Name: Hornhautspendergewebe Vorbereitung für Descemetschen Membrane Endothelial Keratoplastik (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2014-09-17T14:00:00.000+00:00
Duration: 10 min 46 s
Description: Erfahren Sie die kontrollierte manuelle Gewebedissektion zur Vorbereitung von Hornhautendothelgewebe für die DMEC-Insertion. Diese sichere Methode ermöglicht die präzise Trennung von Descemet-Membran und Stroma.

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1. Aufbau der sterilen Bereich <ol><li> Don richtige Kleidung einschließlich Kappe und Maske. Augenschutz tragen, wenn im Bearbeitungsraum. </li><li> Bereiten Sie den Bearbeitungsbereich. Bei Verwendung einer Verarbeitungsraum aufrechtzuerhalten kontinuierlichen Betrieb des Ventilators um einen positiven Druck in dem Raum zu schaffen. </li><li> Sammeln Sie alle Lieferungen. Überprüfen Sie Ablaufdaten, die Unversehrtheit der Verpackung und Sterilisation Anzeige. </li><li> Hände waschen und Don nicht sterilen Handschuhen. </li><li> Öffnen Sie die sterile Sets einen sterilen Bereich zu etablieren. Bei Verwendung eines Verarbeitungsraum, legen Sie die Kits auf den Tisch und aseptisch öffnen die Wraps. Die Außen 1 ½ Zoll der Umhüllung als Teil des sterilen Feldes zu nutzen nicht wie dieses Segment wird als unsteril. </li><li> Unter aseptischen Bedingungen, offen und fallen Sterilgut auf sterilen Bereich, es sei denn bereits Teil der vorgefertigten Satz. </li><li> Mikroskop zu bewegen, so dass es über dem sterilen Bereich ist, schalten Sie Lichtquelle des Mikroskops, und stellen Okulare wie nötig. </li><li> OBTain Hornhautgewebe (in Konservierungsmedien) und Platz neben dem vorbereiteten sterilen Verarbeitungsbereich abgezogen werden. Lösen Kappe Sichtkammer und lassen Sie es auf der Oberseite der Sichtkammer Basis ohne Faden engagiert Ruhe. Entsorgen Sie nicht sterilen Handschuhen. </li><li> Offen ein Paar sterile Handschuhe und sterile Kleid mit Handtuch. </li><li> Chirurgische Gestrüpp. Setzen Sie auf sterile Kittel, sterile Handschuhe dann. </li><li> Geöffneten Gerät Boxen, so dass alle Lieferungen sind zugänglich. Öffnen feuchtigkeitsundurchlässiger drapieren, um den Arbeitsbereich zu erstellen. </li><li> Bringen Sie Nadel in eine 5-ml-Spritze. Mit Hilfe eines Gefäßklemme, bereiten Sie die 30 G-Nadel, indem eine Kurve 1 mm von der Fase, und eine andere Kurve 1 mm von der Basis (eine &quot;S&quot; Form zu bilden). </li><li> Montieren Sie die Glasspritze für die Trypanblau-Färbung, indem Sie den Kolben in die Spritze und Finger Anziehen der Kolben. Befestigen Sie die Kanüle. </li><li> Befestigen Sie die Kanüle zu einer ausgewogenen Salzlösung (BSS) Flasche. </li><li> Trennen Sie die Trepan Punsch aus der Vakuumblockund beiseite stellen. Zentrierung des Vakuumblocks in dem Sichtfeld des Mikroskops. </li><li> Bringen Sie den Vakuumblock in den Fokus, indem die Einstellungen des Mikroskops. </li></ol> 2. Verfahren für die Spendergewebe Vorbereitung <ol><li> Lift Deckel mit Sichtkammer Folie Platz als Barriere. Mit der anderen Hand und mit einer Pinzette vorsichtig fassen Hornhaut durch Lederhaut Felge zu Hornhaut zu entfernen. Deckel der Sichtkammer zu ersetzen. </li><li> Die Saug-Spritze vollständig niederdrücken, dann legen Hornhaut epithelialen Seite nach unten auf dem Vakuumblock und sicherzustellen, dass es zentriert ist. (Figur 1) </li><li> Senken Sitzring auf den Vakuumblock mit den Führungspfosten. Engage Vakuum durch langsames Lösen Kolben der Spritze Sog. Entfernen Sie den Sitzring und beiseite stellen. (Abbildung 2). </li><li> Führt eine Teil Trepanation, um durch die Descemet-Membran punkten. </li><li> Passen Mikroskop Zoom und Fokus, so dass das Gewebe gut visualisiert. </li><li&gt; Kippen Sie den Vakuumblock und verwenden Sie einen sterilen Tupfer Speer am Limbus platziert, um überschüssige Medium zu entfernen. (Figur 3) </li><li> Platzieren genug Fleck am Limbus, um die Kante der erzielte Descemet-Membran zu färben. Lassen Sie den Fleck auf dem Endothel 60-90 sec bleiben. (Figur 4) </li><li> Fleck entfernen: <ol><li> Neigen Sie den Vakuumblock, um den Fleck aus der Hornhaut und auf Gaze gießen. </li><li> Mit den OP-Speere, um überschüssige Fleck von der Limbus der Hornhaut zu entfernen, dabei das Endothel nicht zu berühren. (Figur 5) </li></ol></li><li> Verwenden Sie mehrere Tropfen BSS, um die Hornhaut des Farblösung spülen und sterilen Tupfer Speere, um überschüssige BSS entfernen. (Figur 6) </li><li> Legen Sie 1-2 Tropfen BSS auf der Lederhaut Rand, um Gewebe vor dem Austrocknen zu verhindern. Wiederholen des gesamten Verfahrens wie nötig. </li><li> Führen Teilzerlegung der Descemet-Membran: <ol><li> Dort beginnt, wo der Schlauch anschließens mit der Vakuumblock mit offenen Zangen, legen Sie eine Spitze an den Rand der Bruchkerbe und sanft separaten Descemet-Membran und Endothel vom Stroma. (Figur 7). </li><li> Separate Descemet-Membran und Endothel nicht mehr als 1 mm von der Kante hat und weiterhin Dissektion um 360 ° um. (Abbildung 8). </li><li> Hinweis Standort jedes Mikrorisse, indem Sie einen Punkt auf der Vakuumblock mit der Haut Marker. HINWEIS: Wenn der Trepan nicht vollständig durch Descemet-Membran zu durchdringen, verwenden Sie die abgeschrägte Kante der vorbereiteten 30 G-Nadel, die Partitur durch Descemet-Membran, wo notwendig, durch eine zweite Anwendung der Färbung folgte nach Bedarf abzuschließen. Wenn Descemetschen Membran Haftfähigkeit behindert die Teilzerlegung, entfernen Sie das Endothel außerhalb der trephinated Bereich nach Bedarf. </li></ol></li><li> Verwenden einer Pinzette, um alle Tags, die das Endothel Kerbe überlappen zu entfernen. </li> &lt;li&gt; Betrachten Sie die Lage der zuvor markierten Mikrorisse und drehen Sie den Vakuumblock, so dass der größte ist bei 6 Uhr. Dadurch wird das Gelenk der Klappe zu werden. </li><li> Mit der Pinzette, fassen Sie die Descemet-Membran um 12 Uhr. Trennen Sie vorsichtig die Descemet-Membran vom Stroma durch Abziehen in Richtung des Scharniers. Erstellen Sie das Scharnier durch Anhalten der Trennung 2 mm aus der Partitur Marke. HINWEIS: Randkanten der Klappe beginnen, während der Trennung zu blättern. (Figur 9). </li><li> Legen Sie vorsichtig die Klappe wieder an Ort und Stelle auf dem Stroma. Verwenden BSS und Tupfer Speere an das Endothel ausrollen und wieder in seine ursprüngliche Position. (10A-C) </li><li> Entfernen von Restflüssigkeit zwischen Descemet-Membran und Stroma mit sterilen Tupfer Speere, so dass die Klappe in Position bleibt. (Figur 11) </li><li> Verwenden sterilen Tupfer Speere aus der Lederhaut in der Nähe des Scharniers tanken überschüssige Feuchtigkeit. Verwenden Sie die Haut Marker zu einem Unentschiedenn Pfeilspitze auf der Lederhaut Felge auf der Mitte des Scharniers, entfernen Sie überschüssige Tinte mit einem sterilen Tupfer Speer. (Figur 12) </li><li> Frei Vakuum durch Drücken des Kolbens der Spritze, um den Vakuumblock. Während Vakuum ausgerückt ist, verwenden Pinzette Hornhaut von der Vakuumblock entfernen. </li><li> Lift Deckel mit Sichtkammer Folie Platz als Barriere. Legen Sie die Hornhaut in der Sichtkammer, Endothelzellen Seite nach oben und ersetzen Deckel der Sichtkammer. </li><li> Wiederholen Sie die obigen Verfahrensschritte mit Mate Hornhaut, falls zutreffend. Verwenden Sie Gaze, um das Vakuum Block vor der Verarbeitung des zweiten Gewebe reinigen. </li><li> Ziehen Sie die Betrachtungskammerdeckel (en) und Gewebe zu entfernen aus dem Bearbeitungsbereich. </li><li> Brechen die sterilen Bereich durch die Anordnung der Elemente nach Biohazardous Abfallwirtschaftsplan. Kontaminierten Handschuhen und Kleid zu entfernen. Hände waschen und Don nicht sterilen Handschuhen. </li><li> Führen postSchnittSpaltLampe Auswertung und Augenmikroskopie der Hornhaut (en)und notieren Sie die Ergebnisse. </li></ol>

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Hassan Tausif und Dr. Navasuja Chandrasekaran haben nichts zu offenbaren. Drs. Mian, Shtein, und Woodward sind medizinische Direktoren für die Michigan Eye Bank. Herr Mavin, Mr. Titus, und Frau Johnson sind Mitarbeiter von Midwest Eye Banks.

Die Hornhautschicht Endothelzellen spielt eine entscheidende Rolle bei der Aufrechterhaltung der Hornhaut Klarheit durch Austrocknung. Erkrankungen der Endothelzellen in signifikanten Sehstörungen führen. DMEK zielt darauf ab, die kranken Endothelzellen mit einem Spendertransplantat aus Descemet-Membran und Endothel-Zellschicht zu ersetzen. Spendergewebepräparation mit einem intakten DM und ausreichende Endothel-Zellzahl entscheidend für das Überleben des Transplantatgewebes. Reißen von DM während Spendergewebe Präparat...

Endothelialen Keratoplastik (EK) hat sich rasch ersetzt Keratoplastik (PKP) als Verfahren der Wahl für die Behandlung von Krankheiten endothelialen Anteil von über 50% aller in den Vereinigten Staaten durchgeführt Transplantationen in 2012 6. PKP wird durch längere visuelle Rehabilitation mit hohem Astigmatismus begrenzt und Brechungs Instabilität, Verlust der Integrität und Globus Naht-Komplikationen. EK Verfahren frühen Generation, einschließlich tiefer Lamellen Endothelial Keratoplastik (DLEK) beteiligt manuelle Präparation der Hornhauttransplantation mit Stroma Teildicke Spendergewebe. Diese Verfahren wurden in die Transplantation Spender Endothelgewebe unter Wahrung einer intakten Hornhautoberfläche erfolgreich waren aber technisch anspruchsvoll und führte beschränkt beste korrigierte Sehschärfe aufgrund einer unregelmäßigen Hornhautlamellen Schnittstelle 1. Die aktuelle EK Verfahren der Wahl ist Descemetschen Stripping Endothelial Keratoplastik (DSEK), die Hornhaut Clar bietetkeit mit schneller Erholung der Vision, minimiert postoperative Brechungsfehler und Astigmatismus, und verringert das Risiko von traumatischen Wunde Dehiszenz unter Beibehaltung der Hornhautoberfläche 7. Dieses Verfahren schließt die Entfernung der erkrankten Descemet-Membran und Endothel und Ersatz mit partieller Dicke Spenderhornhautgewebe, umfassend ein neues Endothelzellschicht. Die Spender-Hornhaut wird mit einem Mikrokeratom präpariert, um den hinteren Gewebe transplantiert 8 vorzubereiten. Vorbereitung des Spendergewebes durch die Augenbanken war maßgeblich am rasanten Wachstum und wohl auch der Erfolg dieses Verfahrens. Die in der Nähe von 16-fache Steigerung der DSEK Verfahren in den Vereinigten Staaten zwischen 2005 und 2012 entspricht fast der Hälfte des Gewebes derzeit von den Banken ins Auge 6 hergestellt. Obwohl DSEK kann die Sehschärfe bis 20/40 oder besser zu verbessern, haben die meisten Patienten, die nicht 20/20 Vision zu erreichen durch Stroma-Schnittstelle Dunst und erhöhte LichtStreuung von der Zugabe von Spender Stromagewebe 7. Die EK Operationstechnik hat Descemet-Membran Endothelial Keratoplastik (DMEK), die Transplantation von Spender nur Descemet-Membran (DM) und Endothel beinhaltet fortgeschritten ist. Diese Vorgehensweise hat einen höheren Anteil an Patienten, die 20/20 Vision, schnellere visuelle Wiederherstellung und ein geringeres Risiko von endothelialen Ablehnung 9 zu erreichen. Allerdings ist Vorbereitung der Spendergewebe größere Herausforderung aufgrund der dünneren Transplantat Dimensionen.

<table><tbody><tr><td>VisionBlue</td><td>D.O.R.C., Zuiland, Niederlande</td><td>NA</td><td></td></tr><tr><td>Barron Vakuum-Stanze</td><td>Katena, Denville, New Jersey</td><td>K20-2112</td><td></td></tr></tbody></table>

hornhautspendergewebe vorbereitung für descemetschen membrane endothelial keratoplastik

Corneal Donor Tissue Preparation for Descemet's Membrane Endothelial Keratoplasty

Descemet-Membran Endothelial Keratoplastik (DMEK) ist eine Form der Hornhauttransplantation, in der nur eine einzige Zellschicht, das Endothel, zusammen mit seiner Basalmembran (Descemet-Membran) auf hinteren Stroma des Empfängers 3 eingeführt. Im Gegensatz zu Descemetschen Stripping Automated Endothelial Keratoplastik (DSAEK), wo zusätzliche Spender Stroma eingeführt wird, wird keine unnatürliche Stroma-zu-Stroma-Schnittstelle erstellt. Als Ergebnis wird die natürliche Anatomie der Hornhaut so viel wie möglich die eine verbesserte Erholungszeit und die Sehschärfe 4 erhalten. Endothelialen Keratoplastik (EK) ist das Verfahren der Wahl für die Behandlung der endothelialen Dysfunktion. Die Vorteile der EK sind schnelle Wiederherstellung des Sehvermögens, die Erhaltung der Integrität und Augen minimalen Brechungsänderung durch Verwendung eines kleinen, peripheren Einschnitt 1. DSAEK nutzt Spendergewebe mit Teildicke Stroma und Endothel vorbereitet. Die schnelle success und Nutzung dieses Verfahrens kann die Verfügbarkeit von Augen Bank zugerechnet werden vorbereitet vorgeschnittenen Gewebe. Die Vorteile der Augenbank Vorbereitung der Spendergewebe umfassen Beseitigung der Notwendigkeit für spezialisierte Geräte im Operationssaal und der Verfügbarkeit von Spendergewebe wieder bei Gewebe Perforation während der Vorbereitung. Darüber hinaus können hohe Volumen Herstellung von Spendergewebe durch Augenbank Techniker verbesserte Qualität des Spendergewebes bereitzustellen. DSAEK kann Visus durch Schaffung einer Schnittstelle zwischen der Stroma-Spender und Empfänger Hornhaut begrenzt haben. Die Beseitigung dieser Schnittstelle mit der Transplantation von Spender nur Descemet-Membran und Endothel in DMEK können visuelle Ergebnisse zu verbessern und Komplikationen zu reduzieren, nachdem EK 5. Ähnlich DSAEK, langfristigen Erfolg und die Akzeptanz der DMEK ist abhängig von der Verfügbarkeit von Leichtigkeit vorgeschnitten, Augen-Bank vorbereitet Spendergewebe. Hier eine schrittweise Annäherung an Spendergewebe, die eine gewisse Vorbereitung Barri reduzieren können präsentieren wirERS Augen Banken stellen bei der Bereitstellung von DMEK-Transplantate.

Korrekte Trennung von DM und Endothel von Stroma ist von wesentlicher Bedeutung bei der Vorbereitung vorgeschnittenen Gewebe für DMEK. Fünfzig Spenderhornhäute mit einem Durchschnittsalter von 65 ± 6 Jahre (55-75), der Tod um die Verarbeitungszeit von 5,9 ± 2,3 Tage (Bereich 1-10) und endotheliale Zelldichte (ECD) von 2.616 ± 321 Zellen / mm 2 ( Bereich 2,049-3,247) wurden verwendet, um die Machbarkeit und Reproduzierbarkeit der chirurgischen Präparationstechnik durch zwei Augenbank Techniker beurteilen. Die ...

Endothelialen Keratoplastik ist eine chirurgische Technik ständig weiterentwickelt, wie Fortschritte in der Transplantations führen dünnere Transplantate mit jeder Folge ein. Hier präsentieren wir eine Technik zur kontrollierten Hand Gewebedissektion, um sichere und reproduzierbare Trennung von Endothel und Descemet-Membranen von Spender korneoskleralen Tasten für die Transplantation 2 zu ermöglichen.

Hornhautspendergewebe Vorbereitung für Descemetschen Membrane Endothelial Keratoplastik

Descemet&#8217;s Membrane Endothelial Keratoplasty (DMEK) is a form of corneal transplantation in which only a single cell layer, the corneal endothelium, ...

Das übergeordnete Ziel dieses Verfahrens ist es, Demas-Endothelgewebe für die DMEC-Insertion vorzubereiten. Dies wird erreicht, indem zuerst eine partielle Trepanation durchgeführt und eine Beize aufgetragen wird, um sie sichtbar zu machen. Als nächstes wird eine 360-Grad-Teildissektion an der TATed-Linie zwischen der S-Stroma- und der Demas-Membran durchgeführt.Dann wird die Demas-Membran manuell aus dem Stromabett geschält, so dass nur ein kleines Scharnier befestigt bleibt. Schließlich wird die Demas-Membran in das Stromabett zurückgeführt und die Restflüssigkeit zwischen ihnen entfernt. Letztendlich ist die Demas-Membran-Endothel-Keramik-Plastik mit vorgeschnittenen Gewebepräparaten eine sichere und wiederholbare Form der kontrollierten manuellen Gewebedissektion, die zur Behandlung von Endothelerkrankungen eingesetzt wird.Der Hauptvorteil der Augenbank, die das dezimierte Spendergewebe der Membranendothel-Keramik vorbereitet, besteht darin, dass sie das Risiko eines Gewebeverlusts bei der Vorbereitung reduziert und die Effizienz im Operationssaal für den Chirurgen verbessert. Im Allgemeinen können Chirurgen bei jeder dieser Techniken anfangs Schwierigkeiten haben, da es schwierig sein kann, ein Reißen der Demas-Membran zu vermeiden, insbesondere während der partiellen Dissektion und des Desme-Strippings. Die visuelle Demonstration dieser Technik ist von entscheidender Bedeutung, da die Trennschritte schwer zu beschreiben sind. Insbesondere die erfolgreiche Abgrenzung zwischen Deses und Stroma Das Verfahren wird von Lauren Johnson, der Leiterin der Gewebeverarbeitung aus dem Labor in Midwest Ibis, Michigan, demonstriert.Um mit der Vorbereitung von Demas Endothelgewebe zu beginnen, ziehen Sie die richtige Kleidung an, einschließlich Mütze und Maske, und tragen Sie im Verarbeitungsraum einen Augenschutz. Bereiten Sie den Verarbeitungsraum vor, indem Sie zuerst den Lüfter einschalten, um einen Überdruck zu erzeugen. Organisieren Sie alle Vorräte, indem Sie das Verfallsdatum, die Unversehrtheit der Verpackungen und die Sterilisationsindikatoren mit frisch gewaschenen Händen überprüfen, und richten Sie mit sterilen Handschuhen ein steriles Feld ein, indem Sie die Wraps aseptisch öffnen.Vermeiden Sie es, die äußeren anderthalb Zoll der Hülle als Teil des sterilen Feldes zu verwenden, da dieser Teil als unsteril gilt, und lassen Sie die sterilen Gegenstände auf das sterile Feld fallen. Platzieren Sie anschließend das Mikroskop über dem sterilen Feld. Schalten Sie die Lichtquelle ein und passen Sie die Okulare nach Bedarf an, während Sie das zu entfernende Hornhautgewebe entnehmen.Stellen Sie es neben den vorbereiteten sterilen Verarbeitungsbereich. Lösen Sie die Kappe der Betrachtungskammer und legen Sie sie ohne Fäden auf die Betrachtungskammer und entsorgen Sie die unsterilen Handschuhe. Als nächstes öffnen Sie ein Paar sterile Handschuhe und einen sterilen Kittel mit Handtuch.Führen Sie ein chirurgisches Peeling durch, bevor Sie den sterilen Kittel und dann die sterilen Handschuhe anziehen. Öffnen Sie die Instrumentenkästen, so dass alle Vorräte zugänglich sind, und öffnen Sie ein feuchtigkeitsdurchlässiges Vorhang, um den Arbeitsbereich zu schaffen. Montieren Sie die Glasspritze für den losen Trian-Fleck, indem Sie den Kolben in die Spritze stecken und den Kolben mit den Fingern festziehen.Befestigen Sie eine Kanüle an der Trian Blue Spritze und eine zweite Kanüle an der Flasche mit der ausgewogenen Salzlösung. Trennen Sie den TR-Fine-Stempel vom Vakuumblock und legen Sie ihn beiseite. Zentrieren Sie dann den Vakuumblock im Sichtfeld des Mikroskops, bevor Sie die Mikroskopeinstellungen anpassen, um den Vakuumblock scharf zu stellen.Heben Sie mit einem Folienquadrat als Barriere den Deckel der Betrachtungskammer mit der anderen Hand und mit einer Pinzette an. Fassen Sie die Hornhaut am Sklerarand, um die Hornhaut vom Speichermedium zu entfernen. Setzen Sie dann den Deckel der Betrachtungskammer wieder auf und drücken Sie eine Saugspritze vollständig ein.Legen Sie dann die Hornhautepithelseite nach unten auf den Vakuumblock und stellen Sie sicher, dass er zentriert ist. Senken Sie den Sitzring vorsichtig mit den Führungspfosten auf den Blocksauger ab. Entfernen Sie den Sitzring und legen Sie ihn beiseite, wobei das Gewebe fokussiert und unter dem Mikroskop gut sichtbar ist.Führen Sie eine partielle Trepanation durch, um die Demas-Membran zu durchbohren. Kippen Sie den Vakuumblock und verwenden Sie einen sterilen Tupfer, der am Limbus platziert wird, um überschüssiges Medium zu entfernen. Platzieren Sie als Nächstes genügend Beize auf dem Limbus, um den Rand der Partie zu färben.Die Demas-Membran lässt den Fleck 60 bis 90 Sekunden lang auf dem Endothel verbleiben. Verwenden Sie dann die chirurgischen Speere, um überschüssige Flecken aus dem limbalen Bereich der Hornhaut zu entfernen. Achten Sie darauf, das Endothel nicht mit mehreren Tropfen BSS zu berühren.Spülen Sie die Hornhaut von der Färbelösung ab und verwenden Sie sterile Tupferstangen, um überschüssiges BSS zu entfernen. Geben Sie dann ein bis zwei Tropfen BSS auf den Sklerarand, um ein Austrocknen des Gewebes zu verhindern. Wiederholen Sie dies bei Bedarf während des gesamten Eingriffs, um eine partielle Dissektion der Desme-Membran mit offener Pinzette durchzuführen, platzieren Sie eine Spitze am Rand der Markierung und trennen Sie die Desme-Membran und das Endothel vorsichtig vom Stroma.Trennen Sie die Membran und das Endothel des Descemets nicht mehr als ein bis zwei Millimeter von der geritzten Kante und setzen Sie die Dissektion um 360 Grad fort. Notieren Sie sich die Position von Mikrorissen, indem Sie mit einem Hautmarker einen Punkt auf dem Vakuumblock platzieren. Verwenden Sie eine Pinzette, um alle Endothelmarkierungen zu entfernen, die die Wertungsmarkierung überlappen.Lokalisieren Sie dann die zuvor markierten Mikrorisse und drehen Sie den Vakuumblock so, dass der größte bei sechs Uhr liegt. Dies wird zum Scharnier der Klappe. Fassen Sie dann mit der Pinzette die Membran des SMA bei 12 Uhr.Trennen Sie sich dann vorsichtig vom S-Stroma, indem Sie es in Richtung des Scharniers schälen. Erstellen Sie das Scharnier, indem Sie den Abstand zwei Millimeter von der Ritzung entfernt stoppen. Legen Sie die Klappe vorsichtig wieder auf das S-Stroma.Verwenden Sie BSS und Tupfspeere, um das Endothel zu entschlüsseln und in seine ursprüngliche Position zurückzubringen. Entfernen Sie die Restflüssigkeit zwischen der Demas-Membran und dem Stroma, so dass die Klappe in Position bleibt. Saugen Sie überschüssige Feuchtigkeit aus der Sklera in der Nähe des Scharniers auf.Zeichnen Sie mit einem Hautmarker eine Pfeilspitze auf den Sklera-Rand, richten Sie sie auf die Mitte des Scharniers und entfernen Sie überschüssige Tinte. Lassen Sie das Vakuum los, indem Sie den Kolben der Spritze, die mit dem Vakuumblock verbunden ist, drücken, während das Vakuum deaktiviert wird. Entferne die Hornhaut mit einer Pinzette aus dem Vakuumblock und verwende ein Folienquadrat als Barriere.Heben Sie den Deckel der Betrachtungskammer an. Legen Sie die Hornhaut mit der Endothelseite nach oben in die Betrachtungskammer. Setzen Sie den Deckel wieder auf und ziehen Sie ihn fest.Nachdem Sie Gewebe aus dem Verarbeitungsbereich entfernt und das sterile Feld gemäß dem Textprotokoll zerlegt haben, führen Sie schließlich eine nachträgliche Spaltlampenbewertung und eine Spiegelmikroskopie der Hornhäute durch und zeichnen Sie die Befunde auf. 50 Spenderhornhäute mit einem Durchschnittsalter von 65 Jahren plus oder minus sechs Jahren Tod bis zur Verarbeitungszeit von 5,9 plus oder minus 2,3 Tagen, und eine Endothelzelldichte oder ECD von 2.616 plus oder minus 321 Zellen pro Quadratzentimeter wurden verwendet, um die Machbarkeit und Reproduzierbarkeit der chirurgischen Präparationstechnik zu beurteilen. Die Erfolgsrate betrug 72 % in den ersten 25 Fällen und stieg in der zweiten Hälfte auf 80 % mit einer Gesamterfolgsrate von 76 % Point by Serial Correlation oder RPB wurde verwendet, um die Korrelation mit präoperativen Gewebefaktoren zu bestimmen.Das Alter des Spenders, der Tod bis zur Verarbeitungszeit und die ECD korrelierten nicht mit der erfolgreichen Präparation des Gewebes. Die ECD nach der Vorbereitung von 2.676 plus oder minus 284 unterschied sich nicht signifikant von der vor der Vorbereitung. ECD. Erfolglose Ergebnisse resultierten aus DM-Rissen und schwerem Zellverlust.Diese Fälle waren auch mit Schwierigkeiten bei der Wiedermontage des Gewebes und unvollständiger Färbung der dm Edge iBank verbunden. Die Bewertung der Patientenergebnisse von neun DEC-Eingriffen, die von fünf Chirurgen durchgeführt wurden, zeigte, dass in einem Fall an einem Tag und einer Woche ohne Blasenbildung eine Luxation auftrat. Die Sehschärfe reichte von 2.400 bis zur Lichtwahrnehmung und verbesserte sich um eine Woche auf 2.103. Einmal gemeistert, kann dieses Verfahren in nur 20 Minuten durchgeführt werden, und mit etwas Übung kann die Zeit, in der das Gewebe aus dem ursprünglichen Medium bleibt, nur 10 Minuten betragen.Bei diesem Verfahren ist es wichtig, Hornhautgewebe von Spendern über 45 Jahren zu gewinnen. Das minimiert das Risiko, die Bienenmembran zu zerreißen. Nach diesem Verfahren kann eine zusätzliche Verarbeitung durchgeführt werden, wie z. B. das Aufbringen von Orientierungsmarkierungen, die identifizieren, welche Seite die stromale Seite der Membran nach ihrer Entwicklung ist.Diese Technik hat den Weg für eine schnelle Akzeptanz von DMEC durch Hornhautchirurgen geebnet.

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Research

Forschung

JoVE Journal

Medicine

Medizin

Das Papier beschreibt ein vereinfachtes Verfahren zur Hornhaut-und Verbrauchssteuern zu retinalen Gewebe aus dem Augapfel von menschlichen Leichen Spendern auszuhöhlen. Die hier beschriebene Technik wird verbrauchsteuerpflichtige guter Qualität zu Geweben zur Transplantation oder chirurgische Zwecke oder Forschungszwecke ohne Beschädigung anderer Gewebe des Augapfels verwendet werden zu helfen.

Ein vereinfachtes Verfahren für<em&gt; In-situ</em&gt; Exzision der Hornhaut und der Netzhaut Ausweiden von Gewebe aus menschlichen Augapfel

Endothelial Hornhauttransplantation ist eine chirurgische Technik zur Behandlung von Krankheiten Hornhautrückfläche. Mechanischen Mikrokeratom Dissektion von Gewebe führt zu dünneren, symmetrische Transplantate vorzubereiten mit weniger Endothelzellverlust und verbesserten Ergebnissen. Dissektionen können am Auge durchgeführt Bank vor der Hornhaut-Transplantation Chirurgie werden.

Corneal Spendergewebe Vorbereitung für Endothelial Keratoplasty

Wir berichten über ein Verfahren zur Herstellung von Mikrotaschen in elektro Membranen, bei denen auf das Zellverhalten zu untersuchen. Insbesondere beschreiben wir eine Kombination von Mikrostereo und Elektro zur Herstellung von PLGA (Poly (lactid-co-glycolid)) Hornhaut Biomaterial Geräten mit Mikromerkmalen ausgestattet.

Kombination von Mikrostereolithographie und Elektrospinnen auf Membranen Ausgestattet mit Nischen für die Hornhautregeneration Produzieren

Mäuse wurden als Modell für die Untersuchung vieler Formen der Transplantation verwendet, einschließlich der Hornhauttransplantation.  In diesem Bericht beschreiben wir ein Mausmodell sowohl für die akute als auch für die späte Hornhauttransplantation.

Murine Hornhauttransplantation: Ein Modell, das die häufigste Form der Organtransplantation Studieren

Bei der Endotheltransplantation wird ein reines Laserverfahren vorgeschlagen. Die Operationstechnik basiert auf der Verwendung eines Femtosekundenlasers zur Aufbereitung des Spendergewebes. Anschließend wird die Laserschweißtechnik verwendet, um das Donorenendothel in der richtigen Position zu fixieren.

Ein &quot;All-Laser&quot; Endothelial Transplant

Ein Beispiel für eine adenovirale Gentherapie bei menschlichen diabetischen Organkulturen wird vorgestellt, um die verzögerte Wundheilung und die deutlich reduzierte Expression von epithelialen Stammzellmarkern in diesen Hornhäuten zu normalisieren. Es wird auch die Optimierung dieses Prozesses in stammzellangereicherten limbalen Epithelkulturen beschrieben.

Adenoviralen Gentherapie für diabetische Keratopathie: Auswirkungen auf die Wundheilung und Zellmarker Expression in Human Organ kultivierten Hornhäute und Limbale Epithelial Stammzellen

Dieses Protokoll beschreibt eine neuartige dreidimensionale in-vitro- Modell, wo Stromazellen Hornhautzellen und differenzierten neuronalen Zellen zusammen kultiviert werden, bei der Untersuchung und das Verständnis der Wechselwirkungen der beiden Zelltypen zu unterstützen.

Hornhautgewebe Engineering: Eine In-vitro- Modell der Stromazellen Nerv Interaktionen der menschlichen Hornhaut

Wir beschreiben den Einsatz der optischen Vollfeld-Kohärenzmikroskopie als eine Methode zur qualitativ hochwertigen Beurteilung des Hornhautspenderstromas. Dieses Protokoll kann verwendet werden, um Merkmale zu identifizieren, die auf Gesundheit oder Krankheit hinweisen, und zielt darauf ab, das Screening und die Auswahl von Spendergewebe und damit die Ergebnisse der Keratoplastik zu verbessern.

Optische Vollfeld-Kohärenzmikroskopie zur histologischen Analyse von Stromamerkmalen in Hornhauttransplantaten

Hier stellen wir ein Protokoll zur Ablösung von hornhauten Endothelzellen (CEC) von Descemets Membran (DM) unter Verwendung eines Neodym:YAG (Nd:YAG) Lasers als Ex-vivo-Krankheitsmodell für bullöse Keratopathie (BK) vor.

Entwicklung eines nichtinvasiven, laserunterstützten Versuchsmodells des cornealen Endotheliaalzellverlustes

Dieses Protokoll beschreibt die kritischen Schritte, die erforderlich sind, um hornhaut-Endothelzellkulturen aus Expflanzen von menschlichem oder Schafgewebe zu etablieren und zu züchten. Ein Verfahren zur Subkulierung von kornealen Endothelzellen auf membranösen Biomaterialien wird ebenfalls vorgestellt.

Wachstum von Human- und Schafhornhaut-Endothelzellschichten auf Biomaterialmembranen

Descemet's Stripping Only ist ein experimentelles Verfahren, bei dem Patienten mit zentralen Hornhautguttae, die aus Fuchs Endothelial Corneal Dystrophy resultieren, Descemets Membran für periphere Zellen abgestreift haben, um die Endothelschicht zu regenerieren. Wir stellen eine neuartige Methodik vor, die DSO in dystrophischen menschlichen Hornhäuten ex vivo mit beschleunigter Heilung simuliert, die durch eFGF1 (NM141) stimuliert wird.

Ein menschliches Hornhautorgan-Kulturmodell des Descemet-Strippings nur mit beschleunigter Heilung, stimuliert durch den künstlichen Fibroblasten-Wachstumsfaktor 1

Erfahren Sie die kontrollierte manuelle Gewebedissektion zur Vorbereitung von Hornhautendothelgewebe für die DMEC-Insertion. Diese sichere Methode ermöglicht die präzise Trennung von Descemet-Membran und Stroma.

Hornhautspendergewebe Vorbereitung für Descemetschen Membrane Endothelial Keratoplastik

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