren Sie ein Loch 2 mm mit einer sphärischen Diamant-Bit, montiert auf einem High-Speed-Bohrer. </li><li> Widen das Loch mit fusiform oder konischen Diamant-Bits. Der Enddurchmesser variiert je nach Rattengewicht wie in Tabelle 1 gezeigt. </li><li> Entwerfen Sie die Form des Griffes mit einem Permanent-Marker. Abbildungen 1 und 2 können als Schablonen verwendet werden. </li><li> Rechnen Sie den Bohrer in einen Mini Schleifbock und entfernen Sie den Teil der Klinge außerhalb der Form. </li><li> Runden Sie das Stück mit einer niedrigen Geschwindigkeit rotierende Bürste. </li></ol> 2. Approximator: Konzeption und Gestaltung <ol><li> Die Approximator wird durch Modifizieren gerade chirurgischen Klemmer oder Kocher forcep erhaltens. </li><li> Schneiden Sie die Hälfte von einem Zweig unter dem Mikroskop mit dem High-Speed ​​Mini Schleifbock. </li><li> Als symmetrische Nuten auf beiden Seiten für den Griff zu rutschen in vollständig zu ermöglichen. </li><li> Schneiden Sie einen Längsschlitz in dem langen Arm und überprüfen, dass die Mitte des langen Arms und ein gut aufgestelltes Griff auf der gleichen Achse sind. </li><li> Entwerfen Sie eine Kerbe auf dem langen Arm vor der Mitte des Griffs. </li><li> Machen Sie den Zweig so dünn wie möglich und runden das Stück mit der niedrigen Drehzahl rotierende Bürste. </li></ol> 3. Manschetten: Konzeption und Gestaltung <ol><li> Stulpe Bremssättel je nach Gewicht der Ratte und Dehnung. Im Gegensatz dazu sollte deren Länge etwa 4 mm gehalten werden. </li><li> Nehmen feinen Bohrung Polyethylenschlauch und runden eine Kante mit einem Skalpell Nr. 10. </li><li> Entwerfen Sie einen Hain 0,5 mm von der Kante, und sorgfältig ausgeschnitten eine Steigung hinunter zum Hain. </li><li> Schneiden Sie ein oder zwei Full-Dicke nicks in den Schlauch. Diese werdenhelfen, die Manipulation der Manschette während Transplantat Vorbereitung und Transplantation. </li><li> Schneiden Sie die Manschette bei 4 mm von der Kante. </li></ol>

<ol><li>Oldani, G., Lacotte, S., Morel, P., Mentha, G., Toso, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Orthotopic+Liver+Transplantation+in+Rats%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Vis.+Exp%22%5BJournal%5D)">Orthotopic Liver Transplantation in Rats.</a> J. Vis. Exp. (65), e4143(2012).</li>
<li>Hori, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comprehensive+and+innovative+techniques+for+liver+transplantation+in+rats%3A+A+surgical+guide%5BTitle%5D)+AND+%22World+Journal+of+Gastroenterology.%2C+WJG%22%5BJournal%5D)">Comprehensive and innovative techniques for liver transplantation in rats: A surgical guide.</a> World Journal of Gastroenterology., WJG. 16, 3120(2010).</li>
<li>Kashfi, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+review+of+various+techniques+of+orthotopic+liver+transplantation+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation+Proceedings%22%5BJournal%5D)">A review of various techniques of orthotopic liver transplantation in the rat.</a> Transplantation Proceedings. 37 (1), 185-188 (2005).</li>
<li>Kamada, N., Calne, R. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Orthotopic+liver+transplantation+in+the+rat.+Technique+using+cuff+for+portal+vein+anastomosis+and+biliary+drainage%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation%22%5BJournal%5D)">Orthotopic liver transplantation in the rat. Technique using cuff for portal vein anastomosis and biliary drainage.</a> Transplantation. 28, 47(1979).</li>
<li>Oldani, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+novel+technique+for+rat+liver+transplantation+using+Quick+Linker+system%3A+a+preliminary+result%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Surgical+Research%22%5BJournal%5D)">A novel technique for rat liver transplantation using Quick Linker system: a preliminary result.</a> Journal of Surgical Research. 149, 303-309 (2008).</li>
</ol>

Die Autoren haben nichts zu offenbaren.

Der vorliegende Bericht beschreibt den Entwurf und Bau der Schnell-Linker-System zum leichteren Ratte Lebertransplantation. Rat Lebertransplantation ist ein beliebtes Modell mit 125-180 verwandten Papieren jährlich seit den frühen 1990er Jahren (veröffentlicht <a href="http://www.pubmed.com" target="_blank">www.pubmed.com</a> ). Es ermöglicht eine breite Palette von Experimenten einschließlich der Erforschung von immunologischen und Transplantat Erhaltung Fragen. Die Verwendung des &quot;Quick-Linker&quot;-Kit ermöglicht eine einfachere und schnellere Anastomosen mit garantierten Intima-to-Intima Kontakt. Eine detaillierte Beschreibung und Diskussion der technischen Schritte einer Ratte Lebertransplantation wurden bereits 1 beschrieben. Der Quick-Linker Kit kann bei niedrigen Preis von gemeinsamen Labor Material gebaut werden. Die größte Herausforderung begegnet wurde den Abbau von einem Griff in der letzten Bürsten zusammenhängen und dass Problem ist, indem Sie den schmalsten par gelöstt des Griffs Ring bei 0,5 mm (Abbildungen 1 und 2 zeigen entsprechende Größen). In Bezug auf die Qualität Klinge sollte nur Edelstahl in Betracht gezogen werden. Obwohl etwas weniger flexibel, um die durchschnittliche Klinge aus Kohlenstoffstahl Vergleich haben Klingen aus rostfreiem Stahl Rost nicht entwickeln, so dass eine lebenslange Nutzung der Griffe. Zu beachten ist, ist das Design der aktuellen Griffen und Manschetten das Ergebnis eines Prozesses, der auf die vorgeschlagenen Größen geführt hat, so dass für den effizientesten Anastomosen. Manschette Durchmesser variieren entsprechend der Ratte Gewichte (Tabelle 1). Minimale Variationen in der Länge toleriert werden, mit einer üblichen Länge von etwa 4 mm (Abbildungen 3 und 4). In Bezug auf die Approximator sollte der ausgewählten Kocher forcep haben Griffe mindestens 4 cm vom Drehpunkt. Dies ermöglicht einen sicheren Verschluss der Zahnstange außerhalb des Tieres Bauch. InsgesamtDie vorgeschlagene Vorrichtung kann einfacher Vene Anastomosen für die Transplantation von Leber und andere Arten von Transplantaten bei Ratten zu ermöglichen.

Eine Technik der orthotopen Lebertransplantation Ratte hat in einer aktuellen Journal of Visualisierte Experimente Papier 1 gezeigt. Pfortader und infra-Leber Hohlvene Anastomosen wurden mit dem Quick-Linker assisted Manschette Technik. Diese Technik wurde unter anderem Änderungen des ursprünglichen Kamadas Technik 2-4 gewählt, da es einfacher und schneller für Anastomosen, führt zu einer besseren hämodynamischen erlaubt und kann mit einer kürzeren Lernkurve 1,5 umgesetzt werden. Der Quick-Linker Technik erfordert die Verwendung eines Griffs, ein Approximator und Manschetten, können alle davon aus gemeinsamen Labor gemäß der Technik im vorliegenden Bericht beschrieben gestaltet werden.

<table><tbody><tr><td>Porta Manschette</td><td>Altecweb oder Schmiede-Medizin</td><td>Spule 01-96-1729 800/100/420</td><td>Bohrung : variabel Wand : 0,30 mm Länge: 3,8-4,2 mm <a href="http://altecweb.com" target="_blank">altecweb.com</a> oder <a href="http://smiths-medical.com" target="_blank">smiths-medical.com</a></td></tr><tr><td>IVC Manschette</td><td>altecweb oder smiths-medical</td><td>Spule 01-96-1733 800/100/540</td><td>Bohrung: variabel Wand: 0,30 mm Länge: 3,8-4,2 mm <a href="http://altecweb.com" target="_blank">altecweb.com</a> oder <a href="http://smiths-medical.com" target="_blank">smiths-medical.com</a></td></tr><tr><td>Minibohrer </td><td>Dremel</td><td>100 series</td><td>35.000 U/min <a href="http://dremel.com" target="_blank">dremel.com</a></td></tr><tr><td>Diamant-Radspitze</td><td>Dremel</td><td>7103</td><td>2 mm <a href="http://dremel.com" target="_blank">dremel.com</a></td></tr><tr><td>Diamant-Radspitze</td><td>Dremel</td><td>7105</td><td>4,4 mm <a href="http:// dremel.com" target="_blank">dremel.com</a></td></tr><tr><td>Diamantscheibe Spitze</td><td>Dremel</td><td>7144</td><td>2,4 mm <a href="http://dremel.com" target="_blank">dremel.com</a></td></tr><tr><td>Trennscheiben</td><td>Dremel</td><td>420</td><td>Durchmesser: 23,8 mm Dicke: 0,5 mm <a href="http:// dremel.com" target="_blank">dremel.com</a></td></tr><tr><td>Quicklinker greift</td><td>dltchiropody (DLT)</td><td>PAR 10</td><td>modifizierte Skalpellklingen <a href="http://dltchiropody.co.uk" target="_blank">dltchriopdy</a></td></tr><tr><td>Quicklinker approximator</td><td>pharmap</td><td>UD-04-275</td><td>modifizierte Kochers Zange <a href="http://pharmap.ch" target="_blank">pharmap.ch</a></td></tr></tbody></table>

fertigung von geräten und instrumenten für eine einfachere rat liver transplantation

Manufacturing Devices and Instruments for Easier Rat Liver Transplantation

Orthotopen Lebertransplantation Ratte ist ein beliebtes Modell, das vor kurzem in einem JoVE Papier wurde mit dem Einsatz der &quot;Quick-Linker&quot; Gerät gezeigt. Diese Technik ermöglicht eine leichtere venösen Manschette-anatomoses nach einer angemessenen Einarbeitungszeit. Das Gerät besteht aus zwei Griffe, die aus Skalpell Klingen sind geschnitzt, eine Approximator, die durch Modifizieren Kocher Pinzette erhalten wird, und Manschetten aus feinen Bohrung Polyethylenschlauch entworfen zusammen. Der gesamte Prozess kann in einem Low-Cost-mit gemeinsamen Labor Material durchgeführt werden. Der vorliegende Bericht enthält eine Schritt-für-Schritt-Protokoll für die Gestaltung der benötigten Teile und umfasst Schablonen.

Fünf Kits, darunter fünf Approximatoren und 11 Griffe hergestellt wurden. Ein Griff brach während der letzten Bürsten. Dieses Problem resultiert aus der Tatsache, dass der Ring von dem Griff zu klein war, und es wurde durch Einstellen der engsten Stelle der Griffring bei 0,5 mm gelöst. Keine Probleme traten während der Gestaltung der Approximatoren. <table border="1"><tbody><tr><td> Ratte Gewicht (g) </td><td> Porta Griff (Innen-Ø) (mm) </td><td> Porta Manschette (Außen-Ø) (mm) </td><td> IVC Griff (Innen-Ø) (mm) </td><td> IVC Manschette (Außen-Ø) (mm) </td></tr><tr><td> 120-180 </td><td> 2.2 </td><td> 1.7 </td><td> 2.6 </td><td> 2,08 </td></tr><tr><td> 180-270 </td><td> 2.6 </td><td> 2,08 </td><td> 3,4-3,7 </td><td> 3,0-3,25 </td></tr><tr><td> &gt; 270 </td><td> 2.9<html></td><td> 2,42 </td><td> 4.2 </td><td> 3.7 </td></tr></tbody></table> Tabelle 1. <img src="/files/ftp_upload/50380/50380fig1.jpg" alt="Abbildung 1" fo:content-width="6in" fo:src="/files/ftp_upload/50380/50380fig1highres.jpg"/> Abbildung 1. Porta Griff Schablone. Wird mit einem 1:1 verwendet, um den Griff der Gestaltung führen kann ausgedruckt werden. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/50380/50380fig1large.jpg" target="_blank">Klicke hier, um eine größere Abbildung anzuzeigen</a> . <img src="/files/ftp_upload/50380/50380fig2.jpg" alt="Abbildung 2" fo:content-width="6in" fo:src="/files/ftp_upload/50380/50380fig2highres.jpg"/> Abbildung 2. IVC Griff Schablone. Wird mit einem 1:1 verwendet, um den Griff der Gestaltung führen kann ausgedruckt werden. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/50380/50380fig2large.jpg" target="_blank">Klicke hier, um eine größere Abbildung anzuzeigen</a> . Inhalt &quot;&gt; <img src="/files/ftp_upload/50380/50380fig3.jpg" alt="Abbildung 3" fo:content-width="4.6in" fo:src="/files/ftp_upload/50380/50380fig3highres.jpg" /> Abbildung 3. Porta und IVC Manschetten Seitenansicht. Graft V.Porta sollte der zentrale Nut gesichert werden, während Empfängers Schiff in den seitlichen eins. Diese Maßnahme ermöglicht eine optimale Intima-to-Intima Kontakt. <img src="/files/ftp_upload/50380/50380fig4.jpg" alt="Fig. 4" fo:content-width="4.1in" fo:src="/files/ftp_upload/50380/50380fig4highres.jpg"/> Abbildung 4. Porta und IVC Manschetten Vorderansicht. Bremssättel geeignet für Ratten mit einem Gewicht von 180 bis 270 g vertreten sind.

Wir beschreiben das Design des &quot;Quick-Linker&quot; Gerät zur leichteren orthotopen Lebertransplantation Ratte.

Fertigung von Geräten und Instrumenten für eine einfachere Rat Liver Transplantation

Orthotopic rat liver transplantation is a popular model, which has been shown in a recent JoVE paper with the use of the "quick-linker" device. This ...

In einem kürzlich erschienenen Videoartikel auf JoVE beschrieben wir die Verwendung des Schnellverbinders für eine einfachere Lebertransplantation bei Ratten. Das Gerät ist nicht im Handel erhältlich, kann jedoch ohne professionelle Fertigungskenntnisse hergestellt werden. In diesem Video beschreiben wir, wie man ein komplettes Set ausgehend von gängigem Laborbedarf entwirft und formt.Genießen Sie das Video. Das schnelle Verbindungskit für die orthotopische Lebertransplantation bei Ratten besteht aus einem Approximator, einem Ring für die Vena cava und einem kleineren Ring für die Pfortader. Befestigen Sie eine Skalpellklinge der Größe 10 mit Klebeband auf einem Holzbrett und schieben Sie die Mitte des Rings unter dem Mikroskop darunter. Sie sollte sich 1,2 Zentimeter gerade von der Nut des Skalpells entfernt befinden.Befestigen Sie einen Diamantbohrer an einem Hochgeschwindigkeitsrotationsbohrgerät und bohren Sie ein Loch mit zwei Millimetern Durchmesser. Weiten Sie das Loch mit feineren diamantbeschichteten Bohrern auf. Der Lochdurchmesser sollte 2,6 Millimeter betragen, um den Portalgriff für Ratten mit einem Gewicht zwischen 180 und 240 Gramm aufzunehmen.Gestalten Sie die äußere Form des Griffs gemäß der Schablone. Wie in Abbildung eins dargestellt, wandeln Sie die Bohrmaschine in eine Mini-Schleifmaschine um und entfernen Sie den Teil der Klinge außerhalb der Form. Runden Sie das Werkstück abschließend mit einer rotierenden Bürste bei niedriger Drehzahl ab.Der Approximator wird durch die Modifikation gerader chirurgischer Klemmen oder Klemmen für das Caucaskraft unter dem Mikroskop gewonnen, und zwar in der Mitte eines Astes. Mit der Hochgeschwindigkeits-Mini-Schleifmaschine werden symmetrische Rillen auf beiden Seiten angebracht, damit der Griff vollständig hineingleiten kann. Ein langeritudinaler Schlitz wird in den langen Arm geschnitten, und es wird überprüft, ob die Mittelachse des langen Arms und der korrekt positionierte Griff auf derselben Achse liegen.Entwerfen Sie eine Kerbe am langen Arm, die zur Mitte des Endes weist. Gestalten Sie den Zweig so dünn wie möglich. Runden Sie das Stück abschließend mit einer rotierenden Bürste mit niedriger Geschwindigkeit ab, wobei die Kaliber der Rattenschwänze je nach Rattengewicht und -stamm variieren.Allerdings sollte die Klinge immer etwa vier Millimeter betragen. Siehe Tabelle eins für Kaliberbereiche. Nehmen Sie ein feines Polylin-Schlauchmaterial und runden Sie eine Kante mit einem Skalpell der Größe 10 ab.Konstruieren Sie eine Nut in einem Abstand von 0,5 Millimetern von der Kante. Schneiden Sie nun vorsichtig entlang nach unten bis zur Nut. Schneiden Sie eine oder zwei vollständige Kerben in die Wandung des Schlauchs.Diese dienen dazu, das Kalb während der Vorbereitung und Transplantation des Transplantats zu manipulieren. Schneiden Sie das Kalb schließlich vier Millimeter vom Rand entfernt ab. Wir zeigten, wie man ein Kit aus einem Ring für die Pfortader und ihrem Kalb, einem Ring für die hepatische Vena cava und ihrem Kalb sowie einem Approximator zusammenstellt.Diese Werkzeuge erleichtern die Leberreimplantation, indem sie die Einsetzung der Klammern unterstützen. Alle Metallteile werden unmittelbar nach der Fusion entfernt, sodass das Kit unbegrenzt wiederverwendet werden kann, unabhängig von der gewählten Ringgröße oder -form. Die Ausrichtung zum Approximator ist der kritischste Faktor.Ein weiterer wichtiger Faktor ist die Dicke der Rillen, die beispielsweise im unteren Bildbereich nicht dünner als 0,5 Millimeter sein sollten, da hier die Form korrekt herausgearbeitet wurde. Im oberen Bereich hingegen ist die Metallbrücke zwischen zwei Segmenten zu dünn und könnte während der Endbearbeitung zu einem Bruch führen, wie in diesem Fall nach den vorgenommenen Maßnahmen zu sehen ist.Sofern keine Probleme auftreten, können die Instrumente potenziell ewig halten.

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Research

Forschung

JoVE Journal

Bioengineering

Biotechnik

Wir präsentieren einen einfach zu etablieren Revision der klassischen Zwei-Manschette Technik zur orthotopen Lebertransplantation in der Ratte.

Lebertransplantation bei der Ratte

Lebertransplantation bei Ratten ist ein unverzichtbares experimentelles Modell für die biomedizinische Forschung. Hier präsentieren wir unsere chirurgischen Verfahren zur orthotopen Ratten Lebertransplantation mit arteriellen Rekonstruktion mit 50% partielle Transplantat.

Chirurgische Verfahren für eine Ratte Modell Teilweise Lebertransplantation mit arteriellen Rekonstruktion

Hilfslebertransplantation bietet eine temporäre Unterstützung in akuten Leberversagen, bis die Regeneration der Leberversagen. Die heterotope Hilfslebertransplantation (HALT) mit Pfortader Arterialisation (PVA) macht ausreichende Leberfunktion. Wir entwickelten eine analoge Technik in der Ratte, um den Einfluss der Pfortader Arterialisation auf die Morphologie und Funktion des Transplantats zu untersuchen.

Heterotope Hilfs Ratte Leber-Transplantation mit strömungs geregelt Pfortader Arterialisation in akutes Leberversagen

Die vorgestellten Techniken zur Leberentnahme, Kanülierung und Perfusion unter Verwendung unseres proprietären Geräts ermöglichen ausgefeilte Perfusionsaufbauten, um Dezellularisierungs- und Rezellularisierungsexperimente in Rattenlebern zu verbessern.

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Ein einzigartige Rattenleber hilar Clamp-Modell wurde für die Untersuchung der Auswirkungen von pharmakologischen Molekülen in Lindern Ischämie-Reperfusionsschaden entwickelt. Dieses Modell beinhaltet direkte Kanülierung der Portal Versorgung des ischämischen Lebersegment über einen Zweig des Pfortader, was eine direkte hepatische Lieferung.

Methode der direkten segmentale Intra-Leber-Lieferung Mit einer Rattenleber Hilar Clamp Modell

Hier ist ein Protokoll mit neu arterialized Ratte teilweise Lebertransplantation vorgestellt. Insbesondere war 70 % Leber resezierten in Vivo durch eine aktualisierte Technik des Schiffes-orientierte Hepatektomie. Die leberarterie wurde in einer End-to-Side Weise rekonstruiert. Die Manschette Technik wurde modifiziert, um die Anastomose Infrahepatic Vena Cava verkürzen.

Re Arterialized Ratte teilweise Leber Transplantation mit einem in Vivo Schiff-orientierte 70 % Hepatektomie

Die Rekonstruktion der Suprahepatic Vena Cava (SHVC) bleibt ein schwieriger Schritt in der Ratte orthotopen Leber Transplantation. In diesem Artikel zeigen wir Schritt für Schritt-Protokoll für den Wiederaufbau der SHVC bei Ratten mit einer neuartigen magnetischen Anastomose-Technik.

Einem Rattenmodell der orthotopen Lebertransplantation mit einer neuartigen magnetischen Anastomose-Technik für Suprahepatic Vena Cava Wiederaufbau

Das Ziel dieser Studie ist es, das orthotopische Lebertransplantationsmodell der Ratte zu modifizieren, um die Transplantation menschlicher Leber besser darzustellen und das Überleben der Empfänger zu verbessern. Die vorgestellte Methode stellt den hepatischen arteriellen Zufluss wieder her, indem die gemeinsame Leberarterie der Spenderleber mit der richtigen Leberarterie der Empfängerleber verbunden wird.

Reduzierte Komplikationen nach arterieller Wiederverbindung in einem Rattenmodell der orthotopischen Lebertransplantation

Dieses Papier enthält eine detaillierte Beschreibung, wie man ein Tiermodell der anhepatischen Phase (Leberischämie) bei Ratten baut, um die Grundlagenforschung zur Ischämie-Reperfusionsverletzung nach einer Lebertransplantation zu erleichtern.

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Erfolgreiche orthotope Lebertransplantation bei Mäusen mittels Mikrocomputertomographie-Angiographie

Lernen Sie die Herstellung des Quick-Linker-Geräts für orthotope Rattenlebertransplantationen mit einfachen Labormaterialien. Diese Methode erleichtert chirurgische Eingriffe und verbessert die Reproduzierbarkeit für Forscher.

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