Lieferung von Proteinen, Peptiden oder Handy-undurchlässige kleine Moleküle in lebenden Zellen durch Inkubation mit dem endosomolytische Reagenz dfTAT

Das übergeordnete Ziel des folgenden Experiments ist es, Makromoleküle mit Hilfe von Dimer-, Fluoreszenz- oder Df-Tat-Reagenz in lebende Zellen zu bringen, das sehr effizient in Zellen eindringen kann, ohne sie zu beschädigen. Dies wird erreicht, indem zunächst das Trägermedium erzeugt und gereinigt wird. Dfta als zweiten Schritt.

Dfta wird eine Stunde lang bei 37 Grad Celsius in Gegenwart der interessierenden Makromolekülfracht mit Zellen inkubiert, df tat induziert die Aufnahme der Fracht in endozytären Vesikel. Vesikel reifen zu frühen Endosomen heran und erreichen schließlich das späte Endosomenstadium, in dem DF tat in der Lage ist, die Fracht in den zytosolischen Raum der Zellen freizusetzen. Anschließend werden die Zellen durch Fluoreszenzmikroskopie abgebildet, um die Liefereffizienz von Detta und der interessierenden Fracht zu beurteilen.