Name: Testen Drosophila Riechen mit einem Y-Labyrinth-Test (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2014-06-12T13:00:00.000+00:00
Duration: 6 min 45 s
Description: Lernen Sie einen einfachen Y-Labyrinth-Test zur Untersuchung des Riechverhaltens bei Drosophila melanogaster. Diese Methode ermöglicht es Forschern, olfaktorische Präferenzen und Aversionen zuverlässig zu erfassen.

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Wir danken 4 anonymen Gutachtern für ihre Arbeit, das Manuskript zu verbessern. Wir danken dem Centre National de la Recherche Scientifique für die finanzielle Unterstützung, um MBG und YG, und der Université de Bourgogne und der Französisch Ministerium für Forschung, um MMS. Research in YG Labor wird von der Europäischen Forschungsrates (ERC Starting Grant, GliSFCo-311403), der Agence Nationale de la Recherche (ANR-JCJC, GGCB-2010), des Conseil Régional de Bourgogne (Faber) und dem CNRS finanziert.

1. Vor dem Start <ol><li> Verwenden Sie ein isogenized Referenz Lager Lager stabil und robust Verhaltens Phänotypen. Es gibt keine allgemeine Regel für die Wahl dieses Lager, da alle potenziellen Kontrollen können heterogenen Hintergrund Allele tragen. </li><li> Verwenden Sie dieses Kontrollstamm, jede andere Lager, die für spätere Schritte Rückkreuzung. Diese Rückkreuzung Schritt wird in der Regel um mindestens 5 aufeinander folgenden Kreuzungen eines einzigen weiblichen Jungfrau vertreten zu 2-3 isogene Vergleichs Männer 5 (mögliche Crossing-over zwischen homologen Chromosomen zu ermöglichen). Dieser Schritt ist wichtig, um den genetischen Hintergrund der verschiedenen Flugbestände homogenisieren. </li><li> Pflegen Drosophila Aktien auf einem Standard-Maismehl (9%), Hefe (10%) und Agar-Medium (1,5%) mit einer Antibiotika-(0,4% Methyl-para-Hydroxy-Benzoat) in einem 12-Stunden Licht / Dunkel-Zyklus ergänzt bei 25 ° C. </li><li> Erreichen Sie chemosensory Experimente in einem temperierten Raum (25 ° C) unter viel rotes Licht(Um den Beitrag der visuellen Hinweisen zu beseitigen und die auf chemosensorischen Signale konzentrieren). Regelmäßig erneuern die Luft des Raumes, um den Bereich zwischen jedem Versuch zu lüften. </li></ol> 2. Olfaktorischen Reaktion mit einem Y-Labyrinth-Test <ol><li> Verhungern die Fliegen für 16-18 h bei 25 ° C in Glasröhrchen, die nassen Papiertuch vor der Prüfung. </li><li> Nehmen Sie an einer Y-Form-Stecker an zwei Glasflaschen und zu einem kleineren Kunststofffläschchen (Lade Fläschchen). Verwenden Sie 1 ml Pipettenspitzen, die durch die Schaumstopper geben, um den Anschluss an die drei Fläschchen zu verknüpfen und einen dicht verschlossenen Y-Labyrinth zu erhalten. Schneiden Sie die schmalen Enden von zwei Pipettenspitzen (~ 2 mm Durchmesser, um eine Rückkehr der Fliege zu vermeiden, sobald er seine Entscheidung gemacht), um zwei &quot;Falle&quot; Fläschchen zu bilden, und ein großes Ende einer Pipettenspitze, um den &quot;Laden&quot; zu bilden Rohr (1A). </li><li> Kurz vor dem Anschluss der &quot;Falle&quot; Fläschchen (1B), legen Sie ein ~ 6 mm Durchmesser Filterpapier injedes Fläschchen. 40 &amp;mgr; l Geruchsstoff-Lösung auf ein Filterpapier, und 40 ul des entsprechenden Lösungsmittels auf dem zweiten Filterpapier. </li><li> Führen zehn 4-9 Tage alten Fliegen in der &quot;loading&quot; Fläschchen. Verwenden Sie keine CO 2-Narkose während dieser Überweisung, da es einen starken Einfluss auf das Verhalten der 10 hat. Vielmehr verwenden kurzem Abkühlen auf Eis. Die richtige Handhabung der narkotisierten Fliegen ist wichtig, um Stress zu den Themen so weit wie möglich zu begrenzen. <ol><li> Führen Sie eine Reihe von Y-Labyrinth-Tests bei 25 ° C unter dunkelrotem Licht (mit LED-Lampen, um mögliche Wärmequelle zu beschränken) auf visuelle Reize zu vermeiden, so viel wie möglich. Achten Sie darauf, die Orientierungen der Y-Labyrinthe wechseln (Geruchsstoff enthalten Rohr auf der linken oder auf der rechten Seite, und Laderohr vorne oder hinten; Abbildung 1C). </li><li> Warten Sie einige Stunden für die Fliegen in der Falle Fläschchen mit dem Geruchsstoff oder Lösungsmittel ein. Graf Fliegen nach 24 Stunden, um die participati erhöhenauf bis zu mehr als 80% und bieten maximale Geruchsindexwert (Simmonet, persönliche Mitteilung). </li><li> Berechnen Sie die resultierende Geruchs Index nach folgender Formel: (Anzahl in den Geruch Rohr - Zahl in der Lösungsmittelrohr) / Gesamtzahl der geladenen Fliegen. </li></ol></li><li> Wash Y-Labyrinth Set-up wie folgt: einweichen abgebaut Set-up in RBS 35 MD Übernachtung. Gründlich mit Leitungswasser abspülen. Schließlich mit VE-Wasser spülen und trocknen lassen. </li></ol> 3. Statistische Analyse der Daten <ol><li> Führen t-Test, eine Einweg-ANOVA oder ein Zwei-Wege-ANOVA Abhängigkeit von Daten und Variablen. </li></ol>

<ol><li>Mombaerts, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Genes+and+ligands+for+odorant%2C+vomeronasal+and+taste+receptors%5BTitle%5D)+AND+%22Nat.+Rev.+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Genes and ligands for odorant, vomeronasal and taste receptors.</a> Nat. Rev. Neurosci. 5, 263-278 (2004).</li>
<li>Silbering, A. F., Benton, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ionotropic+and+metabotropic+mechanisms+in+chemoreception%3A+%27chance+or+design%5BTitle%5D)+AND+%22EMBO+Rep%22%5BJournal%5D)">Ionotropic and metabotropic mechanisms in chemoreception: 'chance or design.</a> EMBO Rep. 11, 173-179 (2010).</li>
<li>Ziegler, A. B., Berthelot-Grosjean, M., Grosjean, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+smell+of+love+in+Drosophila%5BTitle%5D)+AND+%22Front.+Physiol%22%5BJournal%5D)">The smell of love in Drosophila.</a> Front. Physiol. 4, (2013).</li>
<li>Silbering, A. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Complementary+function+and+integrated+wiring+of+the+evolutionarily+distinct+Drosophila+olfactory+subsystems%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Complementary function and integrated wiring of the evolutionarily distinct Drosophila olfactory subsystems.</a> J. Neurosci. 31, 13357-13375 (2011).</li>
<li>Grosjean, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+olfactory+receptor+for+food-derived+odours+promotes+male+courtship+in+Drosophila%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">An olfactory receptor for food-derived odours promotes male courtship in Drosophila.</a> Nature. 478, 236-240 (2011).</li>
<li>Woodard, C., Huang, T., Sun, H., Helfand, S. L., Carlson, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Genetic+analysis+of+olfactory+behavior+in+Drosophila%3A+a+new+screen+yields+the+ota+mutants%5BTitle%5D)+AND+%22Genetics%22%5BJournal%5D)">Genetic analysis of olfactory behavior in Drosophila: a new screen yields the ota mutants.</a> Genetics. 123, 315-326 (1989).</li>
<li>Semmelhack, J. L., Wang, J. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Select+Drosophila+glomeruli+mediate+innate+olfactory+attraction+and+aversion%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Select Drosophila glomeruli mediate innate olfactory attraction and aversion.</a> Nature. 459, 218-223 (2009).</li>
<li>Budick, S. A., Dickinson, M. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Free-flight+responses+of+Drosophila+melanogaster+to+attractive+odors%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Experimental+Biology%22%5BJournal%5D)">Free-flight responses of Drosophila melanogaster to attractive odors.</a> The Journal of Experimental Biology. 209, 3001-3017 (2006).</li>
<li>Martin, F., Charro, M. J., Alcorta, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mutations+affecting+the+cAMP+transduction+pathway+modify+olfaction+in+Drosophila%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Comp.+Physiol.+A%22%5BJournal%5D)">Mutations affecting the cAMP transduction pathway modify olfaction in Drosophila.</a> J. Comp. Physiol. A. 187, 359-370 (2001).</li>
<li>Barron, A. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Anaesthetising+Drosophila+for+behavioural+studies%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Insect+Physiology%22%5BJournal%5D)">Anaesthetising Drosophila for behavioural studies.</a> Journal of Insect Physiology. 46, 439-442 (2000).</li>
<li>Ai, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Acid+sensing+by+the+Drosophila+olfactory+system%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Acid sensing by the Drosophila olfactory system.</a> Nature. 468, 691-695 (2010).</li>
<li>Becher, P. G., Bengtsson, M., Hansson, B. S., Witzgall, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Flying+the+fly%3A+long-range+flight+behavior+of+Drosophila+melanogaster+to+attractive+odors%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Chem.+Ecol%22%5BJournal%5D)">Flying the fly: long-range flight behavior of Drosophila melanogaster to attractive odors.</a> J. Chem. Ecol. 36, 599-607 (2010).</li>
</ol>

Die Autoren haben nichts zu offenbaren.

Unsere Y-Labyrinth-Protokoll basiert auf einem zuvor beschriebenen Protokoll 9 basiert. Allerdings stellen wir zwei wesentliche Unterschiede. Erstens verwenden wir engen Pipettenspitzen, um die Fliegen von der Rückkehr zu verhindern, wenn sie sich entscheiden, in der Ampulle mit dem Lösungsmittel oder Lösungsmittel plus den Geruchsstoff geben. Diese schmalen Spitzen sind auch nützlich, um die Geruchsstoffdiffusion in der Y-Labyrinth begrenzen. Zweitens verwenden wir ein kleiner Laden Fläschchen, um die Fliege...

Chemoreception durch Geschmack oder Geruchssinn ist ein Schlüssel sensorischen Modalität für das Überleben der Tiere. Es gibt dadurch wichtige Hinweise für die Erkennung einer Gefahr oder Nahrungsquellen notwendig, als auch für soziale Interaktionen. Es hilft auch Tieren eine Sex-Partner für ihre Fortpflanzung notwendig finden. Seit mehr als 20 Jahren intensiver Forschung, einschließlich der Nobelpreis ausgezeichneten Arbeiten von Richard Axel und Linda Buck im Jahr 2004 &quot;für ihre Entdeckungen der Geruchsrezeptoren und der Organisation des olfaktorischen Systems&quot;, wurde durchgeführt, um die molekularen und zellulären Grundlagen der offenbaren Riechen 1,2. Eines der beliebtesten Tiermodelle für Wissenschaftler Geruchswahrnehmung zu zerlegen ist D. melanogaster. Dieses Insekt teilt eine ähnliche zelluläre und molekulare Geruchscodierungsstrategie mit Säugetieren. Die wissenschaftliche Gemeinschaft nutzt diverse Verhaltensparadigmen, die Rolle der Geruchsstoffe in diesem Fruchtfliege studieren. Diese Tests umfassen multimodalen Assays wie courtship Tests, bei denen verschiedene Sinnesmodalitäten, einschließlich Geruchssinn, sind wichtig, um männliche Balz 3 entlocken. Andere Tests sind auch entwickelt worden, um die Rolle von Geruchsstoffen genauer anzugehen; Dazu gehören T-Labyrinthe, Y-Labyrinthe, trap-Assays, Vier-Felder-Arenen und Wind-Tunnel 4,5,6,7,8. In diesem Artikel stellen wir eine einfache modifizierte Y-Labyrinth-Test, die robust Riech Antworten bietet mit D. melanogaster. Unser Set-up verwendet End-Tipps im Gegensatz zu einer zuvor beschriebenen Verfahren 9. So hat unsere Y-Labyrinth zwei Vorteile. Erstens, eine Rückkehr in das System vermeidet es einmal die Fliege hat ihre Wahl getroffen. Zweitens schränkt sie den Austausch von Geruchsstoffen in allen Bereichen der Y-Labyrinth. Dieser letzte Vorteil ist wichtig, da Drosophila sind sehr empfindlich auf Luftstrom, der oft verwendet wird, um Geruchs Sättigung zu vermeiden. Zur Einstellung des experimentellen Aufbaus mit einem Luftstrom würde Zeit-und kostenintensiv sein. Daher sind unsere Y-Labyrinth-Test stellt eine efreichend und schnelle Möglichkeit, Riechleistung von Drosophila zu testen.

<table><tbody><tr><td>Drosophila Polystyrol Tube</td><td>VWR europe</td><td>734-2255</td><td>30 x 25 mm&nbsp; Y-Labyrinth</td></tr><tr><td>Drosophila Borosilikatrohr</td><td>Dijon verre</td><td></td><td>95 X 25 mm Y-Labyrinth</td></tr><tr><td>Schaumstoffstopfen</td><td>Dutscher</td><td>999038</td><td> Y-Labyrinth</td></tr><tr><td>Y-förmiger Verbinder</td><td>Europrix</td><td>11020605</td><td> Y-Labyrinth</td></tr><tr><td>100-1.000 &micro; l Pipettenspitzen</td><td>Corning</td><td>4868</td><td>Verbinden Sie die folgenden Pipettenspitzen mit dem Y-förmigen Anschluss. Schneiden Sie 2 Pipettenspitzen in 65 mm Entfernung vom breiten Ende ab und verbinden Sie das schmale Ende (mit einem &sim; 2 mm Öffnung) auf 2 Testfläschchen auf. Diese Öffnungen begrenzen die Kehrtwendungen, sobald die Fliegen in die Röhren eindringen, die die Gerüche enthalten. Schneiden Sie 1 Pipettenspitze 35 mm vom breiten Ende ab und verbinden Sie sie mit dem Beladefläschchen. Y-Labyrinth</td></tr><tr><td>Far-Red LED-Lampe</td><td>Rubin-Lacaque</td><td>0RB180238</td><td>625-630 nm</td></tr><tr><td>Essigsäure</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>45725</td><td></td></tr><tr><td>Phenylessigsäure</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>P16621</td><td></td></tr><tr><td></td><td>Hefeempfindliche Aromen Straßburg</td><td>1018880464</td><td></td></tr><tr><td>Maismehl</td><td>eurogerm</td><td>Farine de ma&iuml; s</td><td></td></tr><tr><td>Agar</td><td>Kalys</td><td>HP-697-25</td><td></td></tr><tr><td>Methylhydroxy 4 benzoat</td><td>VWR international</td><td>25605293</td><td></td></tr></tbody></table>

testen<em&gt; drosophila</em&gt; riechen mit einem y-labyrinth-test

Testing Drosophila Olfaction with a Y-maze Assay

Detektieren von Signalen aus der Umgebung ist für Tiere ihr Überleben zu sichern. Zu diesem Zweck verwenden sie Umweltreize wie Sehen, Mechanorezeption, Hören und chemoperception durch Geschmack, über direkten Kontakt oder durch Geruchssinn, der die Antwort auf einen flüchtigen Molekül größere Reichweite handeln darstellt. Flüchtige chemische Moleküle sind sehr wichtige Signale für die meisten Tiere in der Erkennung von Gefahr-, Nahrungsquelle oder zwischen Individuen kommunizieren. Drosophila melanogaster ist einer der am häufigsten verwendeten biologischen Modellen für Wissenschaftler, die zellulären und molekularen Basis des Geruchssinns erkunden. Um olfaktorischen Fähigkeiten dieser kleinen Insekten zu markieren, beschreiben wir eine veränderte Wahl-Protokoll basiert auf der Y-Labyrinth-Test klassisch mit Mäusen verwendet. Mit Y-Labyrinthe erhaltenen Daten geben wertvolle Informationen, um besser zu verstehen, wie Tiere mit ihren sich ständig verändernden Umwelt umzugehen. Wir führen eine Schritt-für-Schritt-Protokoll zu studieren, dieWirkung von Geruchsstoffen auf Fly Sondierungs Antwort mit diesem Y-Labyrinth-Test.

1D zeigt zwei repräsentative Antworten mit diesem Y-Labyrinth-Test. Canton-S Männer stark zu vermeiden 10% Essigsäure in destilliertem Wasser verdünnt, während sie sich nicht signifikant von 10% Phenylessigsäure vermeiden. Diese Tests werden auf 10 Männer pro Wiederholung zusammen in den Ladefläschchen gegeben basiert. Dieses Protokoll kann manchmal zu großen Standardfehler des Mittelwerts führen. Bei Bedarf ist es möglich, diesen Nachteil, indem 20 Männer pro Wiederholungen statt nur 10. Mathematisch k...

Wir präsentieren eine Choice-Test, um den Einfluss von Geruchsstoffen auf Drosophila Verhalten mit einem Y-Labyrinth-Test offenbaren.

Testen<em&gt; Drosophila</em&gt; Riechen mit einem Y-Labyrinth-Test

Detecting signals from the environment is essential for animals to ensure their survival. To this aim, they use environmental cues such as vision, ...

Das übergeordnete Ziel dieses Verfahrens besteht darin, einen einfachen Y-Labyrinth-Test zur Untersuchung des Geruchssinns bei Drosophila melon Gaster bereitzustellen. Dies wird erreicht, indem die Fliegen zunächst 16 bis 18 Stunden lang entwöhnt werden, damit sie motiviert sind, neue Umgebungen mit flüchtigen Reizen zu erkunden. Der zweite Schritt des Verfahrens besteht darin, den Y-Labyrinth-Aufbau zusammenzustellen, der die Duftquellen auf Filterpapier enthält, beispielsweise Essigsäure in Lösungsmittel im Vergleich zu reinem Lösungsmittel.Der dritte Schritt besteht darin, die Fliegen schnell und vorsichtig in die Beladegefäße einzubringen. Nach mehreren Stunden erfolgt der letzte Schritt, bei dem die Position der Fliegen im Labyrinth ausgewertet wird. Letztendlich können die Ergebnisse eine Reaktion auf das Duftstoffsignal anhand der mit dem Y-Labyrinth gewonnenen Daten zeigen.Wir kamen zunächst auf die Idee für diese Methode, als wir beschlossen, eine einfache und kostengünstige Methode zu entwickeln, um die olfaktorische Reaktion von Stämmen zu testen. Ein Vorteil dieser Technik gegenüber anderen Optionen besteht darin, dass sie den Fliegen ermöglicht, eine Entscheidung zu tr

testing-drosophila-olfaction-with-a-y-maze-assay

Research

Forschung

JoVE Journal

Neuroscience

Neurowissenschaften

In diesem Video-Beitrag beschreiben wir eine neue Methode erlaubt den Bau von Geruchsrezeptoren Gradienten mit stabilen und kontrollierbaren Geometrien. Wir haben kurz zeigen, wie diese Gradienten zu Bildschirm kann für olfaktorische Mängel (vollständiger oder teilweiser Anosmie) verwendet werden und auf subtilere Funktionen der Chemotaxis Verhalten zu studieren.

Hochauflösende Messung von Odor-Driven Behavior in Drosophila-Larven

Behavior-Assays zur Messung der lokomotorischen Funktionen, Lern-und Gedächtnisleistung...

Assaying Bewegungsapparat, Lernen und Gedächtnis Defizite in Drosophila Modelle von Neurodegeneration

Drosophila melanogaster ist eine genetisch und auf der Verhaltensebene praktische Zwecke geeigneten Modells, das verwendet wurde, um die molekularen und zellulären Grundlagen von vielen wichtigen biologischen Prozessen seit über einem Jahrhundert ein zu verstehen. Drosophila wurde auch genutzt, um Einblicke in die genetischen Grundlagen der Fliege Verhalten zu gewinnen.

Methoden zum Test Drosophila Verhalten

Fruchtfliegen haben ein komplexes Geruchssystem, können Hunderte von Geruchsstoffen unterscheiden und ihren Geruchssinn nutzen, um Verhaltensentscheidungen zu treffen. Dieses Video beschreibt den Vier-Wege-Olfaktometer-Assay, eine Methode zur Untersuchung olfaktorischer Verhaltensreaktionen bei Fliegen. Der vorgestellte Protokollclip zeigt, wie man mit Testfliegen umgeht und was die kritischen Schritte bei der Durchführung des Assays sind.

Vier-Wege-Olfaktometer-Assay: Eine Methode zur Bewertung von Geruchsreaktionen bei Drosophila

Dieses Video beschreibt eine Methode zum Testen des olfaktorischen Erkundungsverhaltens bei der Fruchtfliege, das sogenannte Y-Labyrinth. Der vorgestellte Protokollclip zeigt, wie der Assay eingerichtet und durchgeführt wird.

Drosophila Y-Labyrinth-Assay: Eine Methode zur Beurteilung von Geruchsreaktionen bei Fliegen

Die Methode, die erwachsenen Drosophila Assoziativspeicher messen beschrieben. Der Test basiert auf der Fähigkeit der Fliege, einen Geruch mit einem negativen Verstärker (elektrischer Schlag) vorgestellt verbinden und dann erinnern diese Informationen zu einem späteren Zeitpunkt, so dass Speicher gemessen werden kann.

Drosophila Erwachsene olfaktorischen Schock Learning

Eine vertikale, T-Labyrinth Olfaktometer wird zur Bestimmung des Verhaltens Reaktion der Arthropoden beschrieben. Das Olfaktometer ermöglicht der Experimentator, Entscheidungen von Versuchspersonen durchgeführt messen, wenn zwei potenzielle Geruch Feldern ausgesetzt. Beide Attraktion und Abstoßung von Geruchsstoffen kann mit diesem Gerät gemessen werden.

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In diesem Video-Artikel beschreiben wir einen automatisierten Test, um die Wirkung von Hunger oder Sättigung auf olfaktorische abhängige Nahrungsmittel Suchverhalten in der Erwachsenen Obst messen Drosophila melanogaster.

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Einfache Assay zur Quantifizierung von Sozialvermeidung in Drosophila melanogaster

Wir beschreiben hier eine Verhaltensaufbau- und Datenanalysemethode zur Untersuchung der Geruchsreaktionen von bis zu 100 Essigfliegen (Drosophila melanogaster). Dieses System kann mit einzelnen oder mehreren olfaktorischen Reizen verwendet werden und kann für die optogenetische Aktivierung oder Stilllegung neuronaler Untergruppen angepasst werden.

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Die Autismus-Spektrum-Störung (ASS) ist mit einer Beeinträchtigung des sozialen und kommunikativen Verhaltens und dem Auftreten von sich wiederholendem Verhalten verbunden. Um die Wechselbeziehung zwischen ASD-Genen und Verhaltensdefiziten im Drosophila-Modell zu untersuchen, werden in dieser Arbeit fünf Verhaltensparadigmen zur Untersuchung von sozialem Abstand, Aggression, Balz, Pflege und Gewöhnungsverhalten beschrieben.

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