Name: Murmelvergraben und Nestlet-Schreddern als Tests für sich wiederholende, zwanghafte Verhaltensweisen bei Mäusen (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2013-12-24T13:45:00.000+00:00
Duration: 6 min 50 s
Description: Lernen Sie die Murmelvergraben- und Nestlet-Schredder-Tests zur Bewertung zwanghafter Verhaltensweisen bei Mäusen. Diese Methoden ermöglichen die Untersuchung repetitiver Verhaltensmuster als Modelle für menschliche psychiatrische Störungen.

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Diese Arbeit wurde durch Zuschüsse des Department of Veterans Affairs und der National Institutes of Health unterstützt.

Alle Protokolle mit Tieren wurden in strikter Übereinstimmung mit den Empfehlungen im Leitfaden für die Pflege und Verwendung von Labortieren der National Institutes of Health durchgeführt. Die Protokolle wurden vom Institutional Care and Use Committee der Wayne State University genehmigt (Genehmigungsnummer A3310-01).
1. Vorbereitung von Käfigen für das Marmorvergraben und Nestlet-Zerkleinern
<ol>
	<li>Verwenden Sie für den Marmorvergrabungstest Standard-Rattenkäfige aus Polycarbonat (26 cm x 48 cm x 20 cm) mit angebrachten Filterabdeckungen. Geben Sie frisches, unparfümiertes Einstreumaterial bis zu einer Tiefe von 5 cm in jeden Käfig und ebnen Sie die Einstreufläche, indem Sie einen weiteren Käfig der gleichen Größe auf die Oberfläche der Einstreu einsetzen. Dies hat den zusätzlichen Vorteil, dass eine Schablone aus parallelen Linien auf die Beetoberfläche gedruckt werden kann, die für die Platzierung von Marmor verwendet werden kann.</li>
	<li>Legen Sie handelsübliche Spielzeugmurmeln aus Glas (verschiedene Stile und Farben, 15 mm Durchmesser, 5,2 g Gewicht) in 5 Reihen à 4 Murmeln vorsichtig auf die Oberfläche der Einstreu (siehe Abbildung 1A). Waschen Sie Murmeln in einem milden Laborwaschmittel, spülen Sie sie gründlich mit destilliertem und entionisiertem Wasser ab und trocknen Sie sie vor jedem Gebrauch.</li>
	<li>Verwenden Sie für den Nestlet-Zerkleinerungstest Standard-Rattenkäfige aus Polycarbonat (19 cm x 29 cm x 13 cm) mit angebrachten Filterabdeckungen. Geben Sie frisches, unparfümiertes Einstreumaterial bis zu einer Tiefe von 0,5 cm in jeden Käfig und verpacken Sie die Einstreu, indem Sie einen weiteren Käfig der gleichen Größe auf die Oberfläche der Einstreu legen.</li>
	<li>Wiegen Sie handelsübliche Nestlets aus Baumwollfasern (5 cm x 5 cm, 5 mm dick, jeweils ~2,5 g) auf einer Analysenwaage und legen Sie ein Nestlet auf die Einstreu in jedem Testkäfig (siehe Abbildung 3A).</li>
	<li>Stellen Sie Stoppuhren oder Timer für die Zeitmessung der Sitzungslängen ein (30 Minuten für jeden Test).</li>
</ol>
2. Umgang mit Tieren vor der Prüfung
<ol>
	<li>Beherbergen Sie Mäuse einzeln oder in Gruppen in einem Raum mit einem 12-stündigen Hell-Dunkel-Zyklus. Versorgen Sie alle Mäuse nach Belieben mit Futter und Wasser. Gehen Sie drei bis fünf Tage lang vorsichtig mit Mäusen um, bevor Sie den Test durchführen. Verwenden Sie für beide Tests Mäuse beiderlei Geschlechts.</li>
	<li>Führen Sie Verhaltenstests zwischen 9:00 und 16:00 Uhr durch und transportieren Sie alle Heimkäfige mit Mäusen 60 Minuten vor Testbeginn in den Testraum.</li>
</ol>
3. Test zum Vergraben von Marmor
<ol>
	<li>Platzieren Sie eine Maus in einer Ecke des Käfigs, in der sich Murmeln befinden, und achten Sie darauf, die Maus so weit wie möglich von Murmeln entfernt auf der Einstreu zu platzieren, und platzieren Sie die obere Abdeckung des Käfigs auf dem Käfig. Halten Sie während des Tests Futter und Wasser zurück. Lassen Sie die Maus 30 Minuten lang ungestört im Käfig verbleiben.</li>
	<li>Entfernen Sie die Maus und bringen Sie sie nach Abschluss des Tests in ihren Heimatkäfig zurück, wobei Sie äußerst darauf achten sollten, dass sich die Murmeln beim Entfernen des Objekts aus dem Käfig nicht bewegen oder entfernen.</li>
	<li>Aufgabenbewerter (2-3) sind blind für die Behandlungsbedingungen oder den Genotyp der getesteten Maus, um die Anzahl der vergrabenen Murmeln zu zählen. Bewerten Sie eine Murmel als vergraben, wenn zwei Drittel ihrer Oberfläche von Einstreu bedeckt sind. Durchschnittliche Punktzahl für die Anzahl der Murmeln, die für jede Maus vergraben wurden.</li>
	<li>Holen Sie alle 20 Murmeln aus der Einstreu. Entsorgen Sie Bettwäsche.</li>
</ol>
4. Nestlet-Schredder-Test
<ol>
	<li>Setzen Sie eine Maus in einen Käfig mit einem einzelnen, vorgewogenen Nestlet und setzen Sie die obere Filterabdeckung auf den Käfig. Halten Sie während des Tests Futter und Wasser zurück. Lassen Sie die Maus 30 min lang ungestört im Käfig mit dem Nestchen.</li>
	<li>Entfernen Sie die Maus und kehren Sie nach Abschluss des Tests in ihren Heimatkäfig zurück. Entfernen Sie das restliche intakte Nestlet-Material mit einer Pinzette aus dem Käfig und lassen Sie O/N trocknen.</li>
	<li>Wiegen Sie das verbleibende ungeschredderte Nestlet und dividieren Sie dieses Gewicht durch das Ausgangsgewicht, um den Prozentsatz des zerkleinerten Nestlets zu berechnen. Falls gewünscht, bewerten Sie die Form des Nestes, die von der Versuchsmaus erzeugt wurde, mit einer definitiven 5-Punkte-Nestbewertungsskala17, aber beachten Sie, dass diese Skala im Allgemeinen für die Bewertung des Nestbaus und nicht für obsessives Schreddern gedacht ist.</li>
	<li>Entsorgen Sie das restliche zerkleinerte Nestlet-Material und die Einstreu.</li>
</ol>

<ol><li>Chamberlain, S. R., Blackwell, A. D., Fineberg, N. A., Robbins, T. W., Sahakian, B. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+neuropsychology+of+obsessive+compulsive+disorder%3A+the+importance+of+failures+in+cognitive+and+behavioural+inhibition+as+candidate+endophenotypic+markers%5BTitle%5D)+AND+%22Neurosci.+Biobehav.+Rev%22%5BJournal%5D)">The neuropsychology of obsessive compulsive disorder: the importance of failures in cognitive and behavioural inhibition as candidate endophenotypic markers.</a> Neurosci. Biobehav. Rev. 29, 399-419 (2005).</li>
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<li>Angoa-Perez, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Genetic+depletion+of+brain+5HT+reveals+a+common+molecular+pathway+mediating+compulsivity+and+impulsivity%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Neurochem%22%5BJournal%5D)">Genetic depletion of brain 5HT reveals a common molecular pathway mediating compulsivity and impulsivity.</a> J. Neurochem. 121, 974-984 (2012).</li>
<li>Kane, M. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mice+genetically+depleted+of+brain+serotonin+display+social+impairments%2C+communication+deficits+and+repetitive+behaviors%3A+possible+relevance+to+autism%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Mice genetically depleted of brain serotonin display social impairments, communication deficits and repetitive behaviors: possible relevance to autism.</a> PLoS One. 7, (2012).</li>
<li>Deacon, R. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Assessing+nest+building+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Nat.+Protoc%22%5BJournal%5D)">Assessing nest building in mice.</a> Nat. Protoc. 1, 1117-1119 (2006).</li>
<li>Thomas, D. M., Angoa Perez,, Francescutti-Verbeem, D. M., Shah, M. M., Kuhn, D. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+role+of+endogenous+serotonin+in+methamphetamine-induced+neurotoxicity+to+dopamine+nerve+endings+of+the+striatum%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Neurochem%22%5BJournal%5D)">The role of endogenous serotonin in methamphetamine-induced neurotoxicity to dopamine nerve endings of the striatum.</a> J. Neurochem. 115, 595-605 (2010).</li>
<li>Gyertyan, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Analysis+of+the+marble+burying+response%3A+marbles+serve+to+measure+digging+rather+than+evoke+burying%5BTitle%5D)+AND+%22Behav.+Pharmacol%22%5BJournal%5D)">Analysis of the marble burying response: marbles serve to measure digging rather than evoke burying.</a> Behav. Pharmacol. 6, 24-31 (1995).</li>
<li>Thomas, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Marble+burying+reflects+a+repetitive+and+perseverative+behavior+more+than+novelty-induced+anxiety%5BTitle%5D)+AND+%22Psychopharmacology%22%5BJournal%5D)">Marble burying reflects a repetitive and perseverative behavior more than novelty-induced anxiety.</a> Psychopharmacology. 204, 361-373 (2009).</li>
<li>Hayashi, E., Kuratani, K., Kinoshita, M., Hara, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pharmacologically+distinctive+behaviors+other+than+burying+marbles+during+the+marble+burying+test+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Pharmacology%22%5BJournal%5D)">Pharmacologically distinctive behaviors other than burying marbles during the marble burying test in mice.</a> Pharmacology. 86, 293-296 (2010).</li>
</ol>

Die Autoren erklären, dass sie keine konkurrierenden finanziellen Interessen haben.

Die Tests zum Vergraben von Marmor und zum Zerkleinern von Nestchen sind gute Beispiele für Verhaltensmethoden zur Untersuchung von sich wiederholenden und zwanghaften Verhaltensweisen bei Mäusen. Beide Tests zeigen eine ausgezeichnete Gesichts-, Konstrukt- und prädiktive Validität für die menschlichen Störungen, die sie modellieren6-11. Diese sich wiederholenden Verhaltensweisen sind bei Nagetieren natürlich und spontan und ihre Häufigkeit und Intensität können nach genetischen Veränderungen, wie derzeit geze...

Mausmodelle des menschlichen Verhaltens und insbesondere psychiatrischer Störungen stellen wichtige und wesentliche experimentelle Ansätze zur Erforschung von Krankheitsmechanismen und zur Entwicklung neuer Therapien dar. Viele psychiatrische Erkrankungen sind bei Tieren nach wie vor extrem schwer zu modellieren (z.B. Schizophrenie). Tiere zeigen jedoch eine große Anzahl natürlicher und charakteristischer Verhaltensweisen, die ohne weiteres mit ähnlichen Verhaltensweisen beim Menschen in Verbindung gebracht werden können. Bewegung oder Fortbewegungsaktivität ist ein Beispiel für ein Verhalten bei Tieren, das eine Entsprechung beim Menschen hat. Nagetiere zeigen oft eine Vielzahl von sich wiederholenden Verhaltensweisen, Beispiele sind Fellpflege oder Graben. Eine psychiatrische Erkrankung, bei der wiederkehrende und unerwünschte Verhaltensweisen beim Menschen auftreten, ist die Zwangsstörung (OCD). Zu den Verhaltensweisen, die für Zwangsstörungen sehr charakteristisch sind, gehören Überprüfen, Zählen und übermäßiges Waschen oder Pflegen. Zwangsstörungen sind eine weit verbreitete (betrifft 1-3% der Bevölkerung) und schwächende psychiatrische Störung1. Eine große Anzahl pharmakologischer und verhaltensbezogener Ansätze wurde zur Behandlung von Zwangsstörungen eingesetzt. Viele von ihnen bieten keine langfristige Linderung, und am Ende eines Behandlungsschemas kommt es häufig zu einem Rückfall2,3. Eine weitere psychiatrische Erkrankung, bei der es sich um sich wiederholende Verhaltensweisen geht, ist die Autismus-Spektrum-Störung (ASS). ASDs zeichnen sich durch Defizite in der Kommunikation und sozialen Interaktion sowie sich wiederholende, stereotype Verhaltensweisen aus, zu denen Drehungen, Schaukeln, Fingerschnippen oder -flattern und komplexe Körperbewegungen gehören. Die Centers for Disease Control and Prevention haben geschätzt, dass bei etwa 1 von 88 Kindern ASDs diagnostiziert wird. Die Behandlungsmöglichkeiten für diese Störung sind in Anzahl und Wirksamkeit äußerst begrenzt4,5. Die Intensität und Häufigkeit des Auftretens von sich wiederholenden Verhaltensweisen bei OCD und ASD kann groß genug werden, um die meisten anderen normalen Verhaltensweisen und sozialen Interaktionen bei Patienten mit diesen Erkrankungen zu verdrängen. Angesichts der Prävalenz und des schwächenden Charakters psychiatrischer Erkrankungen, die durch sich wiederholende Verhaltensweisen gekennzeichnet sind, und angesichts des schlechten Verständnisses ihrer Ursachen und begrenzter Behandlungsmöglichkeiten gewinnt die Verwendung von Tiermodellen zur Untersuchung dieser Verhaltensweisen an zusätzliche Dringlichkeit.
Eine große Anzahl von Tiermodellen für sich wiederholende Verhaltensweisen, wie sie bei OCD und ASDs beobachtet werden, wurden in den letzten 30 Jahren entwickelt und zahlreiche ausgezeichnete Rezensionen, die diese Modelle beschreiben, wurden veröffentlicht6-14. Im Allgemeinen können diese etablierten Modelle als genetische, pharmakologische, neuroentwicklungs- und verhaltensbezogene Modelle klassifiziert werden und zeigen meist eine gute Gesichts-, Konstrukt- und prädiktive Validität6,7. Wir haben zwei Verhaltensmodelle - Marmorvergraben und Nestlet-Zerkleinern - verwendet, um sich wiederholende Verhaltensweisen bei Mäusen zu bewerten, die genetisch an Serotonin erschöpft waren15,16. Diese Methoden haben zahlreiche Vorteile, nicht zuletzt ihre einfache Anwendung, die Genauigkeit, mit der die Verhaltensweisen bewertet werden können, das spontane Auftreten dieser Verhaltensweisen bei Nagetieren und ihre Verwendung im Hochdurchsatz-Screening von genetisch veränderten Mäusen auf abnormale Verhaltensphänotypen. Darüber hinaus wird jeder Test in standardmäßigen und bekannten Nagetierhaltungskäfigen durchgeführt, die die gleiche Einstreu enthalten, die in den Heimkäfigen der Probanden verwendet wird, wodurch die Notwendigkeit der Gewöhnung von Mäusen an neuartige Testkammern minimiert wird. Futter- und/oder Wassereinschränkung sind nicht erforderlich, um Mäuse zur Leistung zu "motivieren". Der Marmorvergraben-Test nutzt die Neigung von Mäusen, in natürlichen Umgebungen (z. B. Höhlen, Fluchttunneln) und in Standard-Käfigeinstreu zu graben, und der Nestlet-Shred-Test macht sich die Tatsache zunutze, dass Mäuse von Natur aus nistende Tiere sind, die Nester bauen, um sich und ihre Nachkommen vor Umwelteinflüssen zu schützen (z.Schall, Licht, Temperatur). Unter Verwendung von nicht spezialisierten und allgemein verfügbaren Nagetierhaltungsmaterialien sind die Aufgaben zum Vergraben von Marmor und zum Zerkleinern von Nestchen einfache und aussagekräftige Verhaltenstests für sich wiederholende, zwanghafte Verhaltensweisen bei Mäusen.

<table><tbody><tr><td>Glasspielzeug Murmeln örtlicher</td><td>Spielwarenladen</td><td>N/A</td><td>verschiedene Stile, Farben, klar und undurchsichtig</td></tr><tr><td>Nestlets</td><td>Ancare</td><td>NES3600</td><td></td></tr><tr><td>N10 Serie Mauskäfig</td><td>Ancare</td><td>N10HT</td><td>Standard Nagetierkäfig mit Draht oben</td></tr><tr><td>R20 Serie Rattenkäfig</td><td>Ancare</td><td>R20</td><td>Standard Nagetierkäfig mit Draht</td></tr><tr><td>Top Bed-o'Cobs</td><td>The Andersons</td><td>8B</td><td>Standard-Einstreu für Nagetiere, 1/8 Zoll</td></tr></tbody></table>

murmelvergraben und nestlet-schreddern als tests für sich wiederholende, zwanghafte verhaltensweisen bei mäusen

Marble Burying and Nestlet Shredding as Tests of Repetitive, Compulsive-like Behaviors in Mice

Zwangsstörungen (OCD) und Autismus-Spektrum-Störungen (ASD) sind schwerwiegende und schwächende psychiatrische Erkrankungen und stellen jeweils ein erhebliches Problem für die öffentliche Gesundheit dar, insbesondere bei Kindern. Beide Zustände werden durch die wiederholte Äußerung bedeutungsloser Verhaltensweisen hervorgehoben. Menschen mit Zwangsstörungen zeigen oft Überprüfungen, häufiges Händewaschen und Zählen. Kinder mit ASDs klopfen auch wiederholt, flattern mit dem Arm oder der Hand und schaukeln. Diese Verhaltensweisen können in Intensität und Häufigkeit des Ausdrucks stark variieren. Intensivere Formen sich wiederholender Verhaltensweisen können sogar zu Verletzungen führen (z. B. übermäßige Körperpflege, Händewaschen und Selbststimulation). Diese Verhaltensweisen sind daher sehr störend und erschweren den normalen gesellschaftlichen Diskurs. Die Behandlungsmöglichkeiten für sich wiederholende Verhaltensweisen bei Zwangsstörungen und ASDs sind etwas begrenzt und es besteht ein großes Interesse daran, wirksamere Therapien für jede Erkrankung zu entwickeln. In den letzten drei Jahrzehnten wurden zahlreiche Tiermodelle zur Bewertung zwanghafter Verhaltensweisen entwickelt. Die vielleicht größten Tiermodelle mit der größten Aussagekraft und Benutzerfreundlichkeit sind der Marmorvergrabungstest und der Nestlet-Zerkleinerungstest. Beide Tests machen sich die Tatsache zunutze, dass die Zielverhaltensweisen bei Mäusen spontan auftreten. Beim Marmorvergrabungstest werden 20 Murmeln auf der Oberfläche der sauberen Einstreu angeordnet. Die Anzahl der Murmeln, die in einer 30-minütigen Sitzung vergraben werden, wird von Ermittlern bewertet, die für die Behandlung oder den Status der Probanden blind sind. Beim Nestlet-Zerkleinerungstest wird ein Nestlet aus zerkleinerter Baumwollfaser vorgewogen und auf die Käfigeinstreu gelegt, und es wird die Menge des Nestlets bestimmt, die nach einer 30-minütigen Testsitzung noch intakt ist. Zurzeit beschreiben wir Protokolle für das Vergraben von Marmor und das Zerkleinern von Nestchen und zeigen Filmdokumentationen. Beide Tests lassen sich leicht und genau bewerten und reagieren empfindlich auf kleine Veränderungen in der Ausprägung zwanghafter Verhaltensweisen, die aus genetischen Manipulationen, Krankheiten oder Kopfverletzungen resultieren.

Ein primärer Vorteil der Marmor-vergraben- und Nestmaterial-zerfetzen-Tests liegt darin, dass beide auf natürlichen und spontanen Verhaltensweisen von Mäusen basieren, die nach Abschluss des Tests quantifiziert werden können, wodurch ein einzelner Forscher das Experiment aufbauen und bis zum Ende der Sitzungen außerhalb des Versuchsraums bleiben kann. Eine entscheidende Komponente des Marmor-vergraben-Tests ist das sorgfältige Herausnehmen des Versuchstieres aus dem Käfig nach der Testdurchführung. Mäuse versuchen typisc...

Krankheiten, Kopfverletzungen, genetische Veränderungen und die Behandlung von Mäusen mit Medikamenten können tiefgreifende Auswirkungen auf das Verhalten haben. Unter Verwendung gut charakterisierter und validierter Ansätze wie Marmorvergraben und Nestlet-Schreddern können zwangsähnliche Verhaltensweisen bei Mäusen als Modelle für menschliche Zwangsstörungen und Autismus-Spektrum-Störungen genau dokumentiert werden.

Murmelvergraben und Nestlet-Schreddern als Tests für sich wiederholende, zwanghafte Verhaltensweisen bei Mäusen

Obsessive-compulsive disorder (OCD) and autism spectrum disorders (ASD) are serious and debilitating psychiatric conditions and each constitutes a ...

Das übergeordnete Ziel dieses Verfahrens besteht darin, die Einfachheit des Murmelvergrabens und des Nistmaterial-Zerfetzens als zuverlässige Paradigmen zur Beurteilung und Demonstration repetitiver und zwanghafter Verhaltensweisen aufzuzeigen. Bei Nagetieren wird für den Murmelvergrab-Test ein Käfig vorbereitet, in dem 20 Murmeln gleichmäßig auf der Einstreu verteilt werden. Anschließend wird die Maus in den Käfig eingeführt und für 30 Minuten ungestört mit den Murmeln belassen.Nach dieser Zeit wird die Maus entfernt, und die vergrabenen Murmeln werden für den Nestle-Test gezählt. Ein intaktes Nestle wird in den Käfig gestellt, bevor die Maus hineingelassen wird. Nach 30 Minuten wird die Maus entfernt, und das Nestle darf über Nacht trocknen, bevor der Prozentsatz des zerkauten Nestle berechnet wird.Schließlich können Unterschiede im Verhalten bezüglich Murmeln, Vergraben und Zerkleinern von Nestmaterial zwischen Knockout- und Wildtyp-Mäusen gezeigt werden. Die Verfahren werden Denise Briggs, eine Doktorandin, Mariana Ango Perez, eine Postdoktorandin, und Dean of Francescutti, eine wissenschaftliche Mitarbeiterin aus meinem Labor, demonstrieren. Alle Tiere werden bei einem 12-Stunden-Licht-Dunkel-Wechselzyklus mit freiem Zugang zu Futter und Wasser gehalten.Für optimale Ergebnisse die Mäuse vor dem Test einmal täglich über einen Zeitraum von drei bis fünf Tagen vorsichtig anfassen. Wenn die Tiere bereit zum Testen sind, die Käfige 60 Minuten vor Beginn des ersten Tests in den Versuchsraum bringen.Für den Marmorkugel-Test verwenden Sie Standard-Rattenkäfige aus Polycarbonat mit passenden Filterdeckeln. Geben Sie frisches, geruchsneutrales Mausstreu in jeden Käfig bis zu einer Tiefe von fünf Zentimetern und ebnen Sie die Oberfläche des Streus durch Einfügen eines weiteren Käfigs gleicher Größe an. Dies hat den zusätzlichen Vorteil, dass ein Muster paralleler Linien auf der Streuoberfläche abgebildet wird. Waschen.Standardisierte Glas-Kugeln werden vor jedem Gebrauch gründlich mit einem milden Laborreinigungsmittel gespült, mit ionisiertem Wasser nachgespült und getrocknet. Sobald alles vorbereitet ist, drücken Sie die Kugeln vorsichtig in die Oberfläche der Einstreu. Bereiten Sie für die Zeitmessung der Sitzungen fünf Reihen mit jeweils vier Kugeln sowie Stoppuhren oder Timer vor.Um den Test zu beginnen, richten Sie die Maus in die Ecke des Käfigs aus, die sich möglichst weit von den Murmeln entfernt befindet. Setzen Sie den Filterdeckel auf den Käfig und lassen Sie die Maus 30 Minuten lang ungestört mit den Murmeln. Am Ende der Testzeit nehmen Sie die Maus heraus und bringen sie in ihren Heimkäfig zurück.Es ist äußerst sorgfältig darauf zu achten, die Kugeln nicht zu bewegen oder zu verrücken, während das Versuchstier aus dem Käfig entfernt wird. Zwei bis drei Forscher, die über die Behandlungsbedingungen im Unklaren sind, sollten anschließend die Anzahl der vergrabenen Kugeln bewerten. Eine Kugel gilt als vergraben.Wenn zwei Drittel der Oberfläche mit Einstreu bedeckt sind, mitteln Sie die Werte für die Anzahl der von jeder Maus vergrabenen Murmeln. Zuletzt entnehmen Sie alle 20 Murmeln und entsorgen die Einstreu. Verwenden Sie handelsübliche Polycarbonat-Mauskäfige mit passenden Filterdeckeln.Für den Nestle-Zerreißtest frisches, geruchloses Mausstreu in jede Box bis zu einer Tiefe von 0,5 Zentimetern einfüllen und das Streu wie zuvor gezeigt andrücken. Anschließend kommerziell erhältliche Nistmaterialien aus Baumwollfasern abwiegen und ein Nestle oben auf das Streu legen. In jeder Testbox Stoppuhren oder Timer zur Zeiterfassung der Sitzung bereitstellen.Wenn bereit, eine Maus in eine Ecke des Käfigs setzen, sodass sie zur Wand zeigt. Den Filterschutz auf den Käfig setzen und die Maus 30 Minuten lang ungestört mit dem Nestgefüge belassen. Danach die Maus entfernen und in ihren Heimkäfig zurückbringen.Entfernen Sie das verbleibende intakte Nestmaterial aus dem Käfig und lassen Sie es über Nacht trocknen. Am folgenden Tag wiegen Sie das unzerschnittene Nestmaterial und teilen dieses Gewicht durch das Anfangsgewicht, um den Prozentsatz der Nestmaterial-Zerkleinerung zu berechnen.Entsorgen Sie abschließend das verbliebene zerkleinerte Nestmaterial und die Einstreu. Hier werden repräsentative Käfige vor und nach dem Marmor-vergraben-Test gezeigt. Bei der Untersuchung von Wildtyp-Mäusen wurden nur wenige Murmeln vergraben oder von ihrer ursprünglichen Position wegbewegt.Dagegen grub die TPH-Zwei-Knockout-Maus 17 der 20 Murmeln ein. Die verbliebenen nicht eingegrabenen Murmeln sind mit Pfeilen markiert. Diese Seitenansicht zeigt Veränderungen an der Oberfläche des Einstreus.Nach der Prüfung vergleichen Sie die relativ ungestörte Oberfläche aus den Käfigen von Wildtyp-Tieren mit der unebenen Oberfläche, die große Mulden und Erhebungen von Knockout-Tieren aufweist. Die typische Leistung im Marmorbegrabungs-Test ist hier zusammengefasst. TPH-Zwei-Knockout-Mäuse gruben signifikant mehr Murmeln im Vergleich zu Wildtyp-Mäusen ein.Diese Fotografien zeigen repräsentative Nestlets nach dem Zerfetzen. Hier zeigen Nester von Wildtyp-Mäusen geringe Mengen an Zerfetzen im Vergleich zu den Nestlets aus den Käfigen von TPH-zwei-Knockout-Mäusen. Dieses Diagramm zeigt die typische Leistung von Wildtyp- und TPH-zwei-Knockout-Mäusen im Nestlé-Zerfetztest.Die TPH-Zwei-Knockout-Mäuse zerkleinern signifikant mehr Nestle-Material als Wildtyp-Mäuse. Wenn man diese Techniken einmal beherrscht, können sie in zwei Stunden durchgeführt werden, sofern sie ordnungsgemäß ausgeführt werden. Bei Durchführung dieses Verfahrens ist es wichtig, konsistent bei den Kriterien für die Definition einer vergrabenen Murmel zu bleiben und zerkleinerte Stücke von Nestle vom trockenen und unzerkleinerten Rest zu entfernen.Mit dieser Methode können Mäuse mit Wirkstoffen injiziert werden, die zur Behandlung von Zwangsstörungen beim Menschen, wie beispielsweise SSRI, eingesetzt werden, um festzustellen, ob diese Medikamente zwanghafte Verhaltensweisen bei Mäusen verringern.

marble-burying-nestlet-shredding-as-tests-repetitive-compulsive-like

Research

Forschung

JoVE Journal

Behavior

Verhalten

Marmorbegraben und Nestlet-Zerschneiden als Tests für repetitives, zwanghaftes Verhalten bei Mäusen

Burrowing, Nist-und Horten sind Spezies-typischen Aktivitäten, dass Mäuse ohne weiteres im Labor durchzuführen. Dieser Artikel beschreibt, wie sie einfach und kostengünstig beurteilt werden kann. Diese Protokolle sind sehr empfindlich gegen Maus-Stamm, Hirnläsionen und Krankheiten. Darüber hinaus bilden sie "Environmental Enrichment" für die Mäuse und verkörpern die "Refinement" Aspekt der "3 R" 18.

Die Beurteilung Burrowing, Nest Bau und Horten in Mäuse

Inchworming ist ein stark repetitiven synchrone Bewegung durch Grab BTBR T + ITPR 3TF / J (BTBR) Mäusen angezeigt, wenn in einem Test Käfig mit genügend Bettwäsche Sägemehl gelegt. Das Verfahren ist eine Modifikation des Jugendlichen soziale Interaktion Protokoll und wird hier verwendet, um sich wiederholende Motor relevant Autismus-Spektrum-Störung Stereotypien zu beurteilen.

Inchworming: A Novel Motor Stereotypie in der BTBR<em&gt; T<sup&gt; +</sup&gt; Itpr3<sup&gt; Tf</sup</em&gt; / J-Maus-Modell von Autismus

Eingeschränkte, repetitive Verhaltensweisen (RRBs) höherer Ordnung stören das Leben der betroffenen Personen.  Diese Verhaltensweisen sind bei Nagetieren nur schwer zu modellieren, was die biomedizinische Grundlagenforschung zu möglichen Behandlungen oder Interventionen für RRBs erschwert.  Hier beschreiben wir die Erkundung neuartiger Objekte als potenziellen Assay für RRBs höherer Ordnung in Mäusen.

Novel Object Exploration als Potential Assay für höherer Ordnung Repetitive Verhalten bei Mäusen

Hier beschrieben handelt es sich um einen inszenierten, Verhaltens-Screening-Ansatz, der verwendet werden kann, um Verbindungen zu sehen, die in vivo Wirksamkeit auf kognitiven und funktionellen motorischen Verhaltensweisen in transgenen Mausmodellen von β-Amyloidose und Tauopathie zeigen. Diese Methoden sind optimiert, um Verbindungen für die Aktivität in kurzfristigen und Arbeitsspeicheraufgaben zu screenen.

Assessment of Spontane Alternation, neuartige Objekterkennung und Gliedmaßenverkürzung in transgenen Mausmodellen der Amyloid-β- und Tau-Neuropathologie

Dieses Protokoll misst räumliche lernen und Gedächtnis mit dem Barnes Labyrinth. Eine neuartige Damsel in Distress-Paradigma wird verwendet, um lokomotorische Aktivität und prosoziales Verhalten bei Mäusen zu bewerten.

Analyse der räumlichen Lernens und prosoziales Verhalten bei Mäusen mit dem Barnes Labyrinth und Damsel in Distress Paradigmen

Eine umfassende Verhaltens-Testbatterie der Motorik, Stimmung – einschließlich sozialer Interaktion, Depression und Angst – und Kognition ist für die wiederholte Bewertung der Neurodegeneration im Zusammenhang mit Veränderungen im Verhalten von Mäusen.

Eine Verhaltenstherapie Testbatterie für die wiederholte Beurteilung der Motorik, Stimmung und Kognition bei Mäusen

Hier stellen wir ein Protokoll zur Quantifizierung des Nestbauverhaltens bei Mäusen vor, das bekanntermaßen bei mehreren neurologischen Erkrankungen und Erkrankungen beeinträchtigt ist. Dieses Protokoll untersucht den Nutzen von vier Materialien und bietet die Möglichkeit, die Rater-Vereinbarung bei der Bewertung zu quantifizieren, wodurch die Gültigkeit und Zuverlässigkeit des Assays verbessert wird.

Nest building Behavior als Frühindikator für Verhaltensdefizite bei Mäusen

Dieses Manuskript stellt eine Reihe von hochgradig reproduzierbaren Verhaltenstests vor, um ein Mausmodell mit Angelman-Syndrom zu validieren.

Verhaltenscharakterisierung eines Angelman-Syndrom-Mausmodells

Nagetiermodelle sind wertvolle Werkzeuge zur Untersuchung von Kernverhaltensweisen im Zusammenhang mit der Autismus-Spektrum-Störung (ASS). In diesem Artikel erläutern wir zwei Verhaltenstests zur Modellierung der Kernmerkmale von ASD bei Mäusen: Self-Grooming, der sich wiederholendes Verhalten bewertet, und der Drei-Kammer-Test für soziale Interaktion, der soziale Beeinträchtigungen dokumentiert.

Strategien zur Beurteilung autistischer Verhaltensweisen bei Mäusen

Bei Mäusen wurde ein Binge-Eating-Modell mit intermittierendem Zugang zu M&amp;M's (einem sehr schmackhaften Lebensmittel aus Fett und Zucker) etabliert. Mäuse mit intermittierendem Zugang zu diesem fett- und zuckerreichen Futter zeigten stressähnliche Verhaltensweisen, eine erhöhte Kalorienaufnahme und eine Präferenz für dieses Futter gegenüber Standardfutter im Vergleich zu Mäusen mit kontinuierlichem oder keinem Zugang zum Futter.

Intermittierendes Binge-Intake-Modell bei Mäusen

Hier stellen wir ein Protokoll vor, um Hypoxie bei neugeborenen Mäusen zu induzieren, indem sie in kontrollierten Umgebungen mit unterschiedlichen Sauerstoffkonzentrationen verabreicht werden. Mausmodelle, die bei der Geburt Sauerstoffschwankungen ausgesetzt waren, haben die Expression von miRNAs, die an der Induktion von phänotypischen Verhaltensänderungen wie Autismus beteiligt sind, dauerhaft variiert.

Hypoxie verändert miRNAs-Spiegel, die an der nicht-Mendelschen Vererbung der Autismus-Spektrum-Störung bei Mäusen beteiligt sind

Lernen Sie die Murmelvergraben- und Nestlet-Schredder-Tests zur Bewertung zwanghafter Verhaltensweisen bei Mäusen. Diese Methoden ermöglichen die Untersuchung repetitiver Verhaltensmuster als Modelle für menschliche psychiatrische Störungen.

Murmelvergraben und Nestlet-Schreddern als Tests für sich wiederholende, zwanghafte Verhaltensweisen bei Mäusen

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