Isolation and Physiological Analysis of Mouse Cardiomyocytes

Gretchen M. Roth; David M. Bader; Elise R. Pfaltzgraff

doi:10.3791/51109

Isolation und physiologische Analyse von Maus Kardiomyozyten

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Biology
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Isolation and Physiological Analysis of Mouse Cardiomyocytes

Isolation und physiologische Analyse von Maus Kardiomyozyten

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11:02 min

September 7, 2014

DOI: 10.3791/51109-v

Gretchen M. Roth¹, David M. Bader^1,2, Elise R. Pfaltzgraff²

¹Department of Medicine,Vanderbilt University, ²Department of Cell and Developmental Biology,Vanderbilt University

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Einzelne Kardiomyozyten aus Wildtyp- und mutierten Mäusen können aus dem Herzen isoliert werden, um ihre Kontraktilität und Kalziumtransienten zu untersuchen. Dies ermöglicht die Charakterisierung des Beitrags zellulärer Dysfunktion zur Herzfunktionsstörung aus beliebiger Ursache.

Die Ziele dieses Protokolls sind die Verwendung der LOR-Perfusion zur Isolierung von Herzzellen aus adulten Mausherzen mit bekannter Genetik und die Analyse der Kontraktilität und der Kalziumtransienten der Myozyten. Nach einer Heparin-Injektion wird einer betäubten Maus das Herz entnommen. Es wird schnell über die Aorta an eine Kanüle befestigt, die an einer Spritze mit Perfusionspuffer befestigt ist.

Die Aorta wird gesichert. Eine Naht und ein Puffer werden langsam perfundiert, um die Koronararterien zu reinigen. Die Kanüle wird dann auf eine LOR-Apparatur mit fließendem Perfusionspuffer aufgesetzt.

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