Aufsteigend Aortakonstriktion bei Ratten zur Erstellung von Drucküberlast Herzhypertrophie Modell

Hallo, ich bin Aji Kumar Gs von der Abteilung für Biologie von Herz-Kreislauf-Erkrankungen Raj Gandhi, Zentrum für Biotechnologie Indien. Ich arbeite unter der Anleitung von process karta und in diesem Video zeigen wir eine Schritt-für-Schritt-Anleitung für die aufsteigende I OTE-Konstruktion bei Ratten. In unserem Labor verwenden wir dieses jährliche Modell, um die Pathophysiologie und die zugrunde liegenden molekularen Mechanismen bei Herzhypertrophie und progressiver Herzinsuffizienz zu untersuchen.

Wir verwenden dieses Modell auch, um die mit Links- bis Herzinsuffizienz verbundene pulmonale Hypertonie zu untersuchen. Also fangen wir an Und ästhetieren Sie das Tier und halten Sie es in Rückenlage. Führen Sie eine endotracheale Intubation durch, indem Sie einen halben Schnitt zwischen zwei Trachealringen vornehmen und die Trachealkanüle einführen, die wiederum mit einem Nagetierbeatmungsgerät verbunden ist.

Machen Sie dann einen etwa zwei Zentimeter langen Hautschnitt an der linken Brustregion zwischen zweiter und dritter Rippe und trennen Sie die Muskelschichten. Um die Iota-Verengung des aufsteigenden Teils der Iota zu visualisieren, wird ein kleiner Titanclip mit einem Applikator verwendet, die Rippen gegenübergestellt und dann die Muskelschichten und die Haut in einem unterbrochenen Muster vernäht. Nach der Entfernung des Endotrachealtubus schließen Sie den Luftröhrenmuskel, die Schichten und die Haut und lassen Sie das Tier sich erholen.

Das Verfahren wurde nach Genehmigung durch die Ethikkommission der Institution durchgeführt. Desinfizieren Sie vor der Operation das Operationsfeld mit 70%igem Alkohol und bewahren Sie das Heizkissen aseptisch auf. Halten Sie das Nagetierbeatmungsgerät und die Anästhesieeinheit für die Operation bereit.

Sterilisieren Sie die chirurgischen Instrumente durch Autoklavieren. Die wichtigsten chirurgischen Hilfsmittel für die aufsteigende I-otische Verengung sind sterile Handschuhe, Daumenzange, Schere, chirurgische Klingen, kleine Titanclips und Applikator-Arterienzange mit Gaze für den Fall von Blutungen, ein Nadelhalter, Prolin-Nahtmaterial, geflochtenes Seidennaht und eine Nadel. Halten Sie die Ratte 24 Stunden lang unter einem Antibiotikaschirm und ästhetisieren Sie die Ratten in einer Induktionskammer mit 3%ISO Fluor, gemischt mit hundert Prozent Sauerstoff.

Entfernen Sie das Fell vom Ausschnitt und der linken Brustregion der Ratte und halten Sie das Tier oben. Ein Heizkissen. Halten Sie die Anästhesie mit einem 1,5%igen ISO-Fluorid-Prüfpedalreflex aufrecht, um eine erfolgreiche Anästhesie zu bestätigen.

Desinfizieren Sie den Operationsbereich mit Povidon-Jodlösung, gefolgt von 70%igem Alkohol. Wiederholen Sie den Vorgang dreimal. Legen Sie ein steriles Tuch über das Tier, das nur die Operationsstelle freilegt.

Machen Sie einen Hautschnitt parallel zur Luftröhre und trennen Sie das darunter liegende Gewebe. Um die Luftröhre freizulegen. Legen Sie einen Binder Seidenfaden unter die Luftröhre und heben Sie ihn vorsichtig nach oben.

Machen Sie einen Schnitt auf halber Höhe zwischen zwei Knorpelringen und führen Sie die Trachealkanüle ein. Verbinden Sie die Trachealkanüle mit einem Nagetierbeatmungsgerät. Das Beatmungsgerät ist auf eine Atemfrequenz von 50 Atemzügen pro Minute einzustellen.

Atemzugvolumen 1,7 ml und Inspiration mal 0,6 Sekunden. Machen Sie einen Schnitt im linken Brustbereich zwischen der zweiten und dritten Rippe. Die Interkostalmuskulatur ist Schicht für Schicht zu trennen.

Es sollte darauf geachtet werden, dass die Lunge beim Schnitt zwischen den Rippen nicht verletzt wird. Nachdem Sie die Rippen zurückgezogen haben, lokalisieren Sie vorsichtig den aufsteigenden Teil des Iota, indem Sie das Fettgewebe vorsichtig manipulieren. Der Pfeil zeigt den aufsteigenden Teil des Iota an.

Platzieren Sie mit Hilfe eines Applikators einen kleinen Titanclip um das aufsteigende Iota und verengen Sie das Iota so um 50 bis 60% des Originaldurchmessers. Nach der otischen Verengung das Herz neu positionieren und die Rippen mit einer Prolinnaht annähern. Halten Sie das Beatmungsgerät gleichzeitig für etwa zwei bis vier Sekunden an, um die Lunge wieder aufzublasen. Setzen Sie die Muskeln in Schichten mit Prolin ein, gefolgt von der Haut mit Seidennähten in einem unterbrochenen Nahtmuster.

Reduzieren Sie allmählich die am Beatmungsgerät eingestellte Atemfrequenz und beobachten Sie das Tier bei der Spontanatmung. Entfernen Sie die Trachealkanüle, sobald die spontane und regelmäßige Atmung wiederhergestellt ist. Jetzt wird die Anästhesie durch den Nasenkonus aufrechterhalten.

Verschließen Sie die Öffnung zwischen den Trachealringen mit Prolinnähten. Verschließen Sie die Muskelschichten und die Haut mit Prolin- bzw. Seidennähten. Tragen Sie Povidon-Jod-Lösung als postoperative Analgesie-Injektion auf den Operationsbereich auf.

Die intraperitoneale Kochsalzlösung von Tremadol kann intraperitoneal verabreicht werden. Wenn Anzeichen einer Dehydrierung allmählich geringer werden, wird die Anästhesie nach der Genesung des Tieres in den Käfig versetzt, und Amoxicillin oral gemischt mit Trinkwasser für sieben Tage verabreichen. Die Intensität der Drucküberlastung, die durch die Verengung des aufsteigenden Iota hervorgerufen wird, kann durch Beobachtung des Druckgradienten über die zentrale Verengungsstelle mittels zweidimensionaler Echokardiographie bestimmt werden.

Das linke Bild der Abbildung zeigt das Doppler-Echo einer Ratte mit Aortenverengung und einem Druckgradienten von 63 mm Quecksilbersäule. Und das rechte Feld stellt eine scheinkontrollierte Ratte ohne signifikanten Druckgradienten über das Jota dar. Das obere Bild zeigt die M-Modus-Echokardiographie des linken Ventrikels bei Ratten, acht Wochen nach der Operation, und das untere Bild stellt die Scheinkontrolle, die Dicke des interventrikulären Septums und die Dicke der linksventrikulären hinteren Wand dar, während der linksventrikuläre Innendurchmesser bei Ratten, die sich einer iatrischen Verengung unterzogen hatten, signifikant reduziert war.

Im Vergleich zu scheinoperierten Kontrollgruppen wird bei Ratten, die sich nach achtwöchiger Operation einer aufsteigenden Iotischen Verengung unterzogen haben, im Vergleich zu scheinoperierten Kontrollgruppen eine signifikante kardiale Hypertrophie beobachtet. Hallo, ich bin Raj. Hier erklären wir das Verfahren zur Verengung des aufsteigenden Iota bei Ratten.

Der Hauptvorteil dieses Modells ist die allmähliche Entwicklung von Herzhypertrophie und Herzinsuffizienz. Ähnlich wie bei der klinischen Situation bei chronischem Bluthochdruck sollte bei dieser Mutter auf die Anwendung des Titanic-Clips zur Verengung des Iota geachtet werden. Das Wichtigste ist, dass die Anwendung des Titanic-Clips ausreichend sein sollte, um eine kritische Jota-Verengung für die linke 20 plus-Belastung zu erzeugen, aber nicht schwerwiegend genug, um ein akutes elektronisches Versagen und Lungenödeme hervorzurufen, und es sollte auch darauf geachtet werden, dass die Lunge beim Einschnitt zwischen den Rippen

Die Beatmungsgeräte sollten drei bis vier Sekunden lang gegenüber den Rippen aufgestellt werden, um die Lunge wieder aufzublasen. Vielen Dank, dass Sie sich dieses Video angesehen haben, und viel Glück bei Ihren Experimenten.