Name: Aufsteigend Aortakonstriktion bei Ratten zur Erstellung von Drucküberlast Herzhypertrophie Modell (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2014-06-29T14:00:00.000+00:00
Duration: 10 min 18 s
Description: Lernen Sie die Methode der aufsteigenden Aortakonstriktion bei Wistar-Ratten zur Erzeugung von Drucküberlast und linker Ventrikelhypertrophie. Dieses Modell ermöglicht die Untersuchung kardialer Remodeling-Mechanismen und therapeutischer Ansätze bei Herzinsuffizienz.

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Die Autoren danken Department für Biotechnologie der indischen Regierung für die finanzielle Unterstützung dieses Projektes. Ajith Kumar GS wurde mit hochrangigen Forschungsstipendium Rat für wissenschaftliche und industrielle Forschung, Regierung von Indien und Binil Raj mit hochrangigen Forschungsstipendium Indian Council of Medical Research, Regierung von Indien unterstützt.

In Tierversuchen wurden nach Einholung der Bewilligung der Institutional Animal Ethikkommission durchgeführt. Wistar-Ratten wurden unter einem 12-Stunden-Zyklus dunkel zu hell, konstante Raumtemperatur (24 ± 2 ° C) mit Futter und Wasser ad libitum (nach den Richtlinien CPCSEA) untergebracht. 1) Pre-operative Pflege und Anästhesie <ol><li> Halten Ratte (ca. 200 g Körpergewicht) unter antibiotischer Dach 24 Stunden vor der Operation durch die Gabe von Amoxicillin oral (Dosis: 500 mg / L Wasser). </li><li> Sterilisieren aller chirurgischen Instrumente (wie Scheren, Zangen, Clip-Applikator, Nähnadeln und Nadelhalter) durch Autoklavieren bei 121 ° C für 15 min. </li><li> Verwenden Sie ein Heizkissen, um die Tierkörpertemperatur um 37 ° C zu halten, um eine rasche Abnahme der Herzfrequenz zu vermeiden. </li><li> Achten Sie darauf, um Austrocknung des Tieres vor und während der Operation zu vermeiden. </li><li> Anesthetize die Ratte in einem Induktionskammer mit 3% Isofluran gemischt mit0,5 bis 1,0 l / min 100% Sauerstoff; Aufrechterhaltung einer Narkose mit Isofluran 1,5%. </li><li> Überprüfen Sie das Pedal Reflex auf erfolgreiche Anästhesie bestätigen. </li></ol> 2) Herstellung der Operationsstelle <ol><li> Halten Sie die Ratte auf einem temperaturgesteuerten Heizkissen in der Rückenlage. </li><li> Positionieren Sie ein Gummiband über Vorderzähne der Ratte, das Tier in Position zu halten, während der Anästhesie mit einer Nase Kegel. </li><li> Entfernen Sie das Fell auf dem Ausschnitt und der linken Brustbereich der Ratte (vorzugsweise unter Verwendung eines Elektrorasierer). </li><li> Desinfizieren Operationsstelle mit Povidon-Jod-Lösung und dann mit 70% igem Alkohol. </li><li> Verwenden Sie eine sterile Abdeckung, um nur die Operationsstelle während des operativen Eingriffs aus. Hinweis: Als zusätzliche Option für die Pflege der Tiere, können 0,25% Bupivicain ID (2,5 mg / kg) vor dem Einschneiden an jedem Einschnitt Website für lokale Anästhesie / Analgesie integriert werden. </li></ol> 3) Trachealintubation im Rat <ol><li> Einen kleinen Einschnitt an der Haut parallel zu der Luftröhre mit einem sterilen Skalpell vorsichtig getrennt und das darunter liegende Gewebe, um die Luftröhre freizulegen. </li><li> Tragen Sie eine Krawatte aus Seide 4-0 Faden unterhalb der Luftröhre und hebe die Krawatte nach oben. </li><li> Einen halben Weg Einschnitt zwischen zwei Knorpelspangen und legen Sie die Trachealkanüle in die Luftröhre der Ratte. </li><li> Schließen Sie die Trachealkanüle zu einem Nagetier Ventilator für die Aufrechterhaltung einer Atemfrequenz von 50 Atemzüge / min, Atemvolumen von 1,70 ml und Inspirationszeit von 0,60 sec (für Ratten mit 200 g Körpergewicht). </li></ol> 4) Verengung der Aorta ascendens <ol><li> Nach dem Erfassen der Position der Rippen mit den Fingern, einen Hautschnitt von etwa 2 cm auf der linken Brustwand zwischen der zweiten und dritten Rippe. </li><li> Trennen Sie die Zwischenrippenmuskeln und Schicht für Schicht einen Einschnitt etwa 1,5 cm lang zwischen der zweiten und dritten Rippe. (Pflege nehmen sollten, um Verletzungen an der Lunge zu vermeiden und gleichzeitig Einschnitt zwischen den Rippen) </li><li> Fahren Sie die Rippen und suchen Sie den aufsteigenden Teil der Aorta. </li><li> Eine kleine Größe Titan-Clip auf der aufsteigenden Aorta mit Hilfe eines Applikators, wobei genden die Aorta auf 50-60% des ursprünglichen Durchmessers. </li><li> Nach der Aortakonstriktion ungefähr den zweiten und dritten Rippen mit 3,0 Prolene in einem unterbrochenen Naht Muster. Gleichzeitig halten Sie den Ventilator für etwa 2-4 Sekunden, um wieder aufgehen, in die Lunge. </li><li> Aufdach die Muskelschichten mit 3,0 Prolene Nahtmaterial und Haut mit 4,0 Seidenfäden in einer unterbrochenen Naht Muster. Synthetische, nicht absorbierbare Nahtmaterialien können anstelle von Seide zum Vernähen der Haut verwendet werden. </li><li> Entfernen Trachealkanüle aus der Ratte einmal die Spontanatmung wieder hergestellt. </li><li> Schließen Sie die Luftröhrenöffnung mit 3,0 Prolene Nahtmaterial und die Hautschicht mit 4,0 Seidenfäden. </li><li> Lassen Sie das Tier auf T erholener Heizungsauflage durch die schrittweise Senkung der Anästhesie-und Beatmungsgerät unterstützt die Atmung. </li><li> In altersgleichen Scheinkontrolltiere, führen Tracheotomie und Thorakotomie ohne Verengung der aufsteigenden Aorta. </li></ol> 5) Postoperative Pflege <ol><li> Desinfizieren OP-Bereich mit PVP-Jod-Lösung. </li><li> Als postoperative Analgesie, injizieren Tramadol intraperitoneal (10 mg / kg Körpergewicht / Tag) für 1 Woche. </li><li> Inject sterile physiologische Kochsalzlösung intraperitoneal, wenn Anzeichen von Austrocknung nach der Operation (ca. 1 ml) angezeigt. </li><li> Amoxicillin oral verabreichen, gemischt mit Trinkwasser, für sieben Tage (Dosis: 500 mg / L Wasser). </li><li> Nehmen Sie die restlichen Seidenfäden von der Haut nach 10 Tagen nach der Operation unter Inhalationsnarkose. </li></ol> 6) Bestätigung der erfolgreichen Verengung der Aorta ascendens <ol><li> Führen Sie eine transthorakale zweidimensionale Doppler-Echokardiographie, um die Absicht zu bestimmensität der durch die Verengung der aufsteigenden Aorta erzeugte Drucklast. </li><li> Anesthetize die Ratten eine Woche nach der Operation, wie oben beschrieben (Schritt 1.5) </li><li> Platzieren des Ultraschallwandlers an der suprasternalen Lage, den Druckgradienten über dem verengten Abschnitt der aufsteigenden Aorta aufzunehmen. Hinweis: Ratten, die mit einem Druckgefälle von etwa 60 mm Hg an der Aorta verengte Website wird schwerer kardialer Hypertrophie von ca. 8-10 Wochen nach der Operation zu entwickeln. </li></ol>

<ol><li>Patten, R. D., Hall-Porter, M. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Small+animal+models+of+heart+failure%3A+development+of+novel+therapies%2C+past+and+present%5BTitle%5D)+AND+%22Circ+Heart+Fail%22%5BJournal%5D)">Small animal models of heart failure: development of novel therapies, past and present.</a> Circ Heart Fail. 2, 138-144 (2009).</li>
<li>Weinberg, E. O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Angiotensin-converting+enzyme+inhibition+prolongs+survival+and+modifies+the+transition+to+heart+failure+in+rats+with+pressure+overload+hypertrophy+due+to+ascending+aortic+stenosis%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">Angiotensin-converting enzyme inhibition prolongs survival and modifies the transition to heart failure in rats with pressure overload hypertrophy due to ascending aortic stenosis.</a> Circulation. 90, 1410-1422 (1994).</li>
<li>Schunkert, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Increased+rat+cardiac+angiotensin+converting+enzyme+activity+and+mRNA+expression+in+pressure+overload+left+ventricular+hypertrophy.+Effects+on+coronary+resistance%2C+contractility%2C+and+relaxation%5BTitle%5D)+AND+%22J+Clin+Invest%22%5BJournal%5D)">Increased rat cardiac angiotensin converting enzyme activity and mRNA expression in pressure overload left ventricular hypertrophy. Effects on coronary resistance, contractility, and relaxation.</a> J Clin Invest. 86, 1913-1920 (1990).</li>
<li>Hasenfuss, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Animal+models+of+human+cardiovascular+disease%2C+heart+failure+and+hypertrophy%5BTitle%5D)+AND+%22Cardiovasc+Res%22%5BJournal%5D)">Animal models of human cardiovascular disease, heart failure and hypertrophy.</a> Cardiovasc Res. 39, 60-76 (1998).</li>
<li>Litwin, S. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Serial+echocardiographic-Doppler+assessment+of+left+ventricular+geometry+and+function+in+rats+with+pressure-overload+hypertrophy.+Chronic+angiotensin-converting+enzyme+inhibition+attenuates+the+transition+to+heart+failure%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">Serial echocardiographic-Doppler assessment of left ventricular geometry and function in rats with pressure-overload hypertrophy. Chronic angiotensin-converting enzyme inhibition attenuates the transition to heart failure.</a> Circulation. 91, 2642-2654 (1995).</li>
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<li>Kagaya, Y., Hajjar, R. J., Gwathmey, J. K., Barry, W. H., Lorell, B. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Long-term+angiotensin-converting+enzyme+inhibition+with+fosinopril+improves+depressed+responsiveness+to+Ca2%2B+in+myocytes+from+aortic-banded+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">Long-term angiotensin-converting enzyme inhibition with fosinopril improves depressed responsiveness to Ca2+ in myocytes from aortic-banded rats.</a> Circulation. 94, 2915-2922 (1996).</li>
<li>Del Monte, F., Butler, K., Boecker, W., Gwathmey, J. K., Hajjar, R. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Novel+technique+of+aortic+banding+followed+by+gene+transfer+during+hypertrophy+and+heart+failure%5BTitle%5D)+AND+%22Physiol+Genomics%22%5BJournal%5D)">Novel technique of aortic banding followed by gene transfer during hypertrophy and heart failure.</a> Physiol Genomics. 9, 49-56 (2002).</li>
<li>Turcani, M., Rupp, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Heart+failure+development+in+rats+with+ascending+aortic+constriction+and+angiotensin-converting+enzyme+inhibition%5BTitle%5D)+AND+%22Br+J+Pharmacol%22%5BJournal%5D)">Heart failure development in rats with ascending aortic constriction and angiotensin-converting enzyme inhibition.</a> Br J Pharmacol. 130, 1671-1677 (2000).</li>
<li>Kerem, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lung+endothelial+dysfunction+in+congestive+heart+failure%3A+role+of+impaired+Ca2%2B+signaling+and+cytoskeletal+reorganization%5BTitle%5D)+AND+%22Circ+Res%22%5BJournal%5D)">Lung endothelial dysfunction in congestive heart failure: role of impaired Ca2+ signaling and cytoskeletal reorganization.</a> Circ Res. 106, 1103-1116 (2010).</li>
<li>Almeida, A. C., van Oort, R. J., Wehrens, X. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Transverse+aortic+constriction+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Transverse aortic constriction in mice.</a> J Vis Exp. (38), (2010).</li>
</ol>

Die Autoren haben nichts zu offenbaren.

Es gibt mehrere chirurgische Modelle für die Induktion von Drucküberlastung sowie Herzhypertrophie und Herzinsuffizienz. In Kleintiere, Lorell und Kollegen entwickelten das Modell haben wir hier beschrieben, und sie berichtet, das Auftreten von kompensierten Herzhypertrophie 8 Wochen nach Aortenbandierung 5. Herz Änderungen allmählich zu einer dekompensierten Zustand Fortschritt und dann bei Herzinsuffizienz führen. Der Hauptvorteil dieses Modells ist der schrittweise Beginn der Zunahme der linksventrikulären...

Kleintiermodelle sind die am meisten bevorzugten Werkzeuge für die Untersuchung der chronischen Veränderungen in der Entwicklung von Herzhypertrophie und seiner Progression von Herzinsuffizienz. Herzinsuffizienz Modelle von chirurgischen Methoden wurden ursprünglich entwickelt, wie bei Ratten diese Tiere sind am besten geeignet für die offene Brust chirurgische Verfahren, Echokardiographie und Bewertung der hämodynamischen Parameter. Sie bieten auch ausreichende post mortem Gewebeproben für die, zellulärer und molekularer Ebene Studien ein. Verengung der aufsteigenden Aorta ist eine der häufigsten und erfolgreiche chirurgische Modelle für die Erstellung von Drucküberlastung Herzinsuffizienz 2, 3. Dieses Modell ist gut geeignet, um die zellulären und subzellulären Umbau Veranstaltungen und kontraktilen Eigenschaften des Herzens während des Übergangs von Hypertrophie zur Herzinsuffizienz 4 studieren. Ein großer Vorteil dieses Modells ist der schrittweise Beginn der Druckbelastung auf das Herz 5, &lt;/ Sup&gt; 6. Dieses Modell ist aufgrund seiner langsamen, aber stetigen Fortschritt von Herzhypertrophie ausgeglichen zu dekompensierten Phase und schließlich zum Herzversagen Stadium klinisch relevant. Die Dauer für die Progression der Herzhypertrophie zu Herzversagen und den damit verbundenen physiologischen Veränderungen werden vor allem durch den Grad der Stenose beeinflußt 7 hergestellt. Aufsteigend Aortakonstriktion kann auf zwei Arten entweder mit Nähten oder durch Aufbringen von Metallklammern 8, 9 durchgeführt werden. Der Hauptvorteil der Verwendung einer metallischen Klammer für Aortakonstriktion ist, dass die chirurgische Verfahren weniger kompliziert. In diesem Verfahren muss man den überKlappenaufsteigenden Aorta zu lokalisieren und legen Sie den Clip um die Aorta, um gewünschte Niveau der Verengung zu erhalten. Eine Brust Retraktor ist nicht notwendig in dieser Prozedur. Aortenbandierung durch Vernähen benötigt mehrere chirurgische Manipulationen zum Platzieren der Nadel neben dem aufsteigenden Aorta und Vernähen um esproduzieren das gewünschte Niveau der Aortakonstriktion. Die letztere Technik ist zeitaufwendig, wenn sie mit der Verwendung von metallischen Clips für Aortakonstriktion verglichen. Die in diesem Video beschriebenen Methode veranschaulicht, die chirurgische Verfahren für die aufsteigenden Aorta Verengung in Ratten, die Bildung von Drucklastet linksventrikuläre Hypertrophie-Modell ermöglicht.

<table><tbody><tr><td>Wistar Ratten</td><td></td><td></td><td>Gehalten bei ARF, RGCB</td></tr><tr><td>Inhalationsanästhesiesysteme&nbsp;</td><td>VetEquip</td><td>AB19276</td><td></td></tr><tr><td>Beatmungsgerät für Nagetiere</td><td>CWE Inc</td><td>SAR- 830/AP&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>Rattentrachealkanüle</td><td>CWE Inc</td><td>13-21032</td><td></td></tr><tr><td>Ultraschallsystem</td><td>Philips</td><td>HD7</td><td></td></tr><tr><td>Ultraschallwandler</td><td>Philips</td><td>S 12</td><td></td></tr><tr><td>Titan Clip (klein)</td><td>Horizon</td><td>1204</td><td></td></tr><tr><td>Clip Applikator</td><td>Weck</td><td>137081</td><td></td></tr><tr><td>Elektrorasierer</td><td>Vinverth</td><td>VBT0817</td><td></td></tr><tr><td>BP-Klinge (Größe:11)</td><td>Chirurg</td><td>REF10111</td><td>Vorbereitung der Operationsstelle</td></tr><tr><td>Tramadol</td><td>Orchidee Gesundheitswesen</td><td>OCH043</td><td></td></tr><tr><td>Amoxycillinhydrochlorid</td><td>Ranbaxy</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Isofluran</td><td>Piramal Gesundheitswesen</td><td>A23M10A</td><td></td></tr><tr><td>Spritzen</td><td>BD</td><td>2015-09</td><td></td></tr><tr><td>4-0 geflochtene Seide</td><td>Diamant</td><td></td><td></td></tr><tr><td>3:0 Prolene</td><td>Johnson& Johnson</td><td>NW018</td><td></td></tr><tr><td>OP-Klebeband</td><td>Romsons</td><td>SH 6301</td><td></td></tr><tr><td>Povidon Jod</td><td>Win Medicare</td> Temp. <td></td><td></td></tr><tr><td>kontrolliertes Heizkissen</td><td>Flamingo</td><td>HC1003</td><td></td></tr></tbody></table>

aufsteigend aortakonstriktion bei ratten zur erstellung von drucküberlast herzhypertrophie modell

Ascending Aortic Constriction in Rats for Creation of Pressure Overload Cardiac Hypertrophy Model

Aufsteigend Aortakonstriktion ist die häufigste und erfolgreiche chirurgische Modell für die Erstellung von Drucküberlastung induzierte Herzhypertrophie und Herzinsuffizienz. Hier beschreiben wir eine detaillierte chirurgisches Verfahren zum Bilden von Drucklast und Herzhypertrophie bei Ratten durch Verengung der aufsteigenden Aorta unter Verwendung einer kleinen Metallclips. Nach der Anästhesie wird die Luftröhre durch Einführen einer Kanüle durch einen Einschnitt auf halbem Weg zwischen zwei Knorpelspangen der Luftröhre intubiert. Dann wird ein Hautschnitt in der Ebene der zweiten Zwischenrippenraum an der linken Brustwand gemacht und Muskelschichten werden gelöscht, um den aufsteigenden Teil der Aorta zu lokalisieren. Die aufsteigenden Aorta wird auf 50-60% des ursprünglichen Durchmessers durch Anwendung einer kleinen Größe Titanclip verengt. Aortakonstriktion folgenden werden die zweiten und dritten Rippen mit Prolene Fäden angenähert. Die Trachealkanüle wird entfernt, sobald die Spontanatmung wieder hergestellt. Das Tier darf o erholenn die Heizkissen durch die schrittweise Senkung der Anästhesie. Die Intensität der Druckbelastung die durch Verengung der aufsteigenden Aorta wird durch die Aufnahme der Druckgefälle unter Verwendung von trans-Thorax zweidimensionalen Doppler-Echokardiographie bestimmt. Insgesamt ist dieses Protokoll ist sinnvoll, die Umgestaltung Veranstaltungen und kontraktilen Eigenschaften des Herzens während der allmählichen Entstehung und Progression von kompensierten Herzhypertrophie zu Herzversagen Bühne zu studieren.

In unseren Experimenten können wir mehr als 80% Überlebensraten zu erzielen. Die Wirksamkeit der Aortakonstriktion wurde, indem Doppler-Echokardiographie bestätigt. Ratten (n = 6) mit einem Druckgefälle von etwa 60 mm Hg bei der Aorta verengten Stelle wurden für 8 Wochen beobachtet und getötet, um die Entwicklung von Herzhypertrophie (Fig. 1) zu analysieren. Nach 8 Wochen nach der Operation Echokardiographie zeigte einen signifikanten Anstieg der linksventrikulären sind Parameter wie Ventrikelseptumdefe...

Wir beschreiben einen schrittweisen Verfahren zum Bilden von Drucklast und der linksventrikulären Hypertrophie in Wistar-Ratten durch Verengung der aufsteigenden Aorta unter Verwendung einer kleinen Metallclips. Dieses Modell wird weitgehend für das Studium Umbau Veränderungen während der Herzhypertrophie und zur Identifizierung und Bewertung von Strategien für die Regression von solchen Änderungen verwendet.

Aufsteigend Aortakonstriktion bei Ratten zur Erstellung von Drucküberlast Herzhypertrophie Modell

Ascending aortic constriction is the most common and successful surgical model for creating pressure overload induced cardiac hypertrophy and heart ...

Hallo, ich bin Aji Kumar Gs von der Abteilung für Kardiovaskuläre Erkrankungen Biologie, Raj Gandhi, Zentrum für Biotechnologie Indien. Ich arbeite unter der Anleitung von Prozess Karta und in diesem Video werden wir eine schrittweise Anleitung zur Konstruktion des aufsteigenden Aortenbogens bei Ratten demonstrieren. In unserem Labor nutzen wir dieses Tiermodell, um die Pathophysiologie und die zugrunde liegenden molekularen Mechanismen bei kardialer Hypertrophie und progredienter Herzinsuffizienz zu untersuchen.Wir verwenden dieses Modell außerdem, um die pulmonale Hypertonie im Zusammenhang mit Linksherzinsuffizienz zu untersuchen. Beginnen wir also damit, das Tier zu anästhesieren und in Rückenlage zu fixieren. Führen Sie eine endotracheale Intubation durch, indem Sie einen halben Schnitt zwischen zwei Trachealringen anlegen und die Trachealkanüle einführen, die wiederum mit einem Nagerbeatmungsgerät verbunden ist.Danach einen etwa zwei Zentimeter langen Hautschnitt im linken Brustbereich zwischen der zweiten und dritten Rippe anlegen und die Muskelschichten voneinander trennen. Um die Iota-Konstriktion des aufsteigenden Teils der Iota sichtbar zu machen, ist ein kleiner Titanclip mit Applikator zu verwenden, die Rippen aneinander anzulegen und anschließend die Muskelschichten sowie die Haut in unterbrochener Nahttechnik zu vernähen. Nach der Entfernung des endotrachealen Tubus die Trachealmuskulatur, Schichten und Haut verschließen und dem Tier die Erholung ermöglichen.Das Verfahren wurde nach Erhalt der Genehmigung durch den institutionellen Tierversuchsausschuss durchgeführt. Vor der Operation das Operationsfeld mit 70 %igem Alkohol desinfizieren und die Heizplatte aseptisch bereithalten. Den Nagetierbeatmungsapparat und die Anästhesieeinheit für den Eingriff vorbereiten.Die chirurgischen Instrumente durch Autoklavieren sterilisieren. Zu den wichtigsten chirurgischen Instrumenten für die aufsteigende I-otische Konstriktion gehören sterile Handschuhe, Pinzette, Schere, Skalpelle, kleine Titanclips und eine Applikator-Arterienklemme mit Mullverband für den Fall von Blutungen, eine Nadelhalter-Proline-Nahtmaterial, umschlungenen Seidenfaden mit Nadel. Die Ratte 24 Stunden lang unter einem antibiotischen Schutz stehen lassen und die Ratten in einer Induktionskammer mit 3 % ISO-Fluorin, gemischt mit 100 % Sauerstoff, narkotisieren.Entfernen Sie das Fell aus dem Nacken- und linken Brustbereich der Ratte und positionieren Sie das Tier in Rückenlage. Verwenden Sie eine Heizplatte. Aufrechterhaltung der Anästhesie mit 1,5 % Isofluran; überprüfen Sie den Pedalreflex zur Bestätigung einer erfolgreichen Anästhesie.Desinfizieren Sie den Operationsbereich mit Povidon-Jod-Lösung, gefolgt von 70 % Alkohol. Wiederholen Sie den Vorgang dreimal. Legen Sie ein steriles Tuch über das Tier, wobei nur die Operationsstelle freiliegt.Führen Sie einen Hautschnitt parallel zur Trachea durch und trennen Sie das darunterliegende Gewebe, um die Trachea freizulegen. Legen Sie einen Faden aus Seidenmaterial unter die Trachea und heben Sie diese vorsichtig nach oben an.Führen Sie einen halben Schnitt zwischen zwei Knorpelringen durch und setzen Sie die Trachealkanüle ein. Verbinden Sie die Trachealkanüle mit einem Rodentenventilator. Der Ventilator ist auf eine Atemfrequenz von 50 Atemzügen pro Minute einzustellen.Atmungsvolumen 1,7 ml und Inspirationszeiten 0,6 Sekunden. Führen Sie einen Schnitt im linken Brustbereich zwischen dem zweiten und dritten Rippenbogen durch. Die Interkostalmuskulatur ist schichtweise zu trennen.Es ist darauf zu achten, dass bei dem Schnitt zwischen den Rippen keine Verletzung der Lunge erfolgt. Nach dem Zurückklappen der Rippen sollte der aufsteigende Abschnitt des Ileums durch vorsichtige Manipulation des Fettgewebes lokalisiert werden. Der Pfeil zeigt den aufsteigenden Abschnitt des Ileums an.Platzieren Sie mit Hilfe eines Applikators einen kleinen Titanclip um das aufsteigende Iota, wodurch das Iota auf 50 bis 60 % des ursprünglichen Durchmessers eingeengt wird. Nach der Iotischen Konstriktion positionieren Sie das Herz erneut und nähen die Rippen mit einer Prolinnaht zu. Unterbrechen Sie den Beatmungsapparat für etwa zwei bis vier Sekunden, um die Lunge erneut aufzublasen. Nähen Sie die Muskelschichten mit Prolin und anschließend die Haut mit Seidenfäden in einer unterbrochenen Nahttechnik.Verringern Sie schrittweise die am Beatmungsgerät eingestellte Atemfrequenz und beobachten Sie das Tier auf spontane Atmung. Entfernen Sie die tracheale Kanüle, sobald eine spontane und regelmäßige Atmung wiederhergestellt ist. Die Anästhesie wird nun über eine Nasenkonne aufrechterhalten.Schließen Sie die Öffnung zwischen den Trachealringen mit Prolin-Nähten. Schließen Sie die Muskelagen und die Haut jeweils mit Prolin- und Seiden-Nähten. Tragen Sie Povidon-Jod-Lösung auf den chirurgischen Bereich auf und verabreichen Sie eine postoperative Analgesie als Injektion.Tremadol in intraperitonealer Kochsalzlösung kann intraperitoneal verabreicht werden. Wenn Anzeichen einer Dehydratation auftreten, die Anästhesie allmählich absenken, nachdem sich das Tier erholt hat, in den Käfig verlegen und Amoxicillin sieben Tage lang oral mit dem Trinkwasser verabreichen. Die Intensität der durch eine Konstriktion der aufsteigenden Aorta verursachten Drucküberlastung kann durch Beobachtung des Druckgradienten an der konstriktiven Stelle mittels zweidimensionaler Echokardiographie bestimmt werden.Das linke Panel der Abbildung zeigt ein Doppler-Echo eines aortenkonstriktierten Rattentiers mit einem Druckgradienten von 63 mm Quecksilber. Das rechte Panel stellt eine sham-kontrollierte Ratte ohne signifikanten Druckgradient über die Aorta dar. Das obere Panel zeigt die M-Modus-Echokardiographie des linken Ventrikels bei Ratten acht Wochen nach der Operation, das untere Panel zeigt die Sham-Kontrolle. Die Dicke des interventrikulären Septums und die hintere Wanddicke des linken Ventrikels waren signifikant erhöht, während der interne Durchmesser des linken Ventrikels bei Ratten nach Iota-Konstriktion signifikant vermindert war.Im Vergleich zu sham-operierten Kontrollgruppen wird bei Ratten acht Wochen nach der Operation eine signifikante kardiale Hypertrophie beobachtet, die einer Konstriktion der aufsteigenden Aorta unterzogen wurden, verglichen mit sham-operierten Kontrollgruppen. Hallo, ich bin Raj. Hier erklären wir das Verfahren zur Konstriktion der aufsteigenden Aorta bei der Ratte.Der Hauptvorteil dieses Modells ist die schleichende Entwicklung einer kardialen Hypertrophie und Herzinsuffizienz. Ähnlich wie bei der klinischen Situation einer chronischen Hypertonie muss bei dieser Methode besondere Sorgfalt bei der Anwendung des Titanic-Clips zur Konstriktion der A. carotis interna angewandt werden. Am wichtigsten ist, dass die Anwendung des Titanic-Clips ausreicht, um eine kritische Stenose der A. carotis interna für einen linksventrikulären Druck von über 20 mmHg hervorzurufen, jedoch nicht so stark ist, dass akute Herzinsuffizienz und Lungenödem auftreten. Außerdem sollte darauf geachtet werden, Verletzungen der Lunge beim Einchnitt zwischen den Rippen zu vermeiden.Die Ventilatoren sollten drei bis vier Sekunden lang angewendet werden, während man gegen die Rippen drückt, um die Lungen erneut aufzublasen. Vielen Dank, dass Sie sich dieses Video angesehen haben, und viel Erfolg bei Ihren Experimenten.

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Quer Aorta Verengung (TAC) in der Maus ist eine häufig verwendete experimentelle Modell zugrunde liegenden Mechanismen der Herzhypertrophie und Herzinsuffizienz Entwicklung zu studieren. Hier beschreiben wir Verfahren zur Einengung der Aorta zu einem reproduzierbaren Grad der Herzhypertrophie in Mäusen zu erzeugen.

Quer Aorten-Verengung in Mäuse

Ein Rattenmodell der abdominalen Aortenverengung, das Herzhypertrophie und Umbau induziert, wird beschrieben. Eine effiziente, hochgradig reproduzierbare und minimal-invasive Methode wird verwendet, um eine einfache, aber nützliche Plattform für die Erforschung von Myokardhypertrophie und -dysfunktion bereitzustellen.

Ein Modell der kardialen Remodeling Durch Zusammenziehen der Bauchaorta bei Ratten

Minimal-invasive Quer Aortakonstriktion (MTAC) schont das Wesentliche der regelmäßigen Quer Aortakonstriktion (TAC), während die Verwendung eines Ventilators mit Intubation zu beseitigen. Es erweist sich als ein höchst wünschenswertes Verfahren zur Hochdurchsatz-Untersuchungen an der linksventrikulären Überlastung, vor allem in der translationalen Studien zu sein.

Minimal Invasive Quer Aortakonstriktion bei Mäusen

Ziel dieses Protokolls ist es, Schritt für Schritt beschreiben die Technik der minimal-invasiven quer Aortenstenose Verengung (TAC) bei Mäusen. Durch Beseitigung der Intubation und Belüftung sind obligatorisch für häufig verwendete Standardverfahren, minimal-invasive TAC das operative Vorgehen vereinfacht und reduziert die Belastung auf das Tier setzen.

Technik der minimal-invasiven quer Aortenstenose Verengung bei Mäusen für Induktion der linken Ventricular Hypertrophie

Hier präsentieren wir Ihnen ein Protokoll der transversalen Aortenstenose Verengung (TAC) über eine laterale Thorakotomie. Diese Technik ist ein minimal-invasive, geschlossenen Brust chirurgischer Eingriff mit dem Ziel, drucküberlastung und Herzinsuffizienz bei Mäusen unter Verwendung der Standardeinstellungen TAC-Labor zu simulieren.

Eine geschlossen Kasten Modell quer Aortenstenose Verengung bei Mäusen zu induzieren

Wir präsentieren eine chirurgische Methode, um rechtsventrikuläre Hypertrophie und Versagen bei Ratten zu induzieren.

Ein pulmonaler Stamm Streifenbildung Modell der Drucküberlastung induzierte rechtsventrikuläre Hypertrophie und Versagen

Wir beschreiben die Erstellung eines Rattenmodells von drucküberlastinduzierter moderater Umgestaltung und frühsystolischer Dysfunktion, bei der Signaltransduktionswege aktiviert werden, die an der Einleitung des Umbauprozesses beteiligt sind. Dieses Tiermodell wird bei der Identifizierung molekularer Ziele für die Anwendung von frühtherapeutischen Anti-Remodeling-Strategien für Herzinsuffizienz helfen.

Ein Rattenmodell von Drucküberlastung induziert moderate Remodeling und systolische Dysfunktion im Gegensatz zu overt systolische Herzinsuffizienz

Dieses Protokoll stellt eine verbesserte Methode zur Erlangung einer transienten myokardischen Hypertrophie mit resorbierbarer Naht dar, die nach dem Entfernen der Drucküberlastung eine abnehmende linksventrikuläre Hypertrophie simuliert. Es könnte für die Studien über myokardische hypertrophe Vorbedingungen wertvoll sein.

Betrieb der transversalen Aortenverengung mit resorbierbarer Naht zur Erlangung einer transienten Myokardhypertrophie

Das vorliegende Protokoll beschreibt eine modifizierte und vereinfachte Technik mit einem minimal-invasiven Verfahren der transversalen Aortenverengung (TAC) unter Verwendung eines selbst hergestellten Retraktors. Dieses Verfahren kann ohne Beatmungsgerät oder Mikroskop durchgeführt werden und führt zu einer Drucküberlastung, die schließlich zu Herzhypertrophie oder Herzinsuffizienz führt.

Eine modifizierte Technik zur transversalen Aortenverengung bei Mäusen

Das vorliegende Protokoll beschreibt eine neue Technik der Aortenbandbildung bei Mäusen, um eine Drucküberlastung der Herzhypertrophie zu induzieren. Zum Banderolieren wird ein Gummiring mit festem Innendurchmesser verwendet. Diese neue Technik verspricht weniger Varianz und reproduzierbarere Daten für zukünftige Experimente.

O-Ring-Aortenband versus traditionelle transversale Aortenverengung zur Modellierung von Drucküberlastung-induzierter Herzhypertrophie

Dieses Protokoll beschreibt ein minimal-invasives chirurgisches Verfahren zur aufsteigenden Aortenbänder beim Schwein.

Ein minimal-invasives Modell der Aortenstenose beim Schwein

Lernen Sie die Methode der aufsteigenden Aortakonstriktion bei Wistar-Ratten zur Erzeugung von Drucküberlast und linker Ventrikelhypertrophie. Dieses Modell ermöglicht die Untersuchung kardialer Remodeling-Mechanismen und therapeutischer Ansätze bei Herzinsuffizienz.

Aufsteigend Aortakonstriktion bei Ratten zur Erstellung von Drucküberlast Herzhypertrophie Modell

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