Name: Einem Mausmodell der Subchronische und Mild Social Niederlage Stress-for Understanding Stress-induzierten verhaltensmäßigen und physiologischen Defizite (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2015-11-24T14:00:00.000+00:00
Duration: 8 min 10 s
Description: Lernen Sie die Entwicklung eines Mausmodells der subchronischen milden sozialen Niederlagestress (S-C-S-D-S) zur Untersuchung stressinduzierter Verhaltens- und physiologischer Veränderungen. Diese Methode ermöglicht die Erforschung depressionsähnlicher Symptome und potenzieller Biomarker.

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Die Autoren danken Drs. Kentaro Nagaoka (Tokyo University of Agriculture and Technology) und Wataru Iio (Präfektur Ibaraki) für die hilfreiche Diskussionen. Diese Forschung wurde teilweise durch Ibaraki Universität Die Zusammenarbeit zwischen Landwirtschaft und Medical Science (IUCAM) (Die MEXT, Japan) und dem Forschungsprojekt zur Entwicklung der landwirtschaftlichen Erzeugnisse und Lebensmittel mit gesundheitsfördernden Vorteile (NARO) unterstützt (Das MAFF, Japan) .

Die tierexperimentellen Studien wurden durch genehmigt und erfüllt die Richtlinien sowohl der Animal Care und Verwenden Ausschuss Ibaraki University und dem Ministerium für Bildung, Kultur, Sport, Wissenschaft und Technologie (MEXT), Japan (Mitteilung No.71). Eine vollständige Übersicht über das Protokoll ist in Abbildung 1 dargestellt. 1. Geräte <ol><li> Bereiten Sie zwei Arten von Käfigen: einen einzigen Käfig (Breite [W] × Tiefe [D] x Höhe [H] = 143 mm × 293 mm × 148 mm) und eine &quot;soziale Niederlage (SD)&quot; Käfig (B × T × H = 220 mm × 320 mm × 135 mm). </li><li> Wie in Figur 2 gezeigt, unterteilen die SD Käfig in zwei Kammern mit einem Acryl transparente Platte Teiler (5 mm dick) mit 15 kreisförmigen Löchern (3 × 5-Matrix: 8 mm im Durchmesser). </li><li> Erhalten Hobelspan Späne aus Fichten, gereinigt-Diätfutterpellets und einem Trinkwasserflasche hergestellt. Darüber hinaus erhalten Papierhandtücher, eine Maske und Latexhandschuhe. </li&gt; <li> Für die soziale Interaktionstest, bereiten eine Open-field-Arena (B × T × H = 40 cm x 40 cm x 40 cm) aus grauem Polyvinylchlorid, ein Gewicht von Stahl (190 g) hergestellt, und eine Kunststoffinteraktionsfeld (W × T × H = 10 cm x 10 cm x 13 cm; 100 g) mit drei Gitterfenster (B × T = 5 cm x 5 cm) (Abbildung 3). </li><li> Legen Sie eine CCD-Kamera (2,8 bis 12 mm; F ​​= 1: 1,4; 1/3 Zoll CCD) und eine automatische Tracking-System in der Verhaltens-Testraum in der Tierhaltung. Ein pass Regal für den Mäusekäfigen in der Verhaltenstestraum, um die Mäuse an die Umgebung des Testraum für mindestens 30 min zu gewöhnen. </li></ol> 2. Die Gewöhnung an die Umwelt <ol><li> Verwenden männlichen C57BL / 6JJmsSlc (B6) Mäuse, die 7 Wochen alt und männliche Slc sind: ICR (ICR) Mäusen, die mehr als 5 Monate alt und zu liefern, um die Anlage aus einem Tierzuchtunternehmen. </li><li> Unabhängig voneinander bewegen zwei Gruppen von B6-Mäusen (n= 12 in jeder Gruppe) an die Einrichtung; Verwenden Sie eine Gruppe (Screener B6-Mäusen) für das Screening von aggressiven ICR-Mäuse und eine andere Gruppe (vorbehaltlich B6-Mäuse) zum Entwickeln des sCSDS Modell. </li><li> Einzuführen ICR-Mäuse (n = 12) zu der Einrichtung, um ihr aggressives Verhalten zu screenen. </li><li> Haus die Mäuse einzeln in Einzelkäfigen für 1 Woche im Rahmen eines 12-stündigen Licht-Dunkel-Zyklus (ca. 100 lux Leuchtstofflicht, Licht an um 8.00 Uhr) mit konstanter Temperatur (etwa 23 ° C) und Luftfeuchtigkeit (ca. 40%) um sie an die Umgebung zu gewöhnen. Partitionieren jeder Käfig durch Platzieren weiß gefärbten Kunststoffplatten zwischen den Käfigen, so daß die Mäuse nicht durch das Verhalten der benachbarten Mäuse beeinflußt. </li><li> Machen gereinigten-Diätfutterpellets und Umkehrosmosewasser ad libitum zur Verfügung. Verwenden AIN-93G Chow, weil die Bestandteile von anderen reine Nahrung Pellets können variieren. </li><li> Messen Sie das Körpergewicht, Nahrungsaufnahme (FI), und Wasseraufnahme (WI) der Mäuse jeden Tag. Berechnen Sie die body Gewichtszunahme (BWG) von der ersten Tag. </li></ol> 3 Screening von aggressiven ICR-Mäusen <ol><li> Nach Gewöhnung für 1 Woche, wie oben erwähnt, zu screenen die ICR-Mäuse (resident) mit Wohnsitz-Eindringlings-Tests für einen 3-min-Studie mit Screener B6-Mäusen (Eindringling, 8 Wochen alt) am Nachmittag (14: 00-17: 00) unter Beleuchtung von rund 300 Lux im Gehäuse Raum. <ol><li> Insbesondere prüfen jedes ICR-Maus für die drei Versuche pro Tag an 5 aufeinander folgenden Tagen (15 Studien mit insgesamt) in Richtung auf viele verschiedene B6-Mäuse wie möglich zu finden, die ICR-Mäuse zeigen eine hohe Aggression gegen die Eindringlinge. Während der Tests aufzeichnen den Angriff Latenzzeit und die Dauer der aggressives Verhalten (schnelle Bewegungen mit beißenden Angriff). </li></ol></li><li> Identifizieren Sie hyper-aggressive ICR-Mäusen, indem Sie die Schäden Wunden an B6 Eindringling Mäusen nach jedem Versuch. </li><li> Berechnen des Verhältnisses von Versuchen, in denen der Anschlag Latenzzeit weniger als 30 Sekunden als ein erster Index der Aggression des Gastes. </li><li> Calculate das Verhältnis von Versuchen, in denen der Anschlag Latenz von weniger als 3 min als zweite Index der Aggression des Gastes. </li><li> Werten Sie die Aggression trifft mit dem ersten Index. Verwenden Sie den zweiten Index, wenn der erste Index ist gleich. </li><li> Wählen Sie die ICR-Mäuse, die eine hohe Aggression Partituren ohne hyper-aggressives Verhalten als aggressive ICR-Mäuse hatten. Verwenden Sie die aggressive ICR-Mäusen wiederholt über die nächste Reihe von Experimenten, bis ca. 12 Monate alt sind; jedoch führen die Screening-Verfahren für aggressive ICR-Mäuse wie oben vor jedem Experiment beschrieben, um die Aggressivität des ICR-Mäusen bestätigen. </li><li> Nach jeder Sitzung des Screening, notieren Sie die Grad der Verletzung der Screener B6-Mäusen. Wenn eine Maus ist verwundet, zu isolieren, die Maus in einem Käfig und die Fortschritte, die Überprüfung ihrer Körpergewichtszunahme, Nahrungsaufnahme, und Wasseraufnahme zu beobachten. Im Falle einer schweren Wunden, die Physiologie und das Verhalten bei Mäusen beeinflussen euthanize sie gemäß den IACUC Richtlinien. </li></ol> 4. sCSDS <ol><li> Einzuführen unterliegen B6-Mäuse 7 Tage vor (Tag -6) der Tag der Anfangsspannung Exposition (Tag 1) und Haus die Mäuse einzeln in Einzelkäfigen, um sie an die Umgebung zu gewöhnen. </li><li> Drei Tage vor Tag 1 (am Tag -2), verschieben Sie die aggressive ICR-Mäuse in ein Fach der einzelnen SD-Käfig, der von einer Acrylteiler geteilt wird, damit die Mäuse zu etablieren ihrem Hoheitsgebiet in den SD-Käfigen (die gleiche Anzahl von Gegenstand B6 Mäuse). </li><li> Teilen Sie die SD-Käfigen unter Verwendung von weißer Farbe Partitionierungsplatten, wie in der oben beschriebenen Einzelkäfig Zustand. </li><li> Für unbelasteten Kontroll B6-Mäusen, bereiten SD Käfigen (die Hälfte der Anzahl von Mäusen), um die Mäuse in Paaren zu halten; stellen zwei Mäusen in jedem Abteil in einer SD-Käfig, geteilt durch den Teiler für 10 Tage. </li><li> Nach den täglichen BWG, FI, und WI-Messungen an Tag 1, unter Vorbehalt B6-Mäusen in einer der Kammern der SD-Käfigen (home-Käfig Bewohners) im afternoon (14: 00-16: 00 Uhr) unter Beleuchtung von rund 300 Lux im Gehäuseraum und Messung der physikalischen Kontaktzeit von dem ersten Angriff Biss, den Wohnsitz-Eindringling Test abgeschlossen. </li><li> Am Tag 1, setzen Sie den physischen Kontakt Zeit auf 5 min von der ersten Angriffs Biss und haben Beobachter zählen die Anzahl der Angriffs Bisse von ICR-Mäusen, die vorzugsweise an der Rückseite oder an den Flanken des Gegners durch Miczek et al gerichtet sind. 20 bis bestimmen den Grad der körperlichen Belastung zu B6-Mäusen. </li><li> Nach der physikalischen Kontaktzeit, Rettungs unterliegen B6-Mäusen und überprüfen und aufzeichnen ihr Fell Status und Wunden. Dann legen Sie die B6-Mäusen in einem anderen Abteil neben den ICR-Mäuse in den SD-Käfigen, bis die Exposition gegenüber physischen Stress am nächsten Tag. </li><li> Da der Acrylteiler auf der SD-Käfig ist transparent und enthält Löcher, aussetzen unterliegen B6-Mäusen zu verschiedenen emotionalen Belastungen, einschließlich visuelle, auditive und olfaktorische Reize, von den ICR-Mäuse in der Nachbarfachment der SD-Käfig für 24 Stunden jeden Tag. </li><li> Messen Sie die BWG, FI, und WI Kontrolle B6-Mäusen täglich und dann legen Sie sie in jedem Fach in den SD-Käfige für 1 Tag. </li><li> Am Tag 2 nach den täglichen Messungen der BWG, FI, und WI, einzuführen unterliegen B6-Mäuse in das Hoheitsgebiet der anderen ICR-Mäuse, um sie an körperliche Belastung aussetzen. </li><li> Stellen Sie die Dauer der physischen Kontakt bei 4,5 min aus dem ersten Angriff Biss am Tag 2 und zählen die Anzahl der Angriffsstichen. </li><li> Bewegen Steuer B6-Mäuse in verschiedene Fächer und ändern Sie die Paarkombinationen, um die Platzierung und Partner der Paare jeden Tag mischen. </li><li> Verringern Sie die Dauer der physischen Kontakt von 0,5 min pro Tag, so dass die Dauer an Tag 10 bis 0,5 min aus dem ersten Angriff Biss gesetzt. </li><li> Am Tag 7 ersetzen etwa die Hälfte der Holzspäne in allen Kammern in den SD Käfigen. </li><li> Nach Exposition gegenüber dem letzten physischen Stress am Tag 10, zu bewegen unterliegen B6-Mäuse in Einzelkäfigen. Ähnlich wie bei den Gegenstand B6-Mäusen, bewegen Steuerung B6-Mäuse in Einzelkäfigen am Tag 10. </li><li> Wenn ein ICR-Maus hat keine Angriffsstiche bis 5 min in jedem Versuch an den Tagen 1 bis 10 ist, beenden Sie den Prozess. Ersetzen Sie die ICR-Maus mit Ersatz aggressive ICR-Mäusen und führen eine alternative Testversion für das Thema B6 Maus. </li><li> Wenn eine Maus ist verwundet, zu isolieren, die Maus in einem Käfig und die Fortschritte, die Überprüfung ihrer Körpergewichtszunahme, Nahrungsaufnahme, und Wasseraufnahme zu beobachten. Folgen Sie Ihrem IACUC Richtlinien für die Analgesie. Im Falle einer schweren Wunden, die Physiologie und das Verhalten bei Mäusen beeinflussen euthanize sie gemäß den IACUC Richtlinien. </li></ol> 5. Soziale Vermeidungstest (Soziale Interaktion Test) <ol><li> Führen Verhaltenstests für die soziale Vermeidung am Morgen (09: 00-12: 00) am Tag 11. </li><li> Dreißig Minuten vor dem Test, übertragen Sie die Käfige der Kontrolle und Gegenstand B6-Mäuse auf einem Regal (schwaches Licht von weniger als 1 Lux) im VerhaltensTestraum unter Beleuchtung von weniger als 20 Lux, damit sie an die Umgebung zu gewöhnen. </li><li> Um zu bestellen Wirkungen zu reduzieren, abwechselnd testen Kontrolle und unterliegen B6-Mäusen. </li><li> Reinigen Sie eine Open-field-Arena (mit einer Licht von 20 lux in der Mitte des Feldes beleuchtet) und eine Kunststoffinteraktionsfeld mit Papierhandtüchern mit 70% Ethanol eingeweicht, bevor die Verhaltenstest für jede Maus, um Kot, Urin zu entfernen und Gerüche . </li><li> Platzieren Sie eine unbekannte ICR-Maus (nicht als Aggressor verwendet) aus einem einzigen Käfig in der Nähe des Freifeldgerät. </li><li> Legen Sie eine B6-Maus in das offene Feld des vakanten Interaktionsfeld, wie in Abbildung 4 dargestellt. Überwachen und sein Verhalten für 2,5 min zu analysieren mit dem automatischen Analysesystem (in Schritt 5.10 beschrieben). </li><li> Nach dem ersten Versuch, entfernen Sie die B6-Maus aus dem Feld und legen Sie sie in ihre Heimat Käfig. </li><li> Anschließend legen Sie die unbekannten männlichen ICR-Maus (soziale Ziel) in die Interaktionsfeld und dann führen die B6Maus in das freie Feld und sein Verhalten für 2,5 min zu überwachen. </li><li> Nach dem zweiten Versuch zurück sowohl die B6 und ICR-Mäuse in ihre Heimatkäfige, und reinigen Sie den Bereich und das Zusammenspiel Feld wie oben erwähnt. </li><li> Wiederholen Sie diese Schritte für jede B6 Maus, um ihre Sozialverhalten zu testen. Bei jedem Versuch, Rekord Top-View-Filme mit einer CCD-Kamera. <ol><li> Nach den Verhaltenstests, die Berechnung der Zeit in der Wechselwirkungszone für jeden Versuch verbracht (in Sekunden) und in der Eckzone (in Sekunden), wie in Goto et al. 13 gezeigt. Beurteilen die Position der Maus auf der Basis der Mitte der Maus. </li><li> Berechnen Sie die soziale Interaktion Partituren als 100 × (Interaktionszeit, mit Ziel) / (Interaktionszeit, ohne Ziel), im Anschluss an die in Krishnan et al. 21 veröffentlichten Verfahren. </li></ol></li></ol>

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</ol>

Die Autoren erklären, dass sie keine konkurrierenden finanziellen Interessen.

Es definitive Unterschiede im Körpergewicht zwischen sCSDS Mäusen und Mäusen CSDS dem Standard CSDS Protokoll (5-10 min physischer Kontakt mit Angreifern pro Tag) 19 unterzogen. Die sCSDS Mäuse zeigten während des Stresszeitraum um BWG, während die Standard CSDS Mäuse zeigten eine Abnahme des Körpergewichts während der Stressperiode 21,22,23. Es gibt einen wesentlichen Unterschied zwischen den beiden Protokollen in Bezug auf die Gesamtdauer der physischen Kontakt mit Aggressoren während der 10-Tage...

Viele Arten von belastenden Ereignissen auftreten, in den Leben der Menschen. Übermäßigen Druck oft schädliche physiologische Konsequenzen bei Menschen und Tieren. Beim Menschen belastende Ereignisse sind wichtige Risikofaktoren für die Ausfällung von psychiatrischen Erkrankungen wie Depression 1. A Global Burden of Disease Studie zeigte, dass Depression ist eine der Sperrung Störungen in Bezug auf Behinderungen bereinigte Lebensjahre (DALYs) und Jahren mit einer Behinderung 2 lebten. Darüber hinaus entfallen Depression den größten Anteil der Selbstmord DALYs 3. Menschen mit Depressionen finden es schwierig, ihr Leben zu verwalten, und als ein Ergebnis, ihre Lebensqualität verschlechtert sich oft. Daher gibt es ein starkes Bedürfnis, wirksame Arzneimittel zur Verbesserung der Lebensqualität dieser Patienten zu verbessern. Viele Studien haben sich auf schwerer depressiver Störungen durchgeführt worden und haben gezeigt, dass die genetische Beitrag zur Krankheits susceptibility beträgt etwa 30-40%, was durch die Wirkungen mehrerer Genloci kleine Effekte 4 erläutert wird. Aufgrund der komplexen pathogenen Mechanismen zugrunde liegenden Depression, bleibt die detaillierte Ätiologie der Erkrankung schwer fassbar. Klinische Berichte zeigen, dass es Subtypen der Depression wie melancholischen und atypische Depression 5, die reduziert und erhöhtes Körpergewicht, jeweils 6 zeigen. Obwohl 25-30% und 15-30% der Patienten mit Depressionen stellen reine melancholischen und atypische Merkmale jeweils die meisten von ihnen haben gemischte Merkmale beider Subtypen 7. Daher hat die Hauptdepression ein breites Spektrum von Symptomen. Um Biomarker zu finden und zu entwickeln Ziel Therapeutika für die verschiedenen Arten von Depressionen bei Menschen, ist es wichtig, verschiedene Tiermodellen der Vertiefung 8 herzustellen. Tiermodelle der Depression wurden eingerichtet mit mehreren Ansätzen, einschließlich gelerntHilflosigkeit, chronische unvorhersehbare milden Stress und chronischen sozialen Niederlage Stress (CSD) 9-12. Toyoda und seine Kollegen festgestellt CSDs Modelle von Ratten und Mäusen 13-17, um den Stoffwechsel und Verhaltensweisen, die im Zusammenhang mit Depressionen sind aufzuklären. Da die Tiermodellen der Depression durch Augenscheinvalidität 18 bewertet, ist der Kontext, in dem das Modell etabliert wichtig. Außerdem Golden et al. 19 berichtet, die Methoden zum Erstellen CSDS Mäusen im Detail. Es ist bekannt, dass die Defizite im Sozialverhalten der CSDS Mäusen kann durch chronische Behandlung zurückgewonnen werden, aber nicht durch eine akute Behandlung mit Antidepressiva, und dass sie gemeinsam ähnlich denen bei Patienten mit Depressionen Symptome in Bezug auf die Regulierung von brain-derived neurotrophic Faktor 6. Goto et al. 13 zuvor entwickelten die subchronische und mild soziale Niederlage Stress (sCSDS) Mausmodell durch Änderung der MethodenGolden et al. 19. Die sCSDS Mäuse zeigen polydipsia- und Hyperphagie ähnliche Symptome folgenden Gewinne in Körpergewicht und erhöhte Körperwassergehalt 13. In diesem Bericht wird das Protokoll für die Gründung der sCSDS Maus-Modell zur Verfügung gestellt und wir besprechen die Nützlichkeit dieses Modells.

<table><tbody><tr><td>Einzelkäfig</td><td>Charles River Laboratories Japan</td><td></td><td>Breite [W] & mal Tiefe [T] - mal Höhe [H] = 143 x 293 x 148 mm</td></tr><tr><td>M Käfig</td><td>Natsume Seisakusho</td><td></td><td>W & mal; D & mal; H = 220 & mal; 320 & mal; 135 mm</td></tr><tr><td>Whiteflake</td><td>Charles River Laboratories Japan</td><td></td><td>Holzspäne aus Fichten</td></tr><tr><td>AIN-93G</td><td>Orientalische Hefe</td><td></td><td>Pellets für gereinigte Lebensmittel</td></tr><tr><td>Kimtowel</td><td>Nippon Paper Crecia Co.</td><td></td><td>Papierhandtücher</td></tr><tr><td>auf offenem Feld Arena</td><td>O' Hara & Ko.</td><td></td><td>aus grauem Polyvinylchlorid</td></tr></tbody></table>

einem mausmodell der subchronische und mild social niederlage stress-for understanding stress-induzierten verhaltensmäßigen und physiologischen defizite

A Mouse Model of Subchronic and Mild Social Defeat Stress for Understanding Stress-induced Behavioral and Physiological Deficits

Stressige Lebensereignisse erhöhen oft die Häufigkeit von Depressionen beim Menschen. Um die Mechanismen der Depression zu untersuchen, ist die Entwicklung von Tiermodellen der Depression unerlässlich. Da es mehrere Arten von Depressionen gibt, sind verschiedene Tiermodelle erforderlich, um die Störung tiefer zu verstehen. Zuvor wurde ein Mausmodell für subchronischen und milden sozialen Niederlagenstress (sCSDS) unter Verwendung eines modifizierten Paradigmas für chronischen sozialen Niederlagenstress (CSDS) etabliert. Um körperliche Verletzungen durch Aggressoren zu reduzieren, wurde im Paradigma die Dauer des physischen Kontakts zwischen dem Aggressor und einem Untergebenen im Vergleich zum ursprünglichen CSDS-Paradigma reduziert. sCSDS-Mäuse zeigten während der Stressphase eine erhöhte Körpergewichtszunahme, Nahrungsaufnahme und Wasseraufnahme, und ihr Sozialverhalten wurde nach der Stressphase unterdrückt. In Bezug auf die Gesichtsvalidität des stressinduzierten Überessens und Übertrinkens nach der erhöhten Körpergewichtszunahme könnten die sCSDS-Mäuse einige Merkmale aufweisen, die mit einer atypischen Depression beim Menschen zusammenhängen. Daher könnte ein Mausmodell von sCSDS nützlich sein, um die pathogenen Mechanismen zu untersuchen, die der Depression zugrunde liegen. Dieses Protokoll wird zur Etablierung des sCSDS-Mausmodells beitragen, insbesondere für die Untersuchung der Mechanismen, die der stressinduzierten Gewichtszunahme und den Polydipsie- und Hyperphagie-ähnlichen Symptomen zugrunde liegen.

Um den Grad der körperlichen Belastung für den 10-Tage-Zeitraum wurde die Anzahl von Angriffen Stichen durch ICR-Mäuse manuell von einem Forscher gezählt überwachen. 5A zeigt die individuellen Werte für die Anzahl der empfangenen Angriffsstichen. Es gab eine beträchtliche Variabilität in der Anfangsphase (ca. 10-120 Stiche am Tag 1), aber diese Variabilität in der späteren Phase (ungefähr 5-20 Stiche am Tag 10) reduziert. 5B zeigt, dass die durchschnittliche Anzahl der Angriffsstichen e...

Hier, Methoden für die Entwicklung eines Maus-Modell der subchronischen und einem milden sozialen Niederlage Stress beschrieben und verwendet, um die pathogenen Eigenschaften der Depression einschließlich hyperphagia- und Polydipsie ähnliche Symptome folgenden erhöhtes Körpergewicht zu untersuchen.

Einem Mausmodell der Subchronische und Mild Social Niederlage Stress-for Understanding Stress-induzierten verhaltensmäßigen und physiologischen Defizite

Stressful life events often increase the incidence of depression in humans. To study the mechanisms of depression, the development of animal models of ...

Das übergeordnete Ziel dieses Verfahrens besteht darin, ein Mausmodell für subchronischen und leichten sozialen Defeatsstress oder S-C-S-D-S zu etablieren, um die Mechanismen stressinduzierter Symptome zu untersuchen. Dies wird erreicht, indem zunächst einzelne männliche Black-Six-Mäuse und ICR-Mäuse an die Umgebung gewöhnt werden. Der zweite Schritt besteht darin, aggressive ICR-Mäuse zu screenen und auszuwählen. Anschließend werden die S-C-S-D-S-Mäuse über mehrere Tage hinweg wiederholt einzeln schwarzen Sechs-Mäusen ausgesetzt. Letztendlich zeigen die gemessenen Sozialverhaltenswerte, der Körpergewichtsverlauf, die Nahrungsaufnahme und die Wasseraufnahme die stressinduzierten Veränderungen im S-C-S-D-S-Mausmodell auf. Um Biomarker zu finden und objektive Kennzeichen für die verschiedenen Depressionstypen beim Menschen zu entwickeln, ist es wichtig, mehrere unterschiedliche Tiermodelle des Leidens zu etablieren.Für diese Demonstration werden sieben Wochen alte männliche Black-Six-Mäuse und ältere männliche ICR-Mäuse verwendet. Befinden sich zwei Gruppen mit jeweils einem Dutzend Black-Six-Mäusen und eine Gruppe mit einem Dutzend ICR-Mäusen, bewegen Sie die Gruppen unabhängig voneinander in die Haltungseinrichtung. Eine Black-Six-Gruppe dient der Untersuchung der ICR-Mäuse, die andere zur Entwicklung des S-C-S-D-S-Modells.Stellen Sie die Mäuse eine Woche lang einzeln unter Standardbedingungen mit einer relativen Luftfeuchtigkeit von etwa 40 % zwischen den Käfigen unter. Stellen Sie opake weiße Absperrungen auf, damit die Mäuse einander nicht täglich sehen können. Messen Sie die Nahrungsaufnahme und den Wasserverbrauch jedes Tieres sowie die Körpermasse jedes Tieres.Nach der Gewöhnungswoche führen Sie Resident-Intruder-Tests mit den ICR-Mäusen als Residents während der Nachmittagsstunden durch. Führen Sie den Test drei Minuten lang unter 300 Lux im Aufzuchtraum durch und notieren Sie während der Testdurchführung die Latenz bis zum Angriff und die Dauer schneller Bewegungen mit Beißen, die einen Angriff definieren. Überprüfen Sie nach jedem Versuch die Black-Six-Mäuse auf Schnittverletzungen. Verwenden Sie dies als Index für hyperaggressives Verhalten der ICR-Mäuse für den ersten Aggressionsindex.Verwenden Sie das Verhältnis von Versuchen mit einer Angriffslatenz von weniger als 30 Sekunden. Wählen Sie die aggressivsten ICR-Mäuse aus, die nicht hyperaggressiv sind. Verwenden Sie diese Mäuse im S-C-S-D-S-Modell.Wiederholen Sie den Test dreimal täglich über fünf aufeinanderfolgende Tage. Jede der 12 ICR-Mäuse sollte mindestens einmal auf jede der 12 Black-Six-Mäuse treffen. Führen Sie die Black-Six-Testmäuse in den Aufzuchtraum ein.Vor der Sicht benachbarter Mäuse abgeschirmt. Lassen Sie sie sieben Tage lang auf diese Weise akklimatisieren. Für jede aggressive ICR-Maus in der Studie werden zwei schwarze Six-Mäuse benötigt.Drei Tage vor Beginn des Experiments die aggressiven ICR-Mäuse in eine Abteilung jedes SD-Käfigs verbringen. Ein SD-Käfig enthält einen beweglichen Acryl-Trennwand. Die SD-Käfige sollten alle so abgeschirmt sein, dass Nachbarn nicht sichtbar sind.Nächste Haltung: Die nicht belasteten Kontrollmäuse der Stammeslinie Black Six werden so untergebracht, dass jedes Paar entgegengesetzte Abteile von SD-Käfigen besetzt, und dies jeden Tag der Studie. Überwachen Sie das Gewicht sowie den Wasserverbrauch und die Nahrungsaufnahme aller Mäuse am ersten Tag des Versuchs. Nach Durchführung der regulären Messungen wird eine Versuchsmaus der Stammeslinie Black Six in das Abteil gebracht, das von einer ICR-Maus besetzt ist.Führen Sie dies am Nachmittag und unter 300 Schlössern im Aufzuchtraum durch. Sobald der erste Angriff erfolgt ist, beginnen Sie fünf Minuten lang mit der Bewertung der Angriffe. Zählen Sie die Anzahl der Angriffe, die auf den Rücken oder die Flanke der eindringenden Maus gerichtet sind.Nach fünf Minuten entfernen Sie die schwarze Sechs-Maus und überprüfen Sie sie auf Wunden. Danach stellen Sie die schwarze Sechs-Maus in das gegenüberliegende Fach derselben ICR-Maus, bis zum nächsten Testtag. Dadurch kann die schwarze Sechs-Maus die ICR-Maus weiterhin sehen, hören und riechen, um rund um die Uhr kumulativen Stress zu erfahren.Am zweiten Tag nach der Gewichtsmessung führen Sie jede schwarze Sechs-Maus in ein anderes ICR-Maus-Territorium ein. Lassen Sie die Mäuse nach dem ersten Angriff viereinhalb Minuten lang interagieren. Nehmen Sie dieselben Messungen wie am ersten Tag vor.Nach der Interaktion Wunden am Black-Six-Maus überprüfen. Setzen Sie sie in denselben Käfig zurück, jedoch gegenüber der aggressiven Maus. Mit jedem aufeinanderfolgenden Tag des Testens.Reduzieren Sie die Interaktionszeit zwischen den Mäusen in der letzten Sitzung um 30 Sekunden. Die Interaktionszeit beträgt nach dem ersten Angriff lediglich 30 Sekunden. Falls eine ICR-Maus an einem Tag nach fünf Minuten keinen Angriff ausführt, nehmen Sie sie aus der Studie heraus und ersetzen Sie sie durch eine Ersatzmaus.Stellen Sie die Black-Six-Maus heute Morgen am Tag 11 mit der zusätzlichen Maus auf denselben Test. Führen Sie einen Test mit allen Black-Six-Mäusen auf einem offenen Feld eine halbe Stunde vor Beginn durch. Stellen Sie die Käfige der kontrollierten Black-Six- und der untersuchten Black-Six-Maus auf ein Regal unter weniger als einem Lux Beleuchtung; die Raumbeleuchtung sollte in der Nähe der Versuchsarena etwa 20 Lux betragen. Halten Sie eine einzelne unbekannte, aggressive ICR-Maus bereit.Beginnen Sie den Versuch, indem Sie eine schwarze Sechs-Maus für zweieinhalb Minuten in eine offene Feldbox mit einer leeren Interaktionsbox platzieren. Das Verhalten sollte von einem automatisierten System überwacht werden. Nach zweieinhalb Minuten bringen Sie die schwarze Sechs-Maus in ihren Heimkäfig zurück und platzieren die ICR-Maus in die Interaktionsbox im offenen Feld.Diese Maus ist das Ziel und stellt den Mittelpunkt der Zielzone im offenen Feld dar. Danach wird die schwarze Sechs erneut für zweieinhalb Minuten mit dem Ziel im offenen Feld eingeführt. Nach Abschluss des Versuchs werden beide Mäuse in ihre Heimkäfige zurückgebracht und die Arena des offenen Felds gereinigt.Fahren Sie anschließend damit fort, jedem Black-Six-Maus dieses Erlebnis zu vermitteln. Bestimmen Sie anhand dieser Werte die Zeit, die die Black-Six-Mäuse in jeder Interaktionszone und in den Eckzonen verbringen. Berechnen Sie die soziale Interaktionsscore unter Verwendung des beschriebenen Protokolls. Die Anfälle wurden über einen Zeitraum von 10 Tagen erfasst. Zu Beginn zeigte sich eine erhebliche Variabilität, die sich jedoch im Laufe der Zeit verringerte. Die Mäuse hatten täglich weniger Zeit für Interaktionen.Daher der rückläufige Trend. Die durchschnittliche Anzahl an Angriffsbissen nahm allmählich ab, da die Dauer des physischen Kontakts von fünf Minuten auf 30 Sekunden verringert wurde. Gestresste Mäuse schienen im Verlauf von 10 Tagen mehr Gewicht zuzunehmen als Kontrollmäuse.Beim Nahrungskonsum gab es kaum Unterschiede. Allerdings konsumierten die gestressten Mäuse die doppelte Menge Wasser, was beim sozialen Interaktionstest nach dem 10-tägigen Stressregime als sehr signifikant erwies. Wie erwartet, zeigte sich ein signifikanter Unterschied zwischen kontroll- und gestressten Mäusen.Die Kontrollmäuse waren weitaus erkundungsfreudiger, wenn das Zielmaus vorhanden war. Die Verwendung des subchronischen sozialen Stressmodells bei Mäusen bietet den Vorteil, dass dieses Modell uns helfen kann, die Mechanismen hinter stressbedingter Gewichtszunahme sowie Polydipsie und Hyperphagie besser zu verstehen.

a-mouse-model-subchronic-mild-social-defeat-stress-for-understanding

Research

Forschung

JoVE Journal

Behavior

Verhalten

Das Protokoll für unvorhersehbaren chronischen milden Stress (UCMS) ist eine validierte Methode zur Untersuchung von Verhaltens- und physiologischen Veränderungen, die mit chronischem Stress und depressiven Symptomen verbunden sind. Acht Wochen nach der Einführung des UCMS-Protokolls führen bei Nagetieren beiderlei Geschlechts zu Verhaltensänderungen und schlechten Gesundheitsergebnissen.

Ein unberechenbarer Chronische leichter Stress Protokoll zur Anstiftung depressive Symptome, Verhaltensänderungen und negativen gesundheitlichen Folgen in Nagetiere

Hier präsentieren wir das unberechenbare milde Dauerstress Protokoll bei Mäusen. Dieses Protokoll induziert einen langfristige Depressive-ähnlichen Phänotyp und ermöglicht es, um die Wirksamkeit von vermeintlichen Antidepressiva bei der Umkehr der Verhaltens- und Neuromolecular depressiv-ähnliche Defizite zu beurteilen.

Das unvorhersehbare milde Dauerstress Protokoll zur Induktion Anhedonie bei Mäusen

Die Y-Maze Barriere-Aufgabe ist ein Verhaltenstest, der die Motivation untersucht, Anstrengungen zur Belohnung zu verschwenden. Hier diskutieren wir das Testen mehrerer gut validierter chronischer Stressoren, einschließlich chronischer Corticosteron- und sozialer Niederlagenstress, sowie den neuartigen chronischen nichtdiskriminierenden sozialen Niederlagenstress (CNSDS), der bei Frauen wirksam ist.

Chronischer Stress verschiebt aufwandsbezogenes Wahlverhalten in einer Y-Maze Barriere-Aufgabe bei Mäusen

Hier wird ein durch soziale Isolation (SI) induziertes Angstmausmodell vorgestellt, das Wildtyp-C56BL / 6J-Mäuse verwendet, um Stress und angstähnliches Verhalten mit minimaler Handhabung und ohne invasive Verfahren zu induzieren. Dieses Modell spiegelt moderne Lebensmuster sozialer Isolation wider und ist ideal für die Untersuchung von Angstzuständen und verwandten Störungen.

Soziales Isolationsmodell: Ein nichtinvasives Nagetiermodell für Stress und Angst

Der soziale Bedrohungs-Sicherheits-Test ermöglicht eine gleichzeitige Bewertung der Entwicklung sozialer Vermeidung als Maß für aversives konditioniertes Lernen und soziale Bedrohungs-Sicherheits-Unterscheidungsfähigkeit, die beide verwendet werden, um stressanfällige und stressresistente Individuen innerhalb einer einzigen Gruppe von chronisch sozial besiegten männlichen Mäusen zu identifizieren.

Sozialer Bedrohungs-Sicherheits-Test deckt psychosoziale Stress-bedingte Phänotypen auf

Wir haben ein beschleunigtes Social Defeat Stress-Modell für jugendliche C57BL/6-Mäuse entwickelt, das sowohl bei Männchen als auch bei Weibchen funktioniert und eine Exposition während diskreter Jugendperioden ermöglicht. Die Exposition gegenüber diesem Modell führt zu sozialer Vermeidung, aber nur bei einer Untergruppe der besiegten männlichen und weiblichen Mäuse.

Soziales Defeat Stress-Modell für jugendliche C57BL/6 männliche und weibliche Mäuse

Dieses Protokoll beschreibt, wie man 10-tägigen chronischen sozialen Niederlagenstress bei männlichen Mäusen im frühen Jugendalter durchführt, um bei mehr als 60% der Mäuse eine lang anhaltende soziale Vermeidung im Erwachsenenalter zu erzeugen.

Chronischer sozialer Niederlagenstress bei männlichen Mäusen im frühen Jugendalter

Durch die Integration von vier täglichen sozialen Stressoren beschreibt die vorliegende Studie ein mehrfach integriertes soziales Stressmodell (MISS) für psychiatrische Störungen bei weiblichen C57BL/6J-Mäusen. Nach zehn Tagen wiederholter MISS-Exposition entwickelten die Mäuse depressive und angstähnliche Phänotypen, was ein natürliches, ätilogisch basiertes Tiermodell für die Untersuchung psychiatrischer Störungen bei weiblichen Probanden darstellt.

Ein multiples integriertes soziales Stressmodell für psychiatrische Störungen bei weiblichen C57BL/6J-Mäusen

Dieses Video zeigt die resident-Eindringling Paradigma in Ratten. Dieser Test ist eine standardisierte Methode, um offensive Aggression, defensive Verhalten und Gewalt in einer naturnahen Umgebung zu messen. Die Verwendung des Paradigma für soziale Stressexperimente als gut erklärt.

Der Resident-Eindringling Paradigm: ein standardisierter Test für Aggression, Gewalt und sozialem Stress

Dieser Artikel beschreibt die Verwendung von chronischen resident Eindringling sozialem Stress als ethologisch relevant Paradigma Modell postpartale Depression und Angst bei stillenden Nagetiere.

Mit Chronische Sozial Stress zu Modell postpartalen Depression in Lactating Nagetiere

Lernen Sie die Entwicklung eines Mausmodells der subchronischen milden sozialen Niederlagestress (S-C-S-D-S) zur Untersuchung stressinduzierter Verhaltens- und physiologischer Veränderungen. Diese Methode ermöglicht die Erforschung depressionsähnlicher Symptome und potenzieller Biomarker.

Einem Mausmodell der Subchronische und Mild Social Niederlage Stress-for Understanding Stress-induzierten verhaltensmäßigen und physiologischen Defizite (Video) | JoVE Journal

Einem Mausmodell der Subchronische und Mild Social Niederlage Stress-for Understanding Stress-induzierten verhaltensmäßigen und physiologischen Defizite

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