March 1st, 2014
Dieser Artikel stellt ein Protokoll für eine inhaltliche und cued Angst Anlage Test mit einem Videoanalysesystem, Angst zu Lernen und Gedächtnis bei Mäusen zu beurteilen.
Der kontextuelle und akute bis ängstliche Konditionierungstest ist ein Verhaltenstest, der häufig verwendet wird, um die Lernfähigkeit von Lawrence zu beurteilen. Erinnern Sie sich an Assoziationen zwischen einer aggressiven Erfahrung und Umwelthinweisen. In diesem Test gibt es jedoch einige methodische Unterschiede zwischen den Arbeitsplätzen, die dazu führen können, dass es schwierig ist, Daten zu vergleichen und Ergebnisse zu duplizieren.
Um stabilere und stabilere Daten zu erhalten, ist es wichtig, das Testprotokoll so weit wie möglich zu standardisieren. Darin demonstrieren wir das Protokoll des Feldtests. Der Fear Functioning Test ist ein einfacher, empfindlicher und zuverlässiger Test zur Beurteilung Ihres Gedächtnisses.
Dieser Test wird häufig verwendet, um den neurologischen, molekularen Mechanismus und das zugrunde liegende Lernen und Gedächtnis zu verstehen und auch um die kognitive Funktion potenzieller Mausmodelle für psychiatrische Störungen wie Post-Stress-Störung und Schizophrenie zu bewerten. Im Test des Betrachtungsverhaltens, das als Index des Lernens und des Gedächtnisses durch die Isierung menschlicher Beobachter bewertet wird, wurden einige automatisierte Systeme zur automatischen Analyse des Nutzungsverhaltens eingesetzt. Wir entwickeln ein Bildanalysesystem mit Hilfe von Image FG und Image A basiertem Softwareprogramm.
Wir vertreiben ein solches Softwareprogramm und es kann unter dieser Adresse kostenlos heruntergeladen werden. Darin stellen wir unser Prüfprotokoll und das automatisierte Analysesystem vor. Zuerst zeigen wir, wie man den App-Betreiber als Abbild des Softwareprogramms schützen kann.
Zweitens demonstrieren wir die detaillierten Protokolle des Tests, einschließlich des Konditionierungskontexttests und des Q-Tests für das Gerät, das das System verwendet. Abschließend präsentieren wir ein aktuelles Ergebnis, das darauf hindeutet, dass das N-Bild-FD-System sehr zuverlässige Ergebnisse liefern kann. Fangen wir nun an.
Beginnen Sie schnell mit dem Angstkonditionierungstest. Eine Maus wird in einer Kammer mit Neigungsboden platziert. Der OID wird als Auditor dargestellt.
Auditor-Warteschlange für 30 Sekunden. Danach wird ein elektrischer Code-Schock bereitgestellt. Diese Paarung einer Auditor-Warteschlange und des Fußschocks wird dreimal gegeben, um die Assoziation zwischen der Auditor-Warteschlange und dem elektrischen Code-Schock zu verbessern.
Während des Tests wird das Einfrierverhalten als Index für das damit verbundene Lernen und das unfaire Gedächtnis gemessen. Zweitens wird die Maus nach 24 Stunden in die gleiche Konditionierungskammer gelegt und auf Flohverhalten untersucht. Um die kontextuelle Kontrolle der Angst zu messen, wird die Maus dann in ein anders geformtes G ohne auditive Warteschlange versetzt und danach wird die auditive Warteschlange präsentiert.
In diesem Test wird das Einfrierverhalten als Index für das akute Angstgedächtnis verwendet. Während des Tests wird das Mausverhalten über eine Kamera aufgezeichnet, die an einen Computer angeschlossen ist. Das Verhalten wird als einfrieren oder nicht einfrierend bewertet.
Mit dem Bildsoftwareprogramm kann das Programm den Prozentsatz der Einfrierzeit und des Entfernungsverkehrs berechnen. Hier wird beispielhaft die Bildanalyse während des Tests demonstriert. Live-Bilder werden mit einer Länge pro Sekunde aufgenommen.
Image von erstellt ein binäres Image aus jedem Live-Image für jedes Paar. Bei aufeinanderfolgenden Flammen wird die Fläche, durch die sich die Maus bewegt hat, durch das Bild des Programms berechnet. Wenn der Bereich unter einem bestimmten Schwellenwert liegt, wird das Verhalten als Einfrieren bewertet, was im Allgemeinen als völlige Abwesenheit jeglicher Bewegung außer der Atmung und schwer zu schlagen definiert wird.
Einfrieren, das weniger als den definierten Zeitschwellenwert überschreitet, wird nicht als Einfrieren gewertet. Der Schwellenwert muss vorher so eingestellt werden, dass er die beste Übereinstimmung zwischen den Gefrierzeiten, gemessen durch Bild Z, und den Beobachtungen beim Menschen ergibt. Wenn die Flächengröße gleich dem Schwellenwert oder X drei Z ist, wird das Verhalten als nicht einfrierend angesehen.
Hier demonstrieren wir unser Testprotokoll an Mäusen mit diesem Videoanalysesystem. In diesem Protokoll wird der Bediener auf einer quadratischen Gitterkammer mit Metallgittern konstruiert und mit einem transparenten Bleibild freigelegt. FD kann dunkle Motive von einem weißen Hintergrund in jedem aufgenommenen Videobild unterscheiden.
Aber dieser Prozess ermöglicht es uns, das Einfrierverhalten des Subjekts zu analysieren, dass die Kammer auf einen weißen Boden gestellt werden muss, um das Verhalten von schwarzen, guten oder direkten schwarzen Mäusen zu analysieren. Das Gefrierverhalten von Aluminiummäusen kann auch durch Bild D mit Hilfe von schwarzen Metallgittern analysiert werden. Nach einer schwarzen Regel werden Leuchtdiodenleuchten am Segel über der Apparatur befestigt. Die Rasterregel wird auf 100 Dächern durch die LED-Leuchten beleuchtet.
Ein Lautsprecher, der mit dem Tongenerator für weißes Rauschen verbunden ist, ist auf einem Segel über dem Deckel montiert. Ein 55 weißes Rauschen wird als auditive Warteschlange dargestellt. Die Gitter sind mit einem Schockgenerator verbunden, um einen elektrischen Lebensmittelschock abzugeben.
Der Schockwindtest wird auf 0,3 Millionen Paar festgelegt, bevor der Test gestartet wird. Die Stromstärke auf dem Gitter sollte durch ein Metall überprüft werden, da der Schocktest durch eine Ansammlung von Fe und Urin bei den Mäusen verringert werden kann, die Testkammer wird in einen schalldichten Webstuhl gestellt, um Außengeräusche zu minimieren. Während des Tests befindet sich die Berufung in einem anderen Klang als dem, in dem die Kegel- und Kontexttests durchgeführt werden.
Sie besteht aus einer Kammer, die andere Eigenschaften als die Kegelkammer hat. Bei einem normalen Kontext ist es notwendig, die sensorischen Codes so weit wie möglich zu verändern, damit die Maus den Nobel-Kontext als unabhängig von der Betrachtungskammer wahrnimmt. In diesem Protokoll ist die Vorrichtung eine dreieckige Acri-Kammer mit einer flachen Acri-Regel und der transparenten Leitung.
Ein Lautsprecher wird auf einem Segel über dem Blei montiert, um an einer oder drei Warteschlangen zu präsentieren. Diese Warteschlange ist derselbe Hinweis, der den Mäusen beim Schlagen gegeben wurde. Die Beleuchtungsstärke des Bodens ist so eingestellt, dass sie aussieht.
Jede Kammer ist ein Würfel mit einer am Segel montierten Ladekabine und einer Gerätekamera zur Überwachung des Mausverhaltens. Vor jedem Test werden die Acrylwände und -böden mit einer Zunge abgewischt, so dass sie in super hohem Bruttowasser stehen, und die Gitter werden mit 70% Ethanol gereinigt. Um eine Verzerrung aufgrund des olfaktorischen Schnitts zu verhindern, werden die Gitter mit Ethan anstelle von Super-Hype-Bruttowasser abgewischt, um zu verhindern, dass die Gitter ihre elektrische Leitfähigkeit aufgrund der letzten zwei bis vier Mäuse nicht ableiten. Ein Hauspaket in einem temperaturkontrollierten Haltungsraum, um die möglichen Erhöhungen des Käfigtransports auf das Verhalten zu reduzieren und die Mäuse an die Versuchsumgebung anzupassen.
Der Käfig mit den Mäusen wurde mindestens 30 Minuten vor Beginn jedes Tests in ein schalldichtes Wartezimmer gebracht. Alle Experimente sollten im gleichen Zeitraum durchgeführt werden, um die Verhaltensvariationen zu minimieren, die durch Tests zu unterschiedlichen Zeiten hervorgerufen werden können. Mäuse aus jeder Gruppe sollten in einem Gegengewicht getestet werden, um mögliche Auswirkungen der Versuchszeit zu reduzieren.
Unter der Testreihenfolge des Probanden auf die Verhaltensleistung kann Bild D maximal vier Geräte steuern, die gleichzeitig von Mäusen getestet werden, während der Forscher Zeit und digitale Ableitung in die potenziellen Auswirkungen des experimentellen Verfahrens auf das Verhalten von Mäusen spart. Bevor die fortlaufende Sitzung beginnt, führen Sie die Anwendungssoftware A FD aus. Wählen Sie das Steckermenü FD concerning und FD online und stellen Sie die eingestellten Parameterwerte schrittweise wie folgt ein.
Schritt eins: Projekt-ID Geben Sie den Ordner an, in dem Sie das Datum der Dateien speichern möchten. Schritt zwei, Typ des Sitzungsnamens. Alle Wörter im Sitzungsfeld sind das experimentelle Datum und der Referenztext zur Datei, in dem die Startzeit und die Dauer des weißen Rauschens und des Lebensmittelschocks in das Referenzfeld geschrieben sind.
Der Rücksichtstext auf die Datei muss im Ordner "Rücksichtnahme" im Bild vorbereitet werden, der Ordner zuvor. Schritt drei Parametereinstellungen. Geben Sie die Parameterwerte wie Dauer, Zeit und Einfrierkriterien ein, wie im Film gezeigt.
Schritt vier: Betreff-ID. Geben Sie die Betreff-ID ein. Schritt fünf: Die Kameraeinstellungen kontrastieren die Helligkeit und den Kontrast des aufgenommenen Bildes.
Schritt sechs, Schwellenwerteinstellungen. Um zunächst die Entfernung von den aufeinanderfolgenden Bildern zu messen, passen Sie den Schwellenwert des Programms an, der so eingestellt ist, dass die Bilder in schwarze Partikel und weißen Hintergrund unterteilt werden. Die Wegstrecke wird zwischen den einzelnen Sätzen mit XY-Koordinaten für den Schwerpunkt mit dem Partikel in den aufeinanderfolgenden Bildern berechnet.
An zweiter Stelle steht das Verhalten der aufeinanderfolgenden Bilder, wobei nur der zusätzliche Wert x des Programms angenommen wird, das so eingestellt ist, dass es die Bilder in schwarze Partikel im Hintergrund segmentiert und dann die Flächengröße der nicht überlappenden Bereiche zwischen den Partikeln berechnet, von denen das Paar des aufeinanderfolgenden Bildaufnahmefensters der nicht überlappende Bereich angezeigt wird. Ändern Sie den Express-Mittelwert in den Wert, wenn der Wert des Bereichs unter dem ING-Schreiwert liegen sollte, wenn das Verhalten mit der Maus angezeigt wird. Dieser Wert sollte so angepasst werden, dass die Daten nach Bildermüdung mit dem Squad nach Mensch selbst übereinstimmen.
Schritt sieben, auf catch-Feld setzen, gab das Feld an, welche Kammer Sie erfassen möchten, nachdem Sie mit der Rechteck-Schaltfläche in der Toolbox auf rechteckig um den Boden geklickt haben. Kammer im Live-Bildfenster. Wählen Sie als nächstes den Kammerroman aus und klicken Sie auf die Schaltfläche Set, um schließlich auf die Schaltfläche Abschließen zu klicken.
Nachdem die Parametereinstellungen definiert wurden, sollte vor dem ersten Test des Datums ein vorbereitender Test mit Übungsmäusen durchgeführt werden, um festzustellen, ob das Bildanalysesystem und welche Geräuschschockgeneratoren mit diesen Problemen arbeiten. Bewegen Sie den Kammkäfig, in dem sich die Übungsmäuse befinden, von der angrenzenden zur wartenden Dunkelheit und setzen Sie jede Maus unmittelbar nach dem Einsetzen der Mäuse in die Kammer in die Konditionierungskammer. Klicken Sie auf den unteren Startrand des Bildes von Z.Die Mäuse dürfen die Kammer 120 Sekunden lang vollständig erkunden. Danach. 30 Sekunden lang wird ein weißes Rauschen als auditive Warteschlange präsentiert und während der letzten zwei Sekunden des Geräusches wird den Mäusen ein Futterschock verabreicht. Dieser Vorgang wird dreimal in der Sitzung wiederholt, um den Zusammenhang zwischen der Warteschlange und dem Lebensmittelschock zu verstärken.
Die Masken werden nach der letzten Kopplung 90 Sekunden lang in der Kammer belassen. Die Assoziation zwischen dem Kontext der Kammer und der passiven Erfahrung weiter zu etablieren. Nach 480 Sekunden Elop wird die Maus in den Home-Käfig zurückgebracht und der Käfig wird in das Regal des Warteraums zurückgebracht.
Reinigen Sie nach jedem Test die Kammern und das Gitter sorgfältig. Klicken Sie dann auf die Schaltfläche "Nächste Analyse" und wiederholen Sie die Sitzung in den Testmäusen. Etwa 24 Stunden nach dem betreffenden Umzug wird der Käfig für Mäuse in einen schalldichten Warteraum gebracht.
Der Haltewebstuhl wird mindestens 30 Minuten vor Beginn jedes Tests durchgeführt. Langes Bild der und stellen Sie die Parameterwerte der Software auf die gleiche Weise wie bei der Konditionierung ein. Legen Sie jedoch die Dauer auf bis zu 300 Sekunden fest, und wählen Sie 35 Texte aus, die für den Kontexttest abgelegt werden sollen.
35 Text in Datei ist leer. Platzieren Sie die Maus in der Konditionierungskammer und klicken Sie auf den Startboden. Die Mäuse dürfen die Kammer 300 Sekunden lang vollständig erkunden, ohne dass es zu Reizpräsentationen kommt.
Nach 300 Sekunden hetzte li die Mäuse in ihren Heimkäfig und reinigte die Kammern. Klicken Sie dann auf den nächsten Analyseboden und wiederholen Sie den Vorgang im langen Bild der Testmaus von D und stellen Sie die Parameterwerte auf die gleiche Weise wie im fortlaufenden Referenztext ein, der für diesen Test in die Datei aufgenommen werden soll, und stellen Sie die Dauer auf bis zu 360 Sekunden ein. Dies ist ein Referenztext, der für diesen Test eingereicht werden soll.
Platzieren Sie jede Maus in die dreieckige Kammer und klicken Sie auf den Startknopf von Bild Z. Die Mäuse sollen alle in den ersten drei Minuten die Kammer erkunden. Weder weißes Rauschen noch Fußschock sind zu sehen. Diese Kammer hat unterschiedliche Eigenschaften, die einen neuen Kontext bieten und sich auf die fortlaufende Kammer beziehen.
In dieser Kammer muss man sich in der Regel viel bewegen und kein Verhalten zeigen. Am Ende der ersten drei Minuten wird das weiße Rauschen, das bei Concho präsentiert wird, den Mäusen für drei Minuten zur Verfügung gestellt. Während der Präsentation des Auditors stellt der Auditor die Mäuse in die Warteschlange oder zeigt ein schriftliches Verhalten, nachdem 360 Sekunden ausgebrochen sind, bringt die Mäuse in ihren Heimkäfig zurück und stellt den Käfig wieder in das Regal des Haltungsraums.
Reinigen Sie die Kammern nach dem Test sorgfältig. Klicken Sie dann auf den nächsten Analyseboden und wiederholen Sie den Vorgang mit den Testmäusen. Dieses Video zeigt, dass die Passage des Einfrierens, die durch das Bild des Systems analysiert wird, enger mit dem Denken zu verwandt zu sein scheint, das von einem menschlichen Beobachter gemessen wird.
Die Beobachtung wurde durch die Details bestätigt, die zeigten, dass der Prozentsatz des Leasings, der in jedem Test durch die Bildphysik gemessen wurde, vom menschlichen Beobachter stark korreliert oder mit dem Denkwert bewertet wurde. Darüber hinaus zeigt diese Abbildung, dass die Unterschiede zwischen den durch menschliche Beobachtungen gemessenen Einfrierprozentsätzen und dem Bild des Systems in diesem Bild am geringsten waren. Diese Ergebnisse deuteten darauf hin, dass der Prozentsatz des Einfrierens, gemessen durch das Bild des Systems, ähnlich war wie bei menschlicher Beobachtung und dass die Genauigkeit bei der Messung der Vernunft anhand des Bildes Z hoch ist. Okay.
Wie hat es euch gefallen? Wie Sie den Test sehen, kann die Standard-Verhaltensanalyse problemlos durchgeführt werden. Es gibt einige Tipps und wichtige Punkte für die Verwendung des Images des Systems, also lassen Sie mich ika danach fragen. Okay.
Erstens, wie haben Sie das Testverfahren für das Image des Systems empfunden? Ich denke, unser Testverfahren ist sehr einfach und das Image des Systems ist ein nützliches Werkzeug, um Vernunft und Verhalten genau und schnell zu messen. Jeder kann ein Softwareprogramm mit einer vorherigen Schulung problemlos verwenden Infolgedessen kann dieses System verwendet werden, um sein Gedächtnis in vielen Monaten in kurzer Zeit zu bewerten, was uns Zeit und später spart.
Ich verstehe. Gibt es dann etwas, auf das wir achten sollten, wenn wir den Test durchführen? Ja, denn der Bediener gibt an, dass es wichtig ist, das schärfste Bild zu erhalten, um das Verhalten genau zu messen, und so sollten Sie die Kameralänge und die Schreibdinge anpassen.
Auch in der Programmstudie müssen Sie die Kriterien für sexuelle Werte und Vernunft sorgfältig festlegen, um zu beurteilen, ob das Verhalten als Grund verifiziert werden kann oder nicht. Es ist wichtig, dass das Ergebnis unmittelbar war, das Programm wie mit dem Gedanken an sie durch menschliche Beobachtung, wie im vorliegenden Ergebnis gezeigt. Okay. Wie Sie sehen können, kann dies ein Artikel sein, in dem Sie detaillierte Informationen zum Testverfahren und zur Verwendung des Softwareprogramms bereitstellen können.
Wir hoffen, dass dies ein Artikel sein wird. Fördern Sie Ihr Verständnis des Tests und tragen Sie zur Standardisierung des Protokolls bei.
Dieser Artikel präsentiert ein Protokoll für einen kontextuellen und angeregten Angstkonditionierungstest unter Verwendung eines Videoanalysesystems zur Bewertung des Angstlernens und der Angsterinnerung bei Mäusen. Die Studie zielt darauf ab, Methoden zu standardisieren, um die Zuverlässigkeit von Verhaltensbewertungen in der neurowissenschaftlichen Forschung zu verbessern.
Standardized behavioral phenotyping is critical for de-risking target validation in neuroscience drug discovery. Automated video analysis systems improve data reliability and reproducibility, reducing variability in fear conditioning assays used to evaluate cognitive phenotypes in psychiatric disorder models. This supports predictive confidence in early discovery by enabling consistent, quantitative assessment of learning and memory mechanisms.
The method integrates into the discovery continuum from target hypothesis testing through lead optimization, where reliable cognitive phenotyping informs target selection and compound prioritization.