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DOI: 10.3791/53059-v
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This article discusses the use of enzymatic microelectrode biosensors for real-time measurement of extracellular cell signaling. The protocols outlined extend the application of these biosensors to detect ATP and hydrogen peroxide in kidney tissues.
Enzymatische Mikroelektroden-Biosensoren ermöglichen Echtzeitmessungen der extrazellulären Zellsignalübertragung in biologisch relevanten Konzentrationen. Die folgenden Protokolle erweitern die Anwendungen von Biosensoren auf den ex vivo und in vivo Nachweis von ATP und H2O2 in der Niere.
Das übergeordnete Ziel dieser Verfahren ist es, endogene interstitielle Konzentrationen eines TP und Wasserstoffperoxids in der ganzen Niere in Echtzeit zu messen. Dies wird erreicht, indem zunächst Sensoren für ex vivo- und in vivo-Anwendungen auf bekannte Konzentrationen von einem TP und Wasserstoffperoxid rehydriert und kalibriert werden. Für die Installation des ex vivo-Sensors wurde die Niere chirurgisch instrumentiert und aus dem Blut gereinigt.
Bei diesem Verfahren wird die Niere durch die Aorta gespült. Dann wird die Rattenniere chirurgisch isoliert, in eine Aufzeichnungskammer gelegt und mit Kochsalzlösung durchblutet. A TP und Wasserstoffperoxid werden mit ex vivo Sensoren für das in vivo Verfahren gemessen.
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