Name: Kontextuelle und Cued Angst Anlage Test mit einer Video-Analyse-System bei Mäusen (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2014-03-01T15:45:00.000+00:00
Duration: 19 min 32 s
Description: Lernen Sie ein standardisiertes Protokoll zur Angstkonditionierung bei Mäusen mit einem automatisierten Videoanalysesystem kennen. Diese Methode ermöglicht zuverlässige Messungen des Einfrierverhaltens für Verhaltensforschung.

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Einige der hier gezeigten Daten wurden im Labor von Dr. Jacqueline N. Crawley in der US-amerikanischen National Institute of Mental Health erhalten und wir würden sie gerne für die Erlaubnis, die Daten in dem Papier zeigen, danken. Wir danken auch Kazuo Nakanishi für seine Hilfe bei der Entwicklung ImageFZ-Programm für Verhaltensanalyse. Diese Forschung wurde unterstützt von Grant-in-Aid for Scientific Research (B) (21300121), Grant-in-Aid for Scientific Research on Innovative Anlagen (Comprehensive Brain Science Network) aus dem Ministerium für Bildung, Wissenschaft, Sport und Kultur Japans Finanzhilfe aus Neuro Japan Center (NIJC) und Zuschüsse von CREST von Japan Science and Technology Agency (JST).

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Wir bestätigen, dass es keine bekannten Interessenkonflikte mit dieser Publikation verbunden und es wurde keine signifikante finanzielle Unterstützung für diese Arbeit, die ihr Ergebnis beeinflusst haben könnten.

Die inhaltliche und cued Angst Anlage Test ist einer der am häufigsten verwendeten Paradigmen auf Lernen und Gedächtnis zu beurteilen. Dieser Test ist eine Form der Pawlowschen Konditionierung, in der eine Zuordnung zwischen einem Kontext und / oder einem konditionierten Stimulus (Gehör cue) und einem aversiven Reiz (elektrisch Fußschock) gefertigt. Nach noch einer einzigen Paarung der Rahmen / Gehör Cue und Fußschock, Mäuse zeigen langanhaltende Einfrieren wenn sie entweder mit dem Kontext oder Cue konfrontiert. In diesem Test wird die Gefrierverhalten als ein Index der Angst Speicher verwendet. Pharmakologische Untersuchungen und Läsion zeigten, dass die Gedächtnisbildung, Konsolidierung und Retrieval von mehreren Hirnregionen, wie der Amygdala, Hippocampus und präfrontalen Kortex 3,33-35 geregelt. Darüber hinaus haben die Molekulargenetik Studien die Rolle von spezifischen Genen und Molekülen in Lernen und Gedächtnis in diesen Hirnregionen mit gentechnisch veränderten Mäusen 36 beteiligt demonstriert. Daher ist dieser Test Simple und nützlich für die Erkundung der neurobiologischen Grundlagen zugrunde liegende Angst Lernen und Gedächtnis. In diesem Film Artikel, unserem Protokoll haben wir zu Experimentatoren mit detaillierten Informationen zu verstehen und einfach den Test durchführen zu liefern. Gefrierverhalten wurde durch direkte Beobachtung durch menschliche Experimentatoren quantifiziert. Eine gut ausgebildete Experimentator wird erwartet, zuverlässige, stabile Ergebnisse über Beobachtungen zu produzieren. Jedoch beinhaltet dieses Verfahren potentielle Probleme, wie Unterschiede in der Beobachtungsmethode, Beobachter spannt und einfache Quantifizierung Fehler macht es schwierig, direkt vergleichen die Ergebnisse von unabhängigen Experimentatoren und verschiedenen Labors. Eine automatisierte Lichtstrahl-Computer Messsystem wurde verwendet, 26,30-32. Allerdings stellt dieses System auch mögliche Probleme bei der Messung Einfrieren Verhaltensweisen. Da der Sensoranordnung kann dieses System nicht in der Lage sein, kleine Kopfbewegungen, die Typica würde erkennenlly als &quot;aktiv&quot; durch die menschliche Beobachtung erzielt werden. Außerdem Zittern während Einfrieren könnte als frostsicher, weil, wenn ein Tier friert, intermittierende Unterbrechungen in der photobeam sind als Folge der zitternden beobachtet berücksichtigt werden. Als ein alternatives Verfahren, wurden automatisierte Bild-und Video-Analysesysteme entwickelt 17-20,37,38. 37 beschrieben, ein paar Systeme mit Bildanalyse-Software-Programme, die gut Gültigkeit haben und Gäste Einfrieren gut 17,20,37-38 Anagnostaras et al.. Allerdings haben die meisten dieser Systeme und Programme zur Analyse von gewerblichen Lieferanten erhalten werden und sind in der Regel teuer. Wir entwickelten die ImageFZ Software-Programm für die Analyse von Gefrierverhalten, und dieses Programm ist als kostenloser Software-Programm verteilt. ImageFZ erkennt die Maus als ein Körper von Pixeln (a-Teilchen) und unterscheidet, subtile Mausbewegung &quot;Einfrieren&quot; oder &quot;nicht-einfrieren&quot; in Abhängigkeit von der Menge derBereich der überlappenden Bereichen zwischen den Teilchen von jedem Paar von aufeinanderfolgenden Bildern. Wie in den repräsentativen Ergebnisse zeigen, sind Messungen mit dem Programm im Einklang mit ImageFZ oder genauer als mit anderen Methoden erhalten. So misst der ImageFZ Programm automatisch das Verhalten, dass menschliche Beobachter das Einfrieren anhand definierter Kriterien beurteilen. Darüber hinaus berechnet die ImageFZ Programm die Wegstrecke (cm) vor, während und nach dem Fußschock Belichtung erleichtert eine Beurteilung der Schockempfindlichkeit und Analyse der Gefrierverhalten. Methodische Unterschiede bestehen zwischen den Laboratorien. Diese Unterschiede können zu Schwierigkeiten beim Vergleich der Daten zwischen den Labors und in replizieren Ergebnisse in verschiedenen Labors führen. Stabilere und vergleichbare Daten zu erhalten, ist es erforderlich, das Testprotokoll so viel wie möglich zu standardisieren. Das Analysesystem mit ImageFZ führt zur Automatisierung von Testverfahren, die dazu beitragen kanndie Standardisierung der Protokolle über Laboratorien. Mehrere Verhaltensreaktionen muss bei der Analyse der Gefrierverhalten werden. Erstens, wenn die Tiere vor einer furchtbaren Situation, können sie statt der 39 Einfrieren fliehen. Flucht ist einer der Angstreaktionen, und ihr Auftreten wird unterschätzt Angst Speicher führen. Zweitens kann das Einfrieren auf eine allgemeine Aktivität abhängen und das Aktivitätsniveau in Versuchs-und Kontrollmäusen muss untersucht werden. Obwohl zum Beispiel Mäuse, denen der muskarinischen Acetylcholinrezeptor M1 zeigte reduzierte Mengen von Einfrieren im Vergleich zu Wildtyp-Mäusen zeigten verschiedenen Verhaltenstests, dass die Ergebnisse ihrer Hyperaktivität Phänotyp anstelle ihres Gedächtnisses 18 zurückgeführt werden. ImageFZ berechnet den Abstand (cm) von den Probanden gereist. Die Daten sind zu prüfen, ob Unterschiede in den allgemeinen Aktivitätsniveaus zwischen den Fächern gibt. Wenn es einen Unterschied in der Gruppedie zurückgelegte Strecke, eine mögliche Herangehensweise an das Problem ist zu prüfen, der Abstand während der ersten 2 Minuten des Trainings als Basisaktivität gereist und einen Unterdrückungsverhältnis / (Aktivität während der Baseline-Aktivität während + verwenden (Unterdrückungsverhältnis = (Aktivität während der Tests) Testen)) als Sekundärindex der Angst 17,40. Schließlich kann ein Unterschied in der Schmerzempfindlichkeit und induziert Veränderungen in der Reaktivität mit einer elektrischen Fuß-Schock, falls vorhanden, zu Variationen in Gefrierverhalten führen. ImageFZ berechnet auch die zurückgelegte Wegstrecke (cm) im Detail von 2 Sekunden vor einer Belichtung von 2 sec bis 2 sec Fuß-Schock nach der Belichtung (6 Sekunden), die als Index der Fußschock Empfindlichkeit verwendet werden können. Video-Analyse-Systeme wurden entwickelt, um die Gefrierverhalten von Albino, schwarz, Agouti zu messen und zu verdünnen braun Mäusen. ImageFZ verwendet eine schwarze Bodenwanne und schwarze Gitter auf weißen Mäusen zu untersuchen (siehe Abbildung 1B). Die schwarzen Gitter werden von Spezi gemacht<html> Verbündeter verarbeiteten Metalle mit beschichteter schwarzer Farbe und eine elektrische Leitfähigkeit ähnlich der von den unbeschichteten Metallgittern, die typischerweise für schwarze Mäuse verwendet werden. ImageFZ analysiert auch die Gefrierverhalten bei Ratten und andere Nagetiere durch Anpassungen der Programmparameter. In der aktuellen Version von ImageFZ wird das Verhalten der Person mit einer Videokamera von der oberen Wand, um ein Einfrieren zu analysieren aufgezeichnet. ImageFZ könnte auch in einem Set-up, wo die Bilder von der Seite der Kammer eingefangen werden. Darüber hinaus steuert die ImageFZ maximal 4 Vorrichtungen. Diese Funktion ermöglicht es dem Forscher, gleichzeitig untersuchen 4 Mäuse, spart Zeit und reduziert die möglichen Einflüsse aus Unterschieden in der Ausführungszeit jedes Thema und die Prüfung, um auf das Verhalten. Somit ImageFZ vereinfacht das Testverfahren und die Analyse von Gefrierverhalten, und dieses Programm erleichtert Tests mit weniger Arbeit und ohne Ausbildung der Verhaltensexperimenten. e_content &quot;&gt; In der Miyakawa Labor haben wir mehr als 110 Stämme von gentechnisch veränderten Mäusen und Wildtyp-Kontroll-Mäusen in der Kontext-und cued Angst Anlage Test mit der Videoanalysesystem, um die Auswirkungen eines bestimmten Gens auf Lernen und Gedächtnis aufzuklären bewertet 41-42 Wir haben eine große Menge von Rohdaten für mehr als 5.000 Mäusen erhalten die Rohdaten, die für veröffentlichte wissenschaftliche Artikel 4-16 verwendet wurde, sind in der &#39;Maus Phänotyp Datenbank&#39; als einer öffentlichen Datenbank (URL enthalten:.. http: / / www.mouse-phenotype.org/). Die vorliegende Film Artikel enthält detaillierte Informationen über die Details unserer experimentellen Verfahren und fördert das Verständnis für die Testsituation.

Die inhaltliche und cued Angst Anlage Test ist der Verhaltens-Paradigma verwendet, um Angst assoziativen Lernen und Gedächtnis bei Nagetieren 1-3 beurteilen. Dieser Test wurde in großem Umfang verwendet, um die neurobiologischen Mechanismen der Angst Lernen und Gedächtnis in transgenen und Knockout-Mäusen 1,4-16 verstehen. Einfrieren Verhalten, das als völligen Unbeweglichkeit mit Ausnahme der Atem definiert ist, ist eine gemeinsame Reaktion auf Situationen ängstlich. In diesem Verhaltensparadigma, nachdem die Tiere werden zu einer Paarung eines Gehör Cue mit einem elektrischen Fuß-Schock ausgesetzt wird, um die Angst erzeugenden Stimulus reagieren sie durch Anzeigen Gefrierverhalten, das als ein Index der assoziativen Lernen und Gedächtnis Angst gemessen wird. Dieser Test erfordert weniger aufwendige Ausrüstung, weniger körperliche Anstrengung durch den Prüfer, und viel weniger Trainingszeit für Mäuse als andere Lern-und Gedächtnisaufgaben, es erfordert in der Regel ca. 5-10 min / Tag pro Maus für 2 Tage. Obwohl das Testverfahren ist simple und erfordert wenig Zeit, um durchzuführen, muss der Prüfer sorgfältig beobachten und messen Mausverhalten, daher mehrere automatisierte Messsysteme wurden entwickelt, um die Verhaltensanalyse von 17 bis 20 durchzuführen. Unsere Video-Analyse-System, das wir mit dem Software-Programm entwickelt ImageFZ, ermöglicht es uns, einfach analysieren Gefrierverhalten und produzieren sehr zuverlässige Ergebnisse. Dieser Artikel enthält detaillierte Informationen zu unseren Testverfahren und beschreibt, wie die ImageFZ Software-Programm verwenden.

<table><tbody><tr><td>ImageFZ-Programm</td><td>Entwickelt von Tsuyoshi Miyakawa</td><td></td><td>Dieses Programm ist über O'Hara & Co., Tokio, Japan, und zum kostenlosen Download bei http://www.mouse-phenotype.org/ erhältlich. Diese Software läuft auf der 32-Bit-Version von Windows XP/Vista/7.</td></tr><tr><td>Konditionierungskammer</td><td>O' Hara & Co., Japan</td><td>CL-3002L</td><td>Für Maus.</td></tr><tr><td>Prüfkammer</td><td>O' Hara & Co., Japan</td><td>CLT-3002L</td><td>Für Maus.</td></tr><tr><td>Schnittstelle</td><td>O' Hara & Co., Japan</td><td>CL-1040</td><td>Das Interface enthält einen Generator für weißes Rauschen/Ton, der mit dem ImageFZ-Programm gesteuert werden kann.</td></tr><tr><td>Verschlüsselter Schockgenerator</td><td>O' Hara & Co., Japan</td><td>SGA-2040</td><td>Der Schockgenerator kann mit dem ImageFZ-Programm gesteuert werden.</td></tr><tr><td>Schockgitter-Tester (Amperemeter)</td><td>O' Hara & Co., Japan</td><td>SG-T</td><td></td></tr><tr><td>USB-Videoaufnahmegerät</td><td>XLR8</td><td>USB2IVOSX</td><td></td></tr><tr><td>Quad-Bildsplitter</td><td>Wireless Tsukamoto Co., Ltd., Japan</td><td>400AS</td><td></td></tr><tr><td>Schallisolierter Raum</td><td>O' Hara & Co., Japan</td><td>CL-4210</td><td></td></tr><tr><td>Freeze Monitor</td><td>San Diego Instruments, Inc., CA, USA</td><td></td><td>16 x 16 Photobeam-Array&nbsp; ( 2,5 cm Abstand)</td></tr></tbody></table>

kontextuelle und cued angst anlage test mit einer video-analyse-system bei mäusen

Contextual and Cued Fear Conditioning Test Using a Video Analyzing System in Mice

Die inhaltliche und cued Angst Testanlage ist eine der Verhaltenstests, die die Fähigkeit der Mäuse zu lernen und zu erinnern, einen Zusammenhang zwischen Umweltreize und aversiven Erfahrungen beurteilt. In diesem Test werden Mäuse in einer Klimakammer angeordnet und Schnitzel eines konditionierten Stimulus (ein Gehör cue) und einen aversiven unkonditionierten Stimulus (ein elektrischer Fußschock) gegeben. Nach einer Verzögerungszeit werden die Mäuse auf die gleiche Behandlungskammer und einer anders geformten Kammer mit Darstellung des Gehör Cue ausgesetzt. Einfrieren Verhalten während der Prüfung wird als Index der Angst Speicher gemessen. Um das Verhalten automatisch zu analysieren, haben wir ein Video-Analysesystem mit der Anwendungssoftware ImageFZ, das als kostenloser Download unter http://www.mouse-phenotype.org/ verfügbar ist entwickelt. Hier, um die Details unseres Protokolls zeigen, demonstrieren wir unsere Verfahren für die inhaltliche und cued Angst Anlage Test in C57BL/6J-Mäusen mit der ImageFZ system. Zusätzlich validiert wir unser Protokoll und das Videoanalysesystem durch Vergleichen der Gefrierzeit ImageFZ System oder ein Lichtstrahl-Computer-Messsystem mit dem von einem menschlichen Betrachter hat gemessen. Wie in unserer repräsentative Ergebnisse gezeigt, waren die erhaltenen Daten durch ImageFZ ähnlich denen von einem menschlichen Betrachter untersucht, was anzeigt, dass die Verhaltensanalyse unter Verwendung des ImageFZ System ist sehr zuverlässig. Die vorliegende Film Artikel enthält detaillierte Informationen zu den Testverfahren und das Verständnis der experimentellen Situation zu fördern.

In der Furcht Anlage Test verwendet menschlichen Experimentatoren, um die Gefrierverhalten durch arbeitsintensive direkte Beobachtung 26-29 quantifizieren, aber vor kurzem photobeam-Computer Messung (z. B. die &quot;Freeze-Monitor&quot;-System) und Bildanalysesysteme zur automatischen worden messen die Gefrierverhalten 26,30-32. ImageFZ ist ein automatisiertes Bildanalysesystem, die Ergebnisse vergleichbar mit denen durch menschliche Beobachtung erhaltenen erzeugt, wie unten beschrieben. Hier verglichen wir die Ergebnisse der menschlichen Beobachtung mit denen ImageFZ Analyse unter variierenden Parameter: &#39;Rate (Bilder / s) &quot;und&quot; Einfrieren Kriterium (Pixel). &quot; In diesem Experiment fünf männliche C57BL/6J Mäusen (Mittelwert ± SD Körpergewicht (g), 31,4 ± 3,55, Durchschnittskörpergröße ± SD (Pixel), 351,6 ± 62,2) wurden bei 15 bis 27 Wochen alt verwendet. Die menschliche Beobachtung wurde mit einer ereignisAufnahmeProgramm (a Macintosh OS9-Software-Programm) gemacht, ein Schlüssel-Ereignis, das weiter drückend 2 s oder mehr, wenn eine Maus angezeigt einen Anfall von keiner Bewegung wurde als &quot;Einfrieren&quot;. Der Anteil der Gefrierpunkt wurde alle 60 Sekunden in jedem Test berechnet und verwendet für Korrelationsanalysen. Der Prozentsatz des Einfrierens der Beobachter 2 hat (Interobserver Zuverlässigkeit, zum Konditionieren, r = 0,879; kontext Test r = 0,957; für cued Test, r = 0,866, für alle Fälle, r = 0,888) wurden gemittelt, um einen Menschen zu erzeugen, punkten. Korrelationen zwischen den Gefrierpunkt Prozent durch ImageFZ mit jedem Bildrate (dh 1, 2, und 4 fps) gemessen und die durch menschliche Beobachtungen erhalten wurden untersucht. Wie in Fig. 4 dargestellt ist, wurden die Prozentsätze durch Einfrieren ImageFZ (1, 2, und 4 fps) berechnet stark mit dem Mittelwert aus den Messungen der Beobachter 2 erhalten korreliert. Bemerkenswert ist, die Aufnahme von Bildern mit einer höheren Framerate nicht immer die beste Korrelation zu produzieren. Bildanalyse bei 1 fps erzeugt ähnliche Ergebnisse wie die von menschlichen Beobachtern in E erhaltenach Test. Korrelationen zwischen den Gefrierpunkt Prozent durch menschliche Beobachtungen gemessen und mit ImageFZ unter jeder Bedingung der &quot;Einfrieren Kriterium (Pixel)&quot; (dh 20, 30 und 40 Pixel) untersucht. Die Gefrierprozente berechnet ImageFZ zu den &quot;Null Kriterium (Pixel)&quot; 20, 30 und 40 Pixel wurden in allen Fällen hoch mit denen durch menschliche Beobachtung erhalten (Fig. 5) korreliert. Wie in 5D, wenn das Einfrieren Kriterium auf einen niedrigen Wert, der subtilen Bewegung der Maus, werden als &quot;Einfrieren&quot; von menschlichen Betrachtern eingestellt angezeigt wird, würde als &quot;Nicht-Einfrieren&quot; mit ImageFZ werden. Umgekehrt, wenn das Kriterium auf einen hohen Wert gesetzt ist, die Bewegung der Maus, hat als &quot;nicht Einfrieren &#39;von menschlichen Beobachtern, würde als&quot; Einfrieren &quot;mit ImageFZ (5C, 5F und 5I). So, um verlässliche Ergebnisse zu erhalten, die einzelnen Parameter der ImageFZ Programm sollte uns kalibriert werdenten die durch menschliche Beobachtungen in jeder Testumgebung hat Daten. Außerdem verglichen wir die Ergebnisse durch einen menschlichen Beobachter erzeugt, mit einem photobeam-Computer-Messsystem (Freeze-Monitor-System), mit denen unter Verwendung ImageFZ erhalten (siehe Abbildung 6). Der menschliche Beobachter zu der Behandlungsgruppe und die Ergebnisse der Bewertungs ImageFZ geblendet. Für die Parametereinstellungen der Freeze-Monitor-System, haben wir drei Maßnahmen des Prozentsatzes des Einfrierens von einem zuvor validierten System 30. Kurz gesagt, die Anzahl von 10-Sekunden-Intervallen, in denen die Tiere benötigt mehr als 1 oder 2 Sekunden, um die erste neue Strahl des Intervalls (1s und 2s 10s 10s bezeichnet) und der Latenzzeit zwischen dem Beginn eines jeden Intervalls 5 Sekunden überschreiten und die dritte neue Strahlunterbrechung innerhalb dieses Intervalls (Latency3) gemessen. Die Prozentsätze der Intervalle, während der die Maus Einfrieren oder der Prozentsatz der Gesamtzeit required brechen die dritte photobeam berechnet. Die Prozentsätze des Einfrierens in jedem System gemessen sind in Fig. 6 dargestellt. Die Gruppen wurden unter Verwendung von Zweiweg-ANOVA mit wiederholten Messungen, gefolgt von t-Tests (siehe Tabelle 1) verglichen. Die Gefrierprozente gemessen mit ImageFZ (6B) waren ähnlich denen durch menschliche Beobachtung (6A) hat als die Verwendung eines Lichtstrahlbasiertes System (Fig. 6C-D) erhaltenen Daten. Die Prozentsätze Gefrierpunkt gemessen mit der ImageFZ Programm in jedem Test waren hoch mit den durch die menschliche Beobachtung hat korreliert (Anlage, r = 0,947; Kontext Test, r = 0,970; cued Test, r = 0.934), während die Korrelationen zwischen den Gefrierpunkt gemessen Prozent mit der photobeam-Computer-Messsystem (1sec 10sec, 10sec 2s oder Latency3) und die menschlichen Beobachter waren niedriger (Anlage, r = 0,503, 0,593, 0,761 und; Zusammenhang test, r = 0,772, 0,819, 0,912 und) im Vergleich zu den Korrelationen zwischen den Gefrierpunkt Prozentsätze gemessen mit ImageFZ und Menschenbeobachtung (7A und 7B). Zusätzlich Fig. 7 zeigt, dass die Unterschiede zwischen den Gefrierpunkt Prozent durch menschliche Beobachtung gewonnen und mit ImageFZ in jeder Maus wurden die geringsten Unterschiede. Diese Ergebnisse zeigten, dass die Gefrierprozente gemessen mit ImageFZ bei der Messung der Menge an Gefrier waren ähnlich wie jene, die durch menschliche Beobachtung und dass ImageFZ erhalten ist sehr genau. <img alt="Figur 1" fo:content-width="5in" fo:src="/files/ftp_upload/50871/50871fig1highres.jpg" src="/files/ftp_upload/50871/50871fig1.jpg" /> Fig. 1 ist. Die Apparate für die inhaltliche und cued Angst Anlage Test. (A) Eine Acryl quadratischen Raum für die Konditionierung und Kontext-Test, ( <strong&gt; B) Metallgitter auf einem weißen Kunststoff-Boden für Schwarz, Agouti, oder verdünnte braune Mäuse (oben) und elektrifizierbaren schwarzen Metallgitter auf einem schwarzen Kunststoffboden für weiße Mäuse (unten); vergrößerte Bilder der Gitter in die richtige gezeigt Platte, (C) ein weißes Rauschen / Tongenerator und eine Schockgenerator, (D) ein schalldichter Raum, und (E) eine Acryldreieckige Kammer mit einem flachen Boden für die cued Test. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/50871/50871fig1highres.jpg" target="_blank">Klicken Sie hier für eine größere Ansicht.</a> <img alt="Figur 2" fo:content-width="5in" fo:src="/files/ftp_upload/50871/50871fig2highres.jpg" src="/files/ftp_upload/50871/50871fig2.jpg" /> 2. Schematische Darstellung des Protokolls. (A) Überblick über die inhaltliche und cued Angst Testanlage, (B) Anlage, (C) context Test, und (D) cued Test. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/50871/50871fig2highres.jpg" target="_blank">Klicken Sie hier für eine größere Ansicht.</a> <img alt="Fig. 3" fo:content-width="5in" fo:src="/files/ftp_upload/50871/50871fig3highres.jpg" src="/files/ftp_upload/50871/50871fig3.jpg" /> 3. Bildanalyse durch die ImageFZ Softwareprogramm. Für jedes Paar von aufeinanderfolgenden Bildern, wird die Menge des Bereich (Pixel), durch die sich die Maus bewegt wird, indem ImageFZ berechnet. Wenn dieser Bereich unter einem bestimmten Schwellenwert (z. B. 30 Pixel) wird das Verhalten beurteilt werden &quot;Einfrieren&quot;. Wenn die Menge der Fläche entspricht oder den Schwellenwert überschreitet, wird das Verhalten als &quot;nicht-Einfrieren&quot; werden. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/50871/50871fig3highres.jpg" target="_blank">Klicken Sie hier für eine größere Ansicht.</a> <img alt="Fig. 4" fo:content-width="6in" src="/files/ftp_upload/50871/50871fig4highres.jpg" width="500" /> 4. Vergleiche der Gefrierpunkt Prozentsätze von den Bildern an unterschiedlichen Bildraten mit ImageFZ mit denen durch menschliche Beobachtung gemessen berechnet. Die Furchtkonditionierung Tests wurden mit männlichen C57BL/6J Mäusen (n = 5) durchgeführt. Während der Tests erzielte das Einfrieren Verhalten zwei Beobachter. Gleichzeitig wurden Live-Bilder bei 4 fps mit der ImageFZ Programm eingefangen. Die bei 4 fps aufgenommene Dateien wurden nach dem Extrahieren der Frames, um Bilder von 1 fps oder 2 Bilder pro Sekunde erfasst entsprechen verkleinert. Die Parameterwerte der &#39;Rate (Bilder / s) &quot;wurden auf 1, 2 oder 4 fps, und das Einfrieren Prozentangaben jeweils 60-sec bin wurden von Bilddateien mit ImageFZ Offline-Analyse berechnet. Jeder Punkt steht für einen Gefrierpunkt Prozentsatz von jedem 60-sec bin. Pearson-Korrelationskoeffizienten zwischen den von der menschlichen Beobachtung und ImageFZ Analyse erhaltenen Daten wurden berechnet.<a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/50871/50871fig4highres.jpg" target="_blank">Klicken Sie hier für eine größere Ansicht.</a> <img alt="Figur 5" fo:content-width="6in" src="/files/ftp_upload/50871/50871fig5highres.jpg" width="500" /> 5. Die Gefrierprozente aus den Bildern bei unterschiedlichen Gefrierkriteriumswerte mit ImageFZ und die durch menschliche Beobachtungen gemessen wurde, berechnet wurden, verglichen. Die Angstkonditionierung Prüfungen wurden männliche C57BL/6J Mäuse (n = 5) durchgeführt. Während der Tests aufgezeichnet zwei Beobachter die Gefrierverhalten und die Live-Bilder wurden mit dem Programm ImageFZ gefangen genommen. Die Gefrierprozentangaben jeweils 60 Sekunden bin aus den Bilder (1 Bild / s) durch ImageFZ Offline-Analyse berechnet werden, die Einstellung der Parameterwerte &quot;Einfrieren Kriterium (Pixel)&quot; auf 20, 30 oder 40 Pixel. Jeder Punkt steht für einen Gefrierpunkt Prozentsatz von jedem 60-sec bin. Pearson-KorrelationskoeffizientenKoeffizienten zwischen den aus menschlichen Beobachtung und Analyse der ImageFZ erhaltenen Daten wurden in jedem Test berechnet. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/50871/50871fig5highres.jpg" target="_blank">Klicken Sie hier für eine größere Ansicht.</a> <img alt="Fig. 6" fo:content-width="5in" fo:src="/files/ftp_upload/50871/50871fig6highres.jpg" src="/files/ftp_upload/50871/50871fig6.jpg" /> 6. Die Prozentsätze des Gefrierens wurden unter Verwendung automatisierter Systeme und menschliche Beobachtung unkonditionierten und konditionierten in Gruppen von männlichen C57BL/6J Mäuse (n = 5 pro Gruppe) gemessen. (A) Menschenbeobachtung, (B) ImageFZ, (C) Gefrier Monitor-System 1 (1sec 10sec), (D) Gefrier Monitor-System 2 (2 Sek. 10 Sek.) und (E) Gefrier-Monitor-System 3 (Latency3). Gruppenvergleiche wurden mit Zwei-Wege-ANOVA mit wiederholten Messungen, gefolgt von t-Tests (unkooperativnditioned-Gruppe vs Gruppe Anlage, *, P &lt;0,05; †, p &lt;0,01). Die Verwendung ImageFZ waren ähnlich wie die durch menschliche Beobachtung gewonnenen Daten erzielt. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/50871/50871fig6highres.jpg" target="_blank">Klicken Sie hier für eine größere Ansicht.</a> <img alt="Fig. 7" fo:content-width="4.3in" src="/files/ftp_upload/50871/50871fig7highres.jpg" width="420" /> Abbildung 7. Korrelation und Häufigkeitsverteilung der Unterschiede zwischen den Gefrierpunkt Prozentsätze, gemessen mit automatisierten Systemen und Menschenbeobachtung. (AB) Streudiagramme und Pearson-Korrelationskoeffizienten zwischen Einfrieren Prozent durch automatisierte Systeme und menschliche Beobachtung hat gezeigt. Die Prozentsätze Einfrieren, berechnet mit ImageFZ wurden hoch mit denen durch menschliche Beobachtung erhalten korreliert. (CF) Vorkommen von weniger als 10% verrenz zwischen den Gefrierpunkt Prozentsätze von automatisierten Systemen gegen menschliche Beobachtung erhalten wurden, waren am höchsten, wenn die Daten mit Hilfe ImageFZ wurden mit denen durch menschliche Beobachtung analysiert Vergleich analysiert. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/50871/50871fig7highres.jpg" target="_blank">Klicken Sie hier für eine größere Ansicht.</a> <table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0"><tbody><tr><td></td><td> ANOVAs </td><td></td><td></td></tr><tr><td></td><td> Zustand </td><td> Zeit </td><td> Zustand x Zeit </td></tr><tr><td> Tag 1 (Konditionierung) </td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td> Mensch </td><td> F (1,8) = 28.53, p = 0,0007 </td><td> F (7,56) = 20.79, p &lt;0,0001 </td><td> F (7,56) = 16.58, p &lt;0.0001 </td></tr><tr><td> ImageFZ </td><td> F (1,8) = 13,97, p = 0,0057 </td><td> F (7,56) = 21.40, p &lt;0,0001 </td><td> F (7,56) = 11.69, p &lt;0,0001 </td></tr><tr><td> Freeze-Monitor (1sec10sec) </td><td> F (1,8) = 5,16, p = 0,0528 </td><td> F (7,56) = 2,39, p = 0,0329 </td><td> F (7,56) = 0,72, p = 0,6572 </td></tr><tr><td> Freeze-Monitor (2sec10sec) </td><td> F (1,8) = 4,07, p = 0,0782 </td><td> F (7,56) = 3,44, p = 0,0039 </td><td> F (7,56) = 1,52, p = 0,1803 </td></tr><tr><td> Freeze-Monitor (Latency3) </td><td> F (1,8) = 4,44, p = 0,0682 </td><td> F (7,56) = 9,94, p &lt;0,0001 </td><td> F (7,56) = 4,33, p = 0,0007 </td></tr><tr><td> Tag 2 (Kontext) </td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td> Mensch </td><td> F (1,8) = 42.94, p = 0,0002 </td><td> F (4,32) = 1,91, p = 0,1336 </td><td> F (4,32) = 1,48, p = 0,2302 </td></tr><tr><td> ImageFZ </td><td> F (1,8) = 49,61, p = 0,0001 </td><td> F (4,32) = 2,06, p = 0,1087 </td><td> F (4,32) = 0,83, p = 0,5174 </td></tr><tr><td> Freeze-Monitor (1sec10sec) </td><td> F (1,8) = 20,28, p = 0,002 </td><td> F (4,32) = 1,63, p = 0,1918 </td><td> F (4,32) = 0,55, p = 0,6997 </td></tr><tr><td> Freeze-Monitor (2sec10sec) </td><td>F (1,8) = 40.20, p = 0,0002 </td><td> F (4,32) = 2,66, p = 0,0504 </td><td> F (4,32) = 1,20, p = 0,3306 </td></tr><tr><td> Freeze-Monitor (Latency3) </td><td> F (1,8) = 35.30, p = 0,0003 </td><td> F (4,32) = 2,49, p = 0,0626 </td><td> F (4,32) = 1,09, p = 0,3793 </td></tr></tbody></table> Tabelle 1. Vergleiche von Statistiken.

Dieser Artikel stellt ein Protokoll für eine inhaltliche und cued Angst Anlage Test mit einem Videoanalysesystem, Angst zu Lernen und Gedächtnis bei Mäusen zu beurteilen.

Kontextuelle und Cued Angst Anlage Test mit einer Video-Analyse-System bei Mäusen

The contextual and cued fear conditioning test is one of the behavioral tests that assesses the ability of mice to learn and remember an association ...

Der kontextuelle und akute bis ängstliche Konditionierungstest ist ein Verhaltenstest, der häufig verwendet wird, um die Lernfähigkeit von Lawrence zu beurteilen. Erinnern Sie sich an Assoziationen zwischen einer aggressiven Erfahrung und Umwelthinweisen. In diesem Test gibt es jedoch einige methodische Unterschiede zwischen den Arbeitsplätzen, die dazu führen können, dass es schwierig ist, Daten zu vergleichen und Ergebnisse zu duplizieren.Um stabilere und stabilere Daten zu erhalten, ist es wichtig, das Testprotokoll so weit wie möglich zu standardisieren. Darin demonstrieren wir das Protokoll des Feldtests. Der Fear Functioning Test ist ein einfacher, empfindlicher und zuverlässiger Test zur Beurteilung Ihres Gedächtnisses.Dieser Test wird häufig verwendet, um den neurologischen, molekularen Mechanismus und das zugrunde liegende Lernen und Gedächtnis zu verstehen und auch um die kognitive Funktion potenzieller Mausmodelle für psychiatrische Störungen wie Post-Stress-Störung und Schizophrenie zu bewerten. Im Test des Betrachtungsverhaltens, das als Index des Lernens und des Gedächtnisses durch die Isierung menschlicher Beobachter bewertet wird, wurden einige automatisierte Systeme zur automatischen Analyse des Nutzungsverhaltens eingesetzt. Wir entwickeln ein Bildanalysesystem mit Hilfe von Image FG und Image A basiertem Softwareprogramm.Wir vertreiben ein solches Softwareprogramm und es kann unter dieser Adresse kostenlos heruntergeladen werden. Darin stellen wir unser Prüfprotokoll und das automatisierte Analysesystem vor. Zuerst zeigen wir, wie man den App-Betreiber als Abbild des Softwareprogramms schützen kann.Zweitens demonstrieren wir die detaillierten Protokolle des Tests, einschließlich des Konditionierungskontexttests und des Q-Tests für das Gerät, das das System verwendet. Abschließend präsentieren wir ein aktuelles Ergebnis, das darauf hindeutet, dass das N-Bild-FD-System sehr zuverlässige Ergebnisse liefern kann. Fangen wir nun an.Beginnen Sie schnell mit dem Angstkonditionierungstest. Eine Maus wird in einer Kammer mit Neigungsboden platziert. Der OID wird als Auditor dargestellt.Auditor-Warteschlange für 30 Sekunden. Danach wird ein elektrischer Code-Schock bereitgestellt. Diese Paarung einer Auditor-Warteschlange und des Fußschocks wird dreimal gegeben, um die Assoziation zwischen der Auditor-Warteschlange und dem elektrischen Code-Schock zu verbessern.Während des Tests wird das Einfrierverhalten als Index für das damit verbundene Lernen und das unfaire Gedächtnis gemessen. Zweitens wird die Maus nach 24 Stunden in die gleiche Konditionierungskammer gelegt und auf Flohverhalten untersucht. Um die kontextuelle Kontrolle der Angst zu messen, wird die Maus dann in ein anders geformtes G ohne auditive Warteschlange versetzt und danach wird die auditive Warteschlange präsentiert.In diesem Test wird das Einfrierverhalten als Index für das akute Angstgedächtnis verwendet. Während des Tests wird das Mausverhalten über eine Kamera aufgezeichnet, die an einen Computer angeschlossen ist. Das Verhalten wird als einfrieren oder nicht einfrierend bewertet.Mit dem Bildsoftwareprogramm kann das Programm den Prozentsatz der Einfrierzeit und des Entfernungsverkehrs berechnen. Hier wird beispielhaft die Bildanalyse während des Tests demonstriert. Live-Bilder werden mit einer Länge pro Sekunde aufgenommen.Image von erstellt ein binäres Image aus jedem Live-Image für jedes Paar. Bei aufeinanderfolgenden Flammen wird die Fläche, durch die sich die Maus bewegt hat, durch das Bild des Programms berechnet. Wenn der Bereich unter einem bestimmten Schwellenwert liegt, wird das Verhalten als Einfrieren bewertet, was im Allgemeinen als völlige Abwesenheit jeglicher Bewegung außer der Atmung und schwer zu schlagen definiert wird.Einfrieren, das weniger als den definierten Zeitschwellenwert überschreitet, wird nicht als Einfrieren gewertet. Der Schwellenwert muss vorher so eingestellt werden, dass er die beste Übereinstimmung zwischen den Gefrierzeiten, gemessen durch Bild Z, und den Beobachtungen beim Menschen ergibt. Wenn die Flächengröße gleich dem Schwellenwert oder X drei Z ist, wird das Verhalten als nicht einfrierend angesehen.Hier demonstrieren wir unser Testprotokoll an Mäusen mit diesem Videoanalysesystem. In diesem Protokoll wird der Bediener auf einer quadratischen Gitterkammer mit Metallgittern konstruiert und mit einem transparenten Bleibild freigelegt. FD kann dunkle Motive von einem weißen Hintergrund in jedem aufgenommenen Videobild unterscheiden.Aber dieser Prozess ermöglicht es uns, das Einfrierverhalten des Subjekts zu analysieren, dass die Kammer auf einen weißen Boden gestellt werden muss, um das Verhalten von schwarzen, guten oder direkten schwarzen Mäusen zu analysieren. Das Gefrierverhalten von Aluminiummäusen kann auch durch Bild D mit Hilfe von schwarzen Metallgittern analysiert werden. Nach einer schwarzen Regel werden Leuchtdiodenleuchten am Segel über der Apparatur befestigt. Die Rasterregel wird auf 100 Dächern durch die LED-Leuchten beleuchtet.Ein Lautsprecher, der mit dem Tongenerator für weißes Rauschen verbunden ist, ist auf einem Segel über dem Deckel montiert. Ein 55 weißes Rauschen wird als auditive Warteschlange dargestellt. Die Gitter sind mit einem Schockgenerator verbunden, um einen elektrischen Lebensmittelschock abzugeben.Der Schockwindtest wird auf 0,3 Millionen Paar festgelegt, bevor der Test gestartet wird. Die Stromstärke auf dem Gitter sollte durch ein Metall überprüft werden, da der Schocktest durch eine Ansammlung von Fe und Urin bei den Mäusen verringert werden kann, die Testkammer wird in einen schalldichten Webstuhl gestellt, um Außengeräusche zu minimieren. Während des Tests befindet sich die Berufung in einem anderen Klang als dem, in dem die Kegel- und Kontexttests durchgeführt werden.Sie besteht aus einer Kammer, die andere Eigenschaften als die Kegelkammer hat. Bei einem normalen Kontext ist es notwendig, die sensorischen Codes so weit wie möglich zu verändern, damit die Maus den Nobel-Kontext als unabhängig von der Betrachtungskammer wahrnimmt. In diesem Protokoll ist die Vorrichtung eine dreieckige Acri-Kammer mit einer flachen Acri-Regel und der transparenten Leitung.Ein Lautsprecher wird auf einem Segel über dem Blei montiert, um an einer oder drei Warteschlangen zu präsentieren. Diese Warteschlange ist derselbe Hinweis, der den Mäusen beim Schlagen gegeben wurde. Die Beleuchtungsstärke des Bodens ist so eingestellt, dass sie aussieht.Jede Kammer ist ein Würfel mit einer am Segel montierten Ladekabine und einer Gerätekamera zur Überwachung des Mausverhaltens. Vor jedem Test werden die Acrylwände und -böden mit einer Zunge abgewischt, so dass sie in super hohem Bruttowasser stehen, und die Gitter werden mit 70% Ethanol gereinigt. Um eine Verzerrung aufgrund des olfaktorischen Schnitts zu verhindern, werden die Gitter mit Ethan anstelle von Super-Hype-Bruttowasser abgewischt, um zu verhindern, dass die Gitter ihre elektrische Leitfähigkeit aufgrund der letzten zwei bis vier Mäuse nicht ableiten. Ein Hauspaket in einem temperaturkontrollierten Haltungsraum, um die möglichen Erhöhungen des Käfigtransports auf das Verhalten zu reduzieren und die Mäuse an die Versuchsumgebung anzupassen.Der Käfig mit den Mäusen wurde mindestens 30 Minuten vor Beginn jedes Tests in ein schalldichtes Wartezimmer gebracht. Alle Experimente sollten im gleichen Zeitraum durchgeführt werden, um die Verhaltensvariationen zu minimieren, die durch Tests zu unterschiedlichen Zeiten hervorgerufen werden können. Mäuse aus jeder Gruppe sollten in einem Gegengewicht getestet werden, um mögliche Auswirkungen der Versuchszeit zu reduzieren.Unter der Testreihenfolge des Probanden auf die Verhaltensleistung kann Bild D maximal vier Geräte steuern, die gleichzeitig von Mäusen getestet werden, während der Forscher Zeit und digitale Ableitung in die potenziellen Auswirkungen des experimentellen Verfahrens auf das Verhalten von Mäusen spart. Bevor die fortlaufende Sitzung beginnt, führen Sie die Anwendungssoftware A FD aus. Wählen Sie das Steckermenü FD concerning und FD online und stellen Sie die eingestellten Parameterwerte schrittweise wie folgt ein.Schritt eins: Projekt-ID Geben Sie den Ordner an, in dem Sie das Datum der Dateien speichern möchten. Schritt zwei, Typ des Sitzungsnamens. Alle Wörter im Sitzungsfeld sind das experimentelle Datum und der Referenztext zur Datei, in dem die Startzeit und die Dauer des weißen Rauschens und des Lebensmittelschocks in das Referenzfeld geschrieben sind.Der Rücksichtstext auf die Datei muss im Ordner "Rücksichtnahme" im Bild vorbereitet werden, der Ordner zuvor. Schritt drei Parametereinstellungen. Geben Sie die Parameterwerte wie Dauer, Zeit und Einfrierkriterien ein, wie im Film gezeigt.Schritt vier: Betreff-ID. Geben Sie die Betreff-ID ein. Schritt fünf: Die Kameraeinstellungen kontrastieren die Helligkeit und den Kontrast des aufgenommenen Bildes.Schritt sechs, Schwellenwerteinstellungen. Um zunächst die Entfernung von den aufeinanderfolgenden Bildern zu messen, passen Sie den Schwellenwert des Programms an, der so eingestellt ist, dass die Bilder in schwarze Partikel und weißen Hintergrund unterteilt werden. Die Wegstrecke wird zwischen den einzelnen Sätzen mit XY-Koordinaten für den Schwerpunkt mit dem Partikel in den aufeinanderfolgenden Bildern berechnet.An zweiter Stelle steht das Verhalten der aufeinanderfolgenden Bilder, wobei nur der zusätzliche Wert x des Programms angenommen wird, das so eingestellt ist, dass es die Bilder in schwarze Partikel im Hintergrund segmentiert und dann die Flächengröße der nicht überlappenden Bereiche zwischen den Partikeln berechnet, von denen das Paar des aufeinanderfolgenden Bildaufnahmefensters der nicht überlappende Bereich angezeigt wird. Ändern Sie den Express-Mittelwert in den Wert, wenn der Wert des Bereichs unter dem ING-Schreiwert liegen sollte, wenn das Verhalten mit der Maus angezeigt wird. Dieser Wert sollte so angepasst werden, dass die Daten nach Bildermüdung mit dem Squad nach Mensch selbst übereinstimmen.Schritt sieben, auf catch-Feld setzen, gab das Feld an, welche Kammer Sie erfassen möchten, nachdem Sie mit der Rechteck-Schaltfläche in der Toolbox auf rechteckig um den Boden geklickt haben. Kammer im Live-Bildfenster. Wählen Sie als nächstes den Kammerroman aus und klicken Sie auf die Schaltfläche Set, um schließlich auf die Schaltfläche Abschließen zu klicken.Nachdem die Parametereinstellungen definiert wurden, sollte vor dem ersten Test des Datums ein vorbereitender Test mit Übungsmäusen durchgeführt werden, um festzustellen, ob das Bildanalysesystem und welche Geräuschschockgeneratoren mit diesen Problemen arbeiten. Bewegen Sie den Kammkäfig, in dem sich die Übungsmäuse befinden, von der angrenzenden zur wartenden Dunkelheit und setzen Sie jede Maus unmittelbar nach dem Einsetzen der Mäuse in die Kammer in die Konditionierungskammer. Klicken Sie auf den unteren Startrand des Bildes von Z.Die Mäuse dürfen die Kammer 120 Sekunden lang vollständig erkunden. Danach. 30 Sekunden lang wird ein weißes Rauschen als auditive Warteschlange präsentiert und während der letzten zwei Sekunden des Geräusches wird den Mäusen ein Futterschock verabreicht. Dieser Vorgang wird dreimal in der Sitzung wiederholt, um den Zusammenhang zwischen der Warteschlange und dem Lebensmittelschock zu verstärken.Die Masken werden nach der letzten Kopplung 90 Sekunden lang in der Kammer belassen. Die Assoziation zwischen dem Kontext der Kammer und der passiven Erfahrung weiter zu etablieren. Nach 480 Sekunden Elop wird die Maus in den Home-Käfig zurückgebracht und der Käfig wird in das Regal des Warteraums zurückgebracht.Reinigen Sie nach jedem Test die Kammern und das Gitter sorgfältig. Klicken Sie dann auf die Schaltfläche "Nächste Analyse" und wiederholen Sie die Sitzung in den Testmäusen. Etwa 24 Stunden nach dem betreffenden Umzug wird der Käfig für Mäuse in einen schalldichten Warteraum gebracht.Der Haltewebstuhl wird mindestens 30 Minuten vor Beginn jedes Tests durchgeführt. Langes Bild der und stellen Sie die Parameterwerte der Software auf die gleiche Weise wie bei der Konditionierung ein. Legen Sie jedoch die Dauer auf bis zu 300 Sekunden fest, und wählen Sie 35 Texte aus, die für den Kontexttest abgelegt werden sollen.35 Text in Datei ist leer. Platzieren Sie die Maus in der Konditionierungskammer und klicken Sie auf den Startboden. Die Mäuse dürfen die Kammer 300 Sekunden lang vollständig erkunden, ohne dass es zu Reizpräsentationen kommt.Nach 300 Sekunden hetzte li die Mäuse in ihren Heimkäfig und reinigte die Kammern. Klicken Sie dann auf den nächsten Analyseboden und wiederholen Sie den Vorgang im langen Bild der Testmaus von D und stellen Sie die Parameterwerte auf die gleiche Weise wie im fortlaufenden Referenztext ein, der für diesen Test in die Datei aufgenommen werden soll, und stellen Sie die Dauer auf bis zu 360 Sekunden ein. Dies ist ein Referenztext, der für diesen Test eingereicht werden soll.Platzieren Sie jede Maus in die dreieckige Kammer und klicken Sie auf den Startknopf von Bild Z. Die Mäuse sollen alle in den ersten drei Minuten die Kammer erkunden. Weder weißes Rauschen noch Fußschock sind zu sehen. Diese Kammer hat unterschiedliche Eigenschaften, die einen neuen Kontext bieten und sich auf die fortlaufende Kammer beziehen.In dieser Kammer muss man sich in der Regel viel bewegen und kein Verhalten zeigen. Am Ende der ersten drei Minuten wird das weiße Rauschen, das bei Concho präsentiert wird, den Mäusen für drei Minuten zur Verfügung gestellt. Während der Präsentation des Auditors stellt der Auditor die Mäuse in die Warteschlange oder zeigt ein schriftliches Verhalten, nachdem 360 Sekunden ausgebrochen sind, bringt die Mäuse in ihren Heimkäfig zurück und stellt den Käfig wieder in das Regal des Haltungsraums.Reinigen Sie die Kammern nach dem Test sorgfältig. Klicken Sie dann auf den nächsten Analyseboden und wiederholen Sie den Vorgang mit den Testmäusen. Dieses Video zeigt, dass die Passage des Einfrierens, die durch das Bild des Systems analysiert wird, enger mit dem Denken zu verwandt zu sein scheint, das von einem menschlichen Beobachter gemessen wird.Die Beobachtung wurde durch die Details bestätigt, die zeigten, dass der Prozentsatz des Leasings, der in jedem Test durch die Bildphysik gemessen wurde, vom menschlichen Beobachter stark korreliert oder mit dem Denkwert bewertet wurde. Darüber hinaus zeigt diese Abbildung, dass die Unterschiede zwischen den durch menschliche Beobachtungen gemessenen Einfrierprozentsätzen und dem Bild des Systems in diesem Bild am geringsten waren. Diese Ergebnisse deuteten darauf hin, dass der Prozentsatz des Einfrierens, gemessen durch das Bild des Systems, ähnlich war wie bei menschlicher Beobachtung und dass die Genauigkeit bei der Messung der Vernunft anhand des Bildes Z hoch ist. Okay.Wie hat es euch gefallen? Wie Sie den Test sehen, kann die Standard-Verhaltensanalyse problemlos durchgeführt werden. Es gibt einige Tipps und wichtige Punkte für die Verwendung des Images des Systems, also lassen Sie mich ika danach fragen. Okay.Erstens, wie haben Sie das Testverfahren für das Image des Systems empfunden? Ich denke, unser Testverfahren ist sehr einfach und das Image des Systems ist ein nützliches Werkzeug, um Vernunft und Verhalten genau und schnell zu messen. Jeder kann ein Softwareprogramm mit einer vorherigen Schulung problemlos verwenden Infolgedessen kann dieses System verwendet werden, um sein Gedächtnis in vielen Monaten in kurzer Zeit zu bewerten, was uns Zeit und später spart.Ich verstehe. Gibt es dann etwas, auf das wir achten sollten, wenn wir den Test durchführen? Ja, denn der Bediener gibt an, dass es wichtig ist, das schärfste Bild zu erhalten, um das Verhalten genau zu messen, und so sollten Sie die Kameralänge und die Schreibdinge anpassen.Auch in der Programmstudie müssen Sie die Kriterien für sexuelle Werte und Vernunft sorgfältig festlegen, um zu beurteilen, ob das Verhalten als Grund verifiziert werden kann oder nicht. Es ist wichtig, dass das Ergebnis unmittelbar war, das Programm wie mit dem Gedanken an sie durch menschliche Beobachtung, wie im vorliegenden Ergebnis gezeigt. Okay. Wie Sie sehen können, kann dies ein Artikel sein, in dem Sie detaillierte Informationen zum Testverfahren und zur Verwendung des Softwareprogramms bereitstellen können.Wir hoffen, dass dies ein Artikel sein wird. Fördern Sie Ihr Verständnis des Tests und tragen Sie zur Standardisierung des Protokolls bei.

contextual-cued-fear-conditioning-test-using-video-analyzing-system

Research

Forschung

JoVE Journal

Behavior

Verhalten

Im folgenden Experiment beschreiben wir ein Protokoll für die Spurenangstkonditionierung bei Mäusen. Diese Art des assoziativen Speicher eine Spur, die die Zeit und die neutralen Reiz unbedingten Reiz trennt.

Trace Angstkonditionierung bei Mäusen

Hier beschreiben wir die detaillierte Methodik für Stress erhöhter Angst lernen (SEFL), einem präklinischen Modell der posttraumatischen Belastungsstörung bei Ratten und Mäusen Experimente erforderlich. Das Modell nutzt Aspekte der Angst Pawlowsche Konditionierung und als Index der erhöhte Angst bei Nagetieren einfrieren.

Stress verstärkt Angst lernen, ein stabiles Nagetier Modell der posttraumatischen Belastungsstörung

Wir beschreiben ein erweitertes Angstkonditionierungsprotokoll, das bei Ratten Übertraining und Angstinkubation erzeugt. Dieses Protokoll beinhaltet eine einzige Trainingseinheit mit 25 Ton-Schock-Paarungen (d. h. Übertraining) und einen Vergleich der konditionierten Gefrierreaktionen während der Kontext- und Cue-Tests 48 h (kurzfristig) und 6 Wochen (langfristig) nach dem Training.

Angst-Inkubation mit einem erweiterten Angst-Konditionierungsprotokoll für Ratten

Defensive Verhaltensreaktionen sind abhängig von Bedrohungsintensität, Nähe und Kontext der Exposition. Basierend auf diesen Faktoren haben wir ein klassisches Konditionierungsparadigma entwickelt, das klare Übergänge zwischen konditioniertem Einfrieren und Flugverhalten innerhalb einzelner Subjekte hervorruft. Dieses Modell ist entscheidend für das Verständnis der Pathologien, die an Angstzuständen, Panik und posttraumatischen Belastungsstörungen beteiligt sind.

Ein neuartiges Pavlovian Fear Conditioning Paradigma zur Untersuchung von Einfrieren und Flugverhalten

Um das Flugverhalten in einem ängstlichen Kontext zu untersuchen, führen wir ein modifiziertes Angstkonditionierungsprotokoll ein. Dieses Protokoll stellt sicher, dass Mäuse während der Signalpräsentation in der Angstkonditionierung konsistent Flugverhalten zeigen.

Modifizierte Angstkonditionierung zur Induktion von Fluchtverhalten bei Mäusen

Das beobachtende Angstparadigma bewertet das stellvertretende Einfrieren bei Nagetieren als Modell für affektive Empathie. Bei diesem Verfahren werden Beobachter-Nagetiere Artgenossen ausgesetzt, die aversive Fußschocks erhalten, um empathische Erstarrungsreaktionen hervorzurufen. Durch den Einsatz von Angstbeobachtungstests können Forscher die neuronalen Mechanismen untersuchen, die der affektiven Empathie zugrunde liegen.

Beobachtende Angst als Modell affektiver Empathie bei Mäusen

Die Potenzierung des Schreckreflexes wird mittels Elektromyographie des Musculus orbicularis oculi während der Bedrohung durch einen elektrischen Schlag mit niedriger (unsicherer) und hoher (sicherer) Wahrscheinlichkeit gemessen. Dies bietet ein objektives Maß für ausgeprägte negative emotionale Zustände (Angst/Angst) für die Forschung in den Bereichen Psychopathologie, Substanzkonsum/-missbrauch und breite affektive Wissenschaft.

Unter Verwendung der Bedrohungswahrscheinlichkeit Aufgabe zu Angst und Furcht in unsicheren und bestimmte Bedrohungs Beurteilen

Dieser Artikel beschreibt ein neues Protokoll zur quantitativen Messung der sozialen Motivation bei Mäusen unter Verwendung operanter Konditionierung für eine soziale Belohnung. Das Protokoll ist nützlich für die Messung der sozialen Motivation in Mausmodellen für Autismus und andere Störungen des Sozialverhaltens.

Quantifizierung Social Motivation in Mäuse mit Operante Konditionierung

Ultraschall-Vokalisationen (USVs) bei Mäusen unterscheiden sich je nach Alter, Geschlecht, Zustand und genetischem Hintergrund. Unter Verwendung von zwei Ultraschallstrahlern, die gleichzeitig an verschiedenen Orten senden, kann dieser Zwei-Auswahl-Test die Erkennung von Mäusen und die Präferenzreaktionen auf unterschiedliche Merkmale von USVs bewerten.

Bestimmen Ultraschall Vocalization Preferences in Mäuse mit einer Zwei-Choice-Test-Playback

Das hier vorgestellte Präparat zur Konditionierung von Schnurrhaaren bei Mäusen mit festem Kopf stimuliert präzise spezifische Schnurrhaare und ermöglicht es Mäusen, auf einem zylindrischen Laufband zu gehen. Eine Whisker-Stimulation, ein konditionierter Stimulus (CS) gepaart mit einem periorbitalen Schock, einem unkonditionierten Stimulus (US), führt zu einem zuverlässigen assoziativen Lernen auf diesem Gerät.

Whisker-signalisierte Eyeblink Klassische Konditionierung in Head-Fest Mäuse

Lernen Sie ein standardisiertes Protokoll zur Angstkonditionierung bei Mäusen mit einem automatisierten Videoanalysesystem kennen. Diese Methode ermöglicht zuverlässige Messungen des Einfrierverhaltens für Verhaltensforschung.

Kontextuelle und Cued Angst Anlage Test mit einer Video-Analyse-System bei Mäusen

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