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DOI: 10.3791/50733-v
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Dithranol (DT, 1,8-Dihydroxy-9 ,10-dihydroanthracen-9-on) wurde zuvor als ein MALDI-Matrix für die Gewebeabbildung für kleine Moleküle berichtet wurde, Protokolle für die Verwendung von DT für die MALDI-Imaging von endogenen Lipiden auf die Hier werden Oberflächen von Gewebeschnitten von Positiv-Ionen-MALDI-MS auf einem ultrahochauflösenden Quadrupol-FTICR Instrument zur Verfügung gestellt.
Bei diesem Verfahren werden mehrere endogene Lipide innerhalb einer Rinderlinse räumlich lokalisiert. Unter Verwendung der Technik des matrixgestützten Lasers, der DESORPTIONSIONISATION, der massenspektrometrischen Bildgebung. Bereiten Sie zunächst einen dünnen Schnitt aus Rinderlinsengewebe vor und wenden Sie ein Multi-Matrixx an, dann erfassen Sie einen Maldi-Massenspektraldatensatz.
Verarbeiten Sie den Datensatz zu einer visuellen Darstellung der detektierten Lipide auf dem Linsengewebeschnitt. Zusammen können diese Ergebnisse die Position und die relative Häufigkeit der Lipide in einer Rinderlinse bestimmen und eine visuelle Darstellung dieser Verteilung erzeugen. Im Vergleich zu anderen Methoden wie der Lipidextraktion mit anschließender LCMS-Analyse ermöglicht die maldi-Massenspektrometrie die gleichzeitige Visualisierung mehrerer Lipide, ohne ihre räumliche Lokalisierung zu verlieren. Entnehmen Sie die schockgefrorenen Gewebeproben aus der Lagerung bei minus 80 Grad Celsius.
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