Membran-DORN: Ein Tool, um biochemische Protein-Protein-Interaktionen von Membranproteinen Identifizieren In Vivo

Das übergeordnete Ziel dieses Verfahrens ist es, in vivo Proteine, Proteininteraktionen von Membranproteinen durch ein Membran-Streptokokken-Protein-Interaktionsexperiment oder Membranwirbelsäule zu identifizieren. Dies wird durch die in vivo-Vernetzung mit dem reversiblen Vernetzer für Formaldehyd erreicht. Der zweite Schritt besteht darin, das strept-markierte Membranköderprotein zusammen mit den vernetzten Beuteproteinen zu reinigen.

Als nächstes wird die Vernetzung durch Kochen umgekehrt. Der letzte Schritt ist die Trennung des Membranköderproteins und der co-gereinigten Beuteproteine durch Natriumsulfat, Polyacrylamid-Gelelektrophorese oder SDS-Seite. Letztendlich werden Immun-Blotting und Massenspektrometrie-Analysen verwendet, um die Beuteproteine zu identifizieren, was die Analyse von Membranprotein-Wechselwirkungen ermöglicht.