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DOI: 10.3791/53990-v
Salvatore Coniglio1, Ian Miller2, Marc Symons3, Jeffrey E. Segall4
1New Jersey Center for Science, Technology and Mathematics,Kean University, 2Department of Physiology and Medical Physics,Royal College of Surgeons in Ireland, 3The Feinstein Institute for Medical Research at North Shore-LIJ, 4Department of Anatomy and Structural Biology, Gruss Lipper Biophotonics Center,Albert Einstein College of Medicine
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
Um das bösartige Verhalten von Krebs zu verstehen, müssen genaue Modelle erstellt werden, wie Tumorzellen mit Komponenten der Tumormikroumgebung, wie z.B. Makrophagen, interagieren. Hier beschreiben wir zwei Methoden zur Untersuchung der Interaktion von Glioblastomzellen mit tumorassoziierten Makrophagen und Mikroglia, bei denen die Wirkung auf die Glioblastominvasion bewertet wird.
Das übergeordnete Ziel dieses Experiments ist es, die Interaktion von Glioblastomzellen mit Mikroglia und Makrophagen während der Invasion in einem in vitro Assay zu modellieren. Diese Methode kann also dazu beitragen, wichtige Fragen im Bereich der Tumormikroumgebung zu beantworten, z. B. welche Verbindungen oder Behandlungen die Interaktion von Krebs mit Makrophagen, einem Zelltyp der Mikroumgebung während des Fortschreitens zur Malignität, beeinträchtigen können. Einer der Hauptvorteile dieser Technik besteht darin, dass sie relativ einfach durchzuführen und in einem angemessenen Zeitraum abgeschlossen werden kann und die Glioblastominvasion in vivo genau zu modellieren scheint.
Beginnen Sie mit der Differenzierung der interessierenden Zelllinie mit Phorbolmyristatacetat wie folgt. Zuerst werden zwei- bis dreimal 10 bis fünfte THP-1-Zellen in 1,5 Milliliter Medium in einer Sechs-Well-Kulturplatte plattiert. Unmittelbar nach dem Plattieren 100 Nanomolar PMA hinzufügen und 48 Stunden lang bei 37 Grad Celsius und 5 % CO2 inkubieren.
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