Flexible Koloskopie in der Maus, um die Schwere der Colitis und kolorektalen Tumoren auswerten mit einem validierten Endoskopische Scoring System

Hallo, ich bin Tomohiro Kani, ein Besuch pH von der Nintendo University in Tokio, und ich bin Fabio Elli, Direktor des Digestive Health Research Center, ein Fall der Western Reserve University School of Medicine. In diesem Video beschreiben wir unsere Methodik zur Durchführung der Koloskopie bei Mäusen. Betonen Sie, wie wichtig es ist, sich mit der normalen endoskopischen Anatomie vertraut zu machen.

Beschreiben Sie, wie Sie Probleme während der Endoskopie effektiv beheben können, um Traumata und Bildartefakte zu minimieren. Beschreiben Sie schließlich unser Bewertungssystem für die Beurteilung von Darmentzündungen im mu-Augenmodell von Kolitis und Colitis-assoziiertem Krebs. Vielen Dank für Ihre Aufmerksamkeit.

Richten Sie zunächst das Endoskopiesystem ein und befestigen Sie das Zielfernrohr an der Mitte des Videosystems und der Lichtquelle. Sterilisieren Sie das Zielfernrohr und befestigen Sie eine Spritze für die Luftinsufflation. Schalten Sie dann das System ein und passen Sie den Weißabgleich mit dem Tier an.

Richtig betäubt und fixiert beginnt die endoskopische Untersuchung. Biopsieproben können bei Bedarf entnommen werden. Erwärmen Sie die Maus nach dem Scoping mit einem Licht zur Wiederherstellung am Ende.

Das Scoring-System zur Bewertung von Dickdarmentzündungen und Dickdarm-assoziiertem Dickdarmkrebs wird erläutert. Einrichten des Endoskopiesystems. Das Endoskopiesystem umfasst die Zentrale des Videosystems, eine Xenon-Lichtquelle und einen Videorekorder.

Wir verwenden ein humanes Ureteroskop für die Koloskopie bei Mäusen. Unser Oszilloskop URFV ist ein flexibles Videoskop, das einen CCD-Sensor verwendet. Der Außendurchmesser des Einführschlauchs beträgt 3,3 Millimeter und das distale Ende hat einen Durchmesser von 2,8 Millimetern.

Befestigen Sie zunächst das Zielfernrohr an der Mitte des Videosystems und an der Lichtquelle. Sterilisieren Sie anschließend das Zielfernrohr und die Objektivoberfläche mit 70 % Ethanol. Befestigen Sie dann eine drei Millimeter Spritze an den Arbeitskanal.

Dies wird verwendet, um die Menge an intraluminaler Luft bei Insufflation oder Aspiration zu regulieren. Schalten Sie den Hauptschalter ein und stellen Sie den Weißabgleich ein. Vergessen Sie auch nicht, die Maus im NBI-Modus Zwei einzurichten und zu betäuben.

Zuerst werde ich die Inhalationsanästhesie demonstrieren. Mit Isof-Fluor verwenden wir vier bis 5 % Isof-Fluor für die Induktion. Nachdem die Maus aufgehört hat, sich zu bewegen, reduzieren Sie die Konzentration auf die Erhaltungsdosis von eins bis 2 %Halten Sie die Maus auf dem Tisch fest, indem Sie den Schwanz und die unteren Extremitäten mit Klebeband abkleben. Das Tail-Taping ist besonders wichtig, um die Maus während des Scopings stationär zu halten.

Auch intraperitoneale Injektion von Tribrom. Für die Narkose kann Ethanol verwendet werden. Drei. Endoskopie Perianale Läsionen sind nicht Teil der endoskopischen Untersuchung, aber sie sind ein wichtiger Befund und sollten vor dem Einsetzen beobachtet werden und nicht mit traumatischen Blutungen verwechselt werden.

Beschichten Sie das Zielfernrohr vor dem Einsetzen mit chirurgischem Gleitmittel und achten Sie darauf, den CCD-Sensor nicht zu beschichten. Führen Sie das Zielfernrohr durch den Anus ein. Diese Erstinsertion sollte so schonend wie möglich erfolgen, da die Blindeinführung die Dickdarmschleimhaut schädigen kann.

Schalten Sie das Licht ein und starten Sie die Aufnahme. Schieben Sie die Luftspritze langsam und vorsichtig, um ein Sichtfeld zu erhalten. Zu viel Luftinsufflation kann den Mund töten.

Das Vorhandensein von Spontanblutungen sollte beurteilt werden, wenn das Endoskop in das Rektum oder den Dickdarmwinkel eingeführt wird. Die Handhabung passt die Ansicht vertikal an und der Drehmomentregler dient zur horizontalen Einstellung. Die Koordination zwischen diesen beiden Kontrollen ist sehr wichtig.

Beobachten Sie die Transparenz. Beim normalen Dickdarm ist die Wand transparent mit normaler Vaskularität und ohne jegliche Dicke. Unter Transparenz versteht man eine transmurale Sichtbarkeit der Gefäße bzw. extramuralen Organe.

Die sich wiederholende Bewegung des Einführens und Herausziehens hilft bei der Beurteilung im normalen Dickdarm. Bei der Untersuchung sind sowohl kleine als auch große Gefäße sichtbar. Sie können bei Bedarf Fotos oder Biopsieproben machen.

Überprüfen Sie, ob Kontaktblutungen vorhanden sind. Beim Zurückziehen des Endoskops ist es nicht notwendig, die Schleimhaut absichtlich abzukratzen. Der Schmalband-Bildgebungsmodus betont die feinen Strukturen von Gefäßen in Schleimhäuten.

Das Rektum ist von Muskeln umgeben, während der Dickdarm nicht durch das umgebende Gewebe fixiert wird. Aufgrund dieses anatomischen Unterschieds sind extramurale Eingeweide im Enddarm nicht sichtbar. Kotpellets Sind manchmal in der Nähe des Anus vorhanden.

Sie können mit Luftinsufflation entfernt werden, manchmal können sie jedoch bestehen bleiben und die endoskopische Sicht behindern. In diesen Fällen verwenden wir bis zu einer mil PBS-Einlauf, um den Stuhl auszuwaschen. Der Kot wird in der Regel nach ein paar Minuten wieder ausgeschieden.

Verschwommene Sicht, die durch das Vorhandensein von Abstrichen auf der Linse verursacht wird, ist ebenfalls ein häufiges Problem, insbesondere bei Kolitis oder Blutungen. In dieser Situation haben wir versucht, das Objektiv mit Insufflation von Luft zu reinigen. Dieses Verfahren kann erfolgreich sein, um das Objektiv zu reinigen, ohne das Zielfernrohr zurückzunehmen.

Die peristaltische Bewegung ist eine der normalen physiologischen Aktivitäten des Darms. Da die Luftinsufflation das Lumen während der Peristaltik nicht erfolgreich erweitert, sollten Sie warten, bis die Peristaltikwelle vorüber ist. Nummer vier, Biopsie-Biopsieproben werden mit einer flexiblen Biopsiezange entnommen.

Die Becher werden durch den Griff geöffnet und geschlossen. Führen Sie die Pinzette in den Arbeitskanal ein. Achte darauf, dass du den Darm nicht durchbohrst.

Öffnen Sie die Körbchen auf eine geeignete Größe und legen Sie die Spitze auf die gewünschte Stelle. Verschließen Sie die Körbchen vorsichtig und ziehen Sie fest. Entfernen Sie die Probe, indem Sie sie mit geeigneter Lösung spülen.

Nummer fünf, die Genesung. Nach der Untersuchung erwärmen Sie die Maus, bis sie sich erholt hat. Wir verwenden ein elektrisches Licht zum Erwärmen von sechs Punkten für Dickdarmentzündungen.

Unser Scoring-System besteht aus vier Parametern, einer perianalen Läsion, zwei, Transparenz der Dickwand, drei Darmblutungen und vier fokalen Läsionen. Jeder Parameter kann von null bis drei bewertet werden. Die maximale Gesamtpunktzahl beträgt 12.

Zusätzlich haben wir eine Skala von Dezimaleinheiten beigefügt, mit der bestimmte endoskopische Befunde hervorgehoben werden können. Die detaillierte Beschreibung der einzelnen Parameter ist im begleitenden Manuskript verfügbar. Hier ist eine Zusammenfassung Nummer eins, perianale Läsion.

Dieser Befund sollte vor dem Einführen des Endoskops in das Rektum beachtet werden. Dadurch wird eine Verwechslung mit traumatischen Blutungen vermieden. Eine Punktzahl von Null ist normal.

Die zweite Punktzahl steht für blutige Entladung. Die dritte Punktzahl gilt für Granulationsgewebe oder Rektumprolaps. Zweitens. Transparenz. Dies stellt die Fähigkeit dar, die Blutgefäße in der Dickdarmwand und den umgebenden Eingeweiden sichtbar zu machen.

Ein Wert von Null zeigt an, dass die Blutgefäße deutlich sichtbar sind. Punktzahl eins. Kleine Gefäße sind teilweise unsichtbar, aber große Gefäße sind sichtbar.

Punktzahl zwei. Kleine Gefäße sind in der Regel unsichtbar und selbst große Gefäße sind nicht klar. Punktzahl drei, genau wie bei Punktzahl zwei, und verdicktes Erscheinungsbild des Dickdarms. Drei.

Blutungen, Spontanblutungen sollten von Kontaktblutungen unterschieden werden. Beurteilen Sie es entsprechend. Punktzahl eins bedeutet, dass die Kontaktblutung durch das sanfte Standard-Scoping-Verfahren induziert wird: Punktzahl drei.

Spontane Blutung beim Eintritt in den Dickdarm. Nummer vier, fokale Läsion. Diese Befunde spiegeln lokale Bedingungen wider, die häufig mit Entzündungen einhergehen.

Punktzahl eins. Plaque ist eine flache Erhebung, die von scheinbar normaler Schleimhaut bedeckt ist. Punktzahl zwei.

Erosionen im roten Endbereich erhalten drei Punkte. Ulzerationserosionen, die von fibrinähnlichem Material bedeckt sind. NBI ist hilfreich, um dies zu erkennen.

Dezimale Deskriptoren. Wir haben drei zusätzliche Parameter hinzugefügt und ihnen Dezimalwerte gegeben.0.1. Für Striktur-Score 0,2 für Darmriss oder Perforation Score 0,5 für tumoröse Läsionen, Präsentation Fall eins.

Maus mit Clostridium-difficile-Infektion. Es hat eine normale Transparenz, aber eine frühe Erosion. Eine kleine Erosion ist zu sehen, aber die Hintergrundschleimhaut ist normal.

Bei näherer Beobachtung zeigt sich ein leichtes Ödem, das diese Läsion umgibt. Auch. In anderen Teilen gibt es keine Befunde, die auf das Vorhandensein einer Entzündung hinweisen. Fall zwei.

Maus mit DSS-induzierter Kolitis unter fettreicher Diät. Intransparenz, spontane Blutungen und Strikturen sind in diesem Fall zu beobachten. Zu Beginn ist eine Blutung zu sehen.

Es ist spontan. Hier ist eine Einschränkung. Es wird durch Luftinsufflation nicht erweitert und das Endoskop kann nicht hindurchgehen.

Die Hintergrundschleimhaut ist gerötet und verdickt. Auch kommt es hier und da zu Kontaktschlägen. Es zeigt die Zerbrechlichkeit des Dickdarms an. Drei.

Maus mit chronischer DSS-Kolitis, Intransparenz, Wandstärke und tumorartigen Vorsprüngen sind zu sehen. Im Allgemeinen ist eine Wandstärke mit weißem Kragen zu sehen und die Wand ist nicht transparent. Dabei handelt es sich um eine Ulzeration um den Milzbeuger, die Vorsprünge sind bemerkenswert.

Fall vier. Maus mit Colitis-assoziiertem Krebs, der mit Azoxymethan und DSS induziert wurde. Es hat mehrere Tumoren und Geschwüre.

Eine große herstehende Läsion vom flachen Typ befindet sich an der rechten Wand und etwas proximaler Bereich ist eine weitere untere Läsion vom flachen Typ zu sehen. Die Struktur der Oberfläche unterscheidet sich offenbar von der normalen Schleimhaut. NBI ist nützlich für die Erkennung und Diagnose einer solchen Läsion.

Im Rektum befindet sich ein geografisch großes Geschwür, das mit fibrösem Material bedeckt ist. Danke für das Aufpassen.