Intracerebroventricular Viral Injektion der Neonatal Maus Gehirn für anhaltenden und verbreiteten Neuronale Transduction

Das übergeordnete Ziel dieses Verfahrens ist es, Neuronen im gesamten Gehirn viral zu transduzieren. Dies wird durch Kryo-Anästhesie von neugeborenen Welpen erreicht, gefolgt von der Überführung des Neugeborenen in das gekühlte Stadium zur Injektion. Identifizieren Sie als Nächstes die Injektionsstelle, an der die lateralen Ventrikel zwischen der Lambda-Naht und jedem Auge oder lateral von der sagittalen Naht auf halbem Weg zwischen Lambda und Bgma anvisiert werden.

Der letzte Schritt besteht darin, die Nadel in der richtigen Tiefe einzuführen und langsam bis zu zwei Mikroliter Viruslösung in den Seitenventrikel jeder Hemisphäre zu infundieren. Letztendlich wird eine Fluoreszenzmarkierung oder Immunfluoreszenz für das interessierende Gen verwendet, um das transgene Expressionsmuster zu zeigen, das sich aus der intraventrikulären Injektion ergibt. Im Allgemeinen werden Personen, die mit dieser Technik noch nicht vertraut sind, Schwierigkeiten haben, die Seitenventrikel genau zu treffen.