Name: Die Herstellung von Inverted Kolloid-Kristallen Poly (Ethylenglycol) Scaffold: Eine dreidimensionale Zellkultur-Plattform für Leber-Tissue Engineering (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2016-08-27T13:00:00.000+00:00
Duration: 10 min 18 s
Description: Erfahren Sie die Herstellung von PEG-basierten inversen kolloidalen Kristallscaffolds für Lebergewebe-Engineering. Diese Methode ermöglicht längere Aufrechterhaltung der Hepatozytenfunktion und verbessert Anwendungen in der Arzneimittelprüfung.

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Die Autoren möchten Unterstützung von einer National Research Foundation Fellowship (NRF -NRFF2011-01) und Competitive Research Programme (NRF-CRP10-2012-07) anzuerkennen.

Die Autoren haben keine konkurrierenden finanziellen Interessen offenzulegen.

Tissue Engineering Gerüste entwickeln sich schnell notwendig , alle physikalischen und biochemischen Signale zu schaffen , sich zu regenerieren, zu warten oder zu reparieren Gewebe für die Anwendung von Organersatz, Krankheiten zu studieren, die Entwicklung von Medikamenten, und viele andere 57. In der Leber Tissue Engineering, verlieren primäre humane Hepatozyten schnell ihre metabolischen Funktionen einmal aus dem Körper isoliert, einen großen Bedarf an Engineering-Gerüste Schaffung und Entwicklung von Plat...

Die Leber ist ein stark vaskularisierten Organ mit einer Vielzahl von Funktionen, einschließlich der Entgiftung des Blutes, Metabolismus von Xenobiotika und der Produktion von Serumproteinen. Lebergewebe hat eine komplexe dreidimensionale (3D) Mikrostruktur, bestehend aus mehreren Zelltypen, Gallenkanälchen, Sinusoiden und Zonen unterschiedlicher Biomatrix Zusammensetzung und verschiedenen Sauerstoffkonzentrationen. In Anbetracht dieser aufwendigen Struktur, ist es schwierig gewesen 1 eine richtige Lebermodell in vitro zu erzeugen. Allerdings gibt es eine steigende Nachfrage nach funktionellen in vitro - Modelle humanen Hepatozyten als Plattformen für die Prüfung Medikamententoxizität 2 - Hosting und Erkrankungen der Leber 3 zu studieren. Stromlebergewebe - Engineering - Plattformen haben die Komplexität der Leber vereinfacht eine durch Isolieren oder auf ein paar Fokussieren der Parameter des Leber, nämlich Co-Kultur von Zellen 4, biochemische Zusammensetzung der zonal Mikroumgebungen 5, Strömungsdynamik 6,7 und die Konfiguration der Biomatrix 8. Konfiguration der Biomatrix kann in Parametern wie Gerüstmaterial gebrochen werden, die Zusammensetzung der extrazellulären Matrix (ECM) Proteine, matrix Steifigkeit sowie das Design und die Struktur des Gerüsts. Es hat sich zu einem Anstieg der Tissue - Engineering - Studien synthetische Hydrogele unter Verwendung, insbesondere Poly (ethylenglycol) (PEG) Hydrogele 9, da die Fähigkeit zur Abstimmung der mechanischen Eigenschaften des Hydrogels, Bioaktivität und Abbaugeschwindigkeit. In Bezug auf Leberbezogene Forschung wurde das biokompatible Hydrogel für Virusinfektion Studie der Lebererkrankung 3 angewendet. Als Hepatozyten - Plattform - Design haben zahlreiche Studien Hepatozyten Sandwichkulturen 10,11 und Zellverkapselung innerhalb eines 12,13 Hydrogels verwendet , um die 3D - Umgebung und Zell-ECM und Zell-Zell - Wechselwirkung , die in vivo - Mikroumgebung nachzuahmen wesentlich sind bereitzustellen. However sind diese Plattformen nicht ein hohes Maß an Kontrolle und räumliche Organisation besitzen, was zu einer ungleichmäßigen Eigenschaften durch das Gerüst 14. Das invertierte Kristall kolloidalen (ICC) 14 Gerüst ist eine hochorganisierte 3D - Gerüst für die Zellkultur , die zuerst in den frühen 2000er Jahren eingeführt wurde. unter Verwendung eines Kolloid-Kristall, ein geordnetes Gitter von kolloidalen Teilchen mit variablem Durchmesser der einzigartigen Struktur des Gerüsts kann dem einfachen Herstellungsprozess zurückgeführt werden. Kurz gesagt werden die Verfahren zusammenzufassen, Partikel ordentlich angeordnet und unter Verwendung von Wärme geglüht ein Gitter zu bilden. Die Auslaugung dieses Gitters, durch ein organisches Lösungsmittel, in einem polymerisierten Hydrogels Ergebnisse in hexagonal gepackte kugelförmige Hohlräume 15 mit hoher Oberfläche. Diese hochgeordnete Gerüst sowohl mit synthetischen und natürlichen Materialien , die zuvor hergestellt wurde, einschließlich , aber nicht beschränkt auf Poly (acrylamid) , 16-21, Poly (milch-co-glykolsäure) 15,22-30, Poly (ethylenglykol) 31,32, Poly (2-hydroxyethylmethacrylat) 21,33-35, 36-39 und Chitosan. ICC Gerüste aus nicht-Fouling - Materialien neigen dazu , zelluläre Sphäroiden innerhalb der Hohlräume 14,23,40 zu fördern. Mehrere Zelltypen wurden 43,44 Zellen gezeigt, erfolgreich proliferieren, differenzieren und Funktion innerhalb dieser Konfiguration einschließlich Chondrozyten 41, Stromazellen des Knochenmarks 42 und einzudämmen. Bezug Hepatozyten wurden Untersuchungen mit ICC Scaffolds aus Na 2 SiO 3 und Poly (acrylamid), aber nicht PEG durchgeführt. Mit einfachen Biokonjugation Strategien (dh Aminkopplung durch EDC / NHS), ECM - Proteine ​​konjugierten PEG-Basis Gerüste hergestellt werden können, die mehr Zellbindungsstellen nachweisen kann , eine in - vivo - ähnliche Umgebung zu sein und die Leberfunktion zu verbessern. In diesem Manuskript und der damit verbundenen Video, wir ausführlich die Herstellung des ICC Gerüstunter Verwendung von Poly (ethylenglykol) diacrylat (PEGDA) Hydrogels und eines Polystyrolmikrokügelchens Gitter, optimiert für Hepatokarzinom (Huh-7,5) Kultur. Wir veranschaulichen die Unterschiede zwischen den im allgemeinen nicht klebende bare PEGDA ICC Gerüste und der kollagenbeschichteten PEGDA ICC Gerüsts in Bezug auf die Gerüsttopologie und Zellleistung. Die Lebensfähigkeit der Zellen und Funktion werden qualitativ und quantitativ gemessen Huh-7.5 Zellverhalten zu beurteilen.

<table><tbody><tr><td>0,2 ml PCR-Röhrchen</td><td>Axygen Scientific</td><td>PCR-02D-C</td><td>Kochbeständiger</td></tr><tr><td>Gorilla Glue</td><td>Gorilla Glue, Inc.</td><td>Hängt vom Anbieter ab. Diese wurde in einem örtlichen Geschäft gekauft.</td><td></td></tr><tr><td>Objektträger</td><td>VWR</td><td>631-1575</td><td>Maße: 24 x 60 mm2</td></tr><tr><td>Polystyrol-Kugeln</td><td>Fisher Scientific</td><td>TSS#4314A</td><td>Durchmesser = 140 &micro; m; 3x104 Partikel pro Milliliter und 1,4 % Größenverteilung</td></tr><tr><td>Ethanol</td><td>Merck</td><td>1,00983,1011</td><td>absolut für die Analyse EMSURE; Verdünnung auf 70 % mit Milli-Q Wasser</td></tr><tr><td>Ultraschallbad</td><td>Elma</td><td>S10H</td><td></td></tr><tr><td>Geräteofen</td><td>Nabertherm</td><td>N7/H</td><td>Ausrüstung</td></tr><tr><td>200 & Mikro; l Pipettenspitze</td><td>Axygen Scientific</td><td>T-210-Y-R-S</td><td></td></tr><tr><td>Schaukelschüttler</td><td>VWR</td><td>444-0142</td><td></td></tr><tr><td>Polyethylenglykol (PEG)</td><td>Merck</td><td>1.09727.0100</td><td>Mw= 4 kDa; Durch die Acrylation von PEG-Monomeren und die Reinigung des resultierenden Niederschlags entsteht ein PEGDA-Makromer mit Mw = 4,6&nbsp; kDa</td></tr><tr><td>Zentrifuge</td><td>Beckman Coulter</td><td>392932</td><td>Ausrüstung</td></tr><tr><td>Acrylat-Poly(ethylenglykol) - Succinimidylvalerat</td><td>Laysan Bio</td><td>ACRL-PEG-SVA-3400-1g</td><td>Mw = 3,4 kDa</td></tr><tr><td>2-Hydroxy-4'-(2-hydroxyethoxy)-2-methylpropiophenon</td><td>Sigma Aldrich</td><td>410896</td><td></td></tr><tr><td>Vortex</td><td>VWR</td><td>58816-123</td><td>Ausrüstung</td></tr><tr><td>Mikrozentrifuge</td><td>Eppendorf</td><td>5404 000.413</td><td></td></tr><tr><td>Paraffinfilm</td><td>Parafilm M&nbsp;</td><td>#PM996</td><td>Gehalten bei 9" mit einer Intensität von 10,84&nbsp; mW/cm2</td></tr><tr><td>Bluewave 200 UV-Strahler</td><td>Blaze Technology&nbsp;</td><td>120008, 122300</td><td></td></tr><tr><td>Tetrahydrofuran (THF)</td><td>Merck</td><td>107025</td><td></td></tr><tr><td>Orbitalschüttler</td><td>Heidolph</td><td>543-123120-00-5</td><td></td></tr><tr><td>Kollagen Typ I</td><td>Sigma Aldrich</td><td>C3867-1VL</td><td>Ab Ratte 1x, ohne CaCl2 & MgCl2; pH = 7,2</td></tr><tr><td>phosphatgepufferte Kochsalzlösung (PBS)</td><td>Gibco</td><td>20012-027</td><td>16 % w/v aq. 10 x 10&nbsp; ml</td></tr><tr><td>Paraformaldehyd</td><td>VWR</td><td>43368.9M</td><td>Ausrüstung</td></tr><tr><td>Freezone 4.5 Gefriertrockner</td><td>Labconco</td><td>7750020</td><td>Ausrüstung</td></tr><tr><td>Sputter Coater</td><td>Jeol Ltd.</td><td>JFC-1600</td><td>Ausrüstung</td></tr><tr><td>Rasterelektronenmikroskop</td><td>Jeol Ltd.</td><td>JSM 5310</td><td></td></tr><tr><td>Anti-Maus-Primärantikörper gegen Kollagen Typ I</td><td>Abcam</td><td>ab6308</td><td></td></tr><tr><td>Anti-Maus-Sekundärantikörper, konjugiert mit Alexa Fluor 488</td><td>Life Technologies</td><td>A21121</td><td></td></tr><tr><td>Platte, Gewebekultur 24 Well, flacher Boden (Nunklon)&nbsp;</td><td>Bio-Rev PTE Ltd</td><td>3820-024</td><td></td></tr><tr><td>Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DMEM) 2,5 g/l Glukose w/ L-Gln</td><td>Lonza</td><td>12-604F</td><td></td></tr><tr><td>Fötales Rinderserum (FBS)</td><td>Gibco</td><td>A15-151</td><td></td></tr><tr><td>Penicillin-Streptomycin (P/S)</td><td>Life Tchnologies</td><td>15140-122 E</td><td></td></tr><tr><td>100 mm Corning unbehandelte Kulturschalen</td><td>Sigma Aldrich</td><td>CLS430591</td><td></td></tr><tr><td>0,25 % Trypsin-EDTA</td><td>Gibco</td><td>25200-056</td><td>Geräte; 37&nbsp; &deg; C, 5% Luftfeuchtigkeit</td></tr><tr><td>Forma Steri-Cycle CO2 Inkubatoren</td><td>Thermofisher Scientific</td><td>371</td><td></td></tr><tr><td>Hausser Bright-Line Phase Hämazytometer</td><td>Thermofisher Scientific</td><td>02-671-6</td><td></td></tr><tr><td>Lebend/Tot Lebensfähigkeit/Zytotoxizität Kit für Säugetierzellen</td><td>Life Technologies</td><td>L3224&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>CCK-8 Assay</td><td>Dojindo Laboratories</td><td>CK04-11</td><td>Mononatriumsalz-Reagenz (MSR)</td></tr><tr><td>Infinite 200 PRO Mikroplatten-Reader&nbsp;</td><td>Tecan</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Albumin Human ELISA kit</td><td>Abcam</td><td>ab108788</td><td></td></tr><tr><td>Triton X-100</td><td>Bio-Rad</td><td>#1610407</td><td></td></tr><tr><td>Rinderserumalbumin (BSA)</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>A2153-50G</td><td></td></tr><tr><td>Anti-Maus-Primärantikörper (gegen CYP3A4, Albumin)</td><td>Santa Cruz Biotechnology</td><td>sc-53850; sc-271605</td><td></td></tr><tr><td>DAPI</td><td>Life Technologies</td><td>D3571</td><td></td></tr><tr><td>Alexa Fluor 555 markiert Phalloidin</td><td>Life Technologies</td><td>A34055</td><td></td></tr><tr><td>Trizol</td><td>Life Technologies</td><td>15596-026</td><td></td></tr><tr><td>Chloroform</td><td>VWR</td><td>22706.326</td><td></td></tr><tr><td>Isopropanol</td><td>Fisher Scientific</td><td>67-63-0</td><td></td></tr><tr><td>DPEC Wasser</td><td>Thermofisher Scientific</td><td>AM9916</td><td></td></tr><tr><td>Nanodrop 2000c Spektralphotometer</td><td>Thermofisher Scientific</td><td>ND-2000</td><td></td></tr><tr><td>iScript Reverse Transkription Supermix&nbsp;</td><td>Bio-Rad Laboratories</td><td>1708840</td><td></td></tr><tr><td>SYBR select Master Mix für CFX</td><td>Life Technology</td><td>4472937</td><td></td></tr><tr><td>Primer (zur Auswahl)</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>CFX96 Real-Time System, C-1000 Touch Thermal Cycler</td><td>Bio Rad Laboratories</td><td>SOFT-CFX-31-PATCH&nbsp;</td><td></td></tr></tbody></table>

die herstellung von inverted kolloid-kristallen poly (ethylenglycol) scaffold: eine dreidimensionale zellkultur-plattform für leber-tissue engineering

Fabrication of Inverted Colloidal Crystal Poly(ethylene glycol) Scaffold: A Three-dimensional Cell Culture Platform for Liver Tissue Engineering

Die Fähigkeit Hepatozyten Funktion in vitro zu halten, zum Zweck der Xenobiotika &#39;Zytotoxizität testen, Virusinfektion zu studieren und an der Leber zielgerichtete Medikamente zu entwickeln, erfordert eine Plattform in dem Zellen richtige biochemische und mechanische Signale empfangen. Recent Lebergewebe-Engineering-Systeme haben dreidimensionale (3D) Scaffolds synthetischen oder natürlichen zusammengesetzt aus Hydrogelen, verwendet werden, aufgrund ihrer hohen Wasserretention und ihre Fähigkeit, die mechanische Reize von den Zellen benötigt, bereitzustellen. Es wurde in der umgekehrten kolloidalen Kristall (ICC) Gerüst, eine neuere Entwicklung, die eine hohe räumliche Organisation, homotypische und heterotypic Zell-Interaktion erlaubt, sowie zellextrazellulären Matrix (ECM) Wechselwirkung wachsendes Interesse. Hier beschreiben wir ein Protokoll des ICC-Gerüst unter Verwendung von Poly (Ethylenglycol) diacrylat (PEGDA) und die Partikel Auslaugung Verfahren herzustellen. Kurz gesagt, wird ein Gitter aus Mikrokügelchen-Partikel hergestellt, wonach eine vorge polymer Lösung hinzugefügt wird , richtig polymerisiert, und die Partikel werden dann entfernt oder ausgewaschen, mit einem organischen Lösungsmittel (beispielsweise Tetrahydrofuran). Die Auflösung der Gitter ergibt ein hochporöses Gerüst mit kontrolliertem Porengrößen und interconnectivities die Medien erlauben Zellen leichter zu erreichen. Diese einzigartige Struktur erlaubt hohe Oberfläche für die Zellen der PEGDA ICC Gerüst auch mit Proteinen sowie einfache Kommunikation zwischen den Poren, und die Fähigkeit zur Beschichtung anhaften zeigt eine deutliche Wirkung auf die Zellleistung. Wir analysieren die Morphologie des Gerüsts sowie die hepatocarcinoma Zelle (Huh-7.5) Verhalten in Bezug auf die Lebensfähigkeit und Funktion, um die Wirkung von ICC-Struktur und ECM-Beschichtungen zu erkunden. Insgesamt bietet dieses Papier ein detailliertes Protokoll einer sich abzeichnenden Gerüst, das breite Anwendungen im Tissue Engineering hat, hier vor allem technische Lebergewebe.

Die repräsentative Ergebnisse für die strukturelle Charakterisierung des ICC Gerüst und den Vergleich der einzelnen ICC Wirksamkeit des Gerüsts Zustand Hepatozyten in die Kultivierung sind unten dargestellt und erläutert. Die ICC Gerüstbedingungen in diesen Ergebnissen sind Kollagenbeschichtungen von 0 &amp; mgr; g / ml (Bare), 20 &amp; mgr; g / ml (Collagen 20), 200 &amp; mgr; g / ml (Collagen 200) und 400 ug / ml (Collagen 400) und dem anfänglichen huh-7.5 Zellaussaat Zahl ist 1x10 <su...

Dieses Manuskript präsentiert ein detailliertes Protokoll für die Herstellung einer entstehenden dreidimensionalen Hepatozytenkulturplattform, das invertierte kolloidale Kristallgerüst und die begleitenden Techniken zur Beurteilung des Verhaltens von Hepatozyten. Die größenkontrollierbaren Poren, die Interkonnektivität und die Fähigkeit, extrazelluläre Matrixproteine an das Poly(ethylenglykol) (PEG)-Gerüst zu konjugieren, verbessern die Leistung der Huh-7.5-Zelle.

Die Herstellung von Inverted Kolloid-Kristallen Poly (Ethylenglycol) Scaffold: Eine dreidimensionale Zellkultur-Plattform für Leber-Tissue Engineering

The ability to maintain hepatocyte function in vitro, for the purpose of testing xenobiotics&#39; cytotoxicity, studying virus infection and developing ...

Das übergeordnete Ziel dieses Verfahrens ist die Herstellung von PEG-basierten invertierten kolloidalen Kristallgerüsten mit einer extrazellulären Matrix, die für Anwendungen im Bereich des Lebergewebes Engineering codiert. Das Lebergewebes Engineering ist ein spannendes Forschungsfeld im Bereich des Gewebe Engineering und der regenerativen Medizin. Wir erstellen 3D-Engineering-Gerüste, die Leberzellen ermöglichen, ihre Funktion über einen langen Zeitraum aufrechtzuerhalten.Die Auswirkungen dieser Technik reichen bis hin zur Arzneimittelprüfung, da Leberzellen, die mit diesem System kultiviert werden, ihre Funktion möglicherweise länger beibehalten und besser auf Arzneimittel reagieren. Obwohl diese Methode Einblicke in das Gewebeengineering ermöglichen kann, lässt sie sich auch auf andere Systeme anwenden, beispielsweise solche, die Stammzellen verwenden. Das Verfahren wird von Hitomi demonstriert, einer Doktorandin aus meinem Labor.Um die Mikroperlenformen herzustellen, schneiden Sie zunächst die Spitzen von 0,2-Milliliter-kochfesten Mikrozentrifugenröhrchen auf der 40-Mikroliter-Markierung ab. Verwenden Sie wasserfesten Kleber, um die Oberseiten der abgeschnittenen Röhrchen auf

fabrication-inverted-colloidal-crystal-poly-ethylene-glycol-scaffold

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Wir beschreiben eine Chip-basierte Plattform für die dreidimensionale Kultivierung von Zellen in Mikro-Bioreaktoren. Ein Chip kann bis zu 10 Mio. Zellen, die unter genau definierten Bedingungen im Hinblick auf die Strömung, Sauerstoffspannung etc. in einem sterilen, geschlossenen Kreislauf kultiviert werden können.

Chip-basierte dreidimensionale Zellkultur in perfundierten Micro-Bioreaktoren

Um hochorganisierte Strukturen aus komplexem Gewebe zu erzeugen, muss man mehrere Materialien und Zelltypen zu einem integrierten Komposit zusammenfügen.  Dieses kombinatorische Design umfasst organspezifische geschichtete Zellblätter mit zwei unterschiedlichen biologisch abgeleiteten Materialien, die eine starke fibröse Matrixbasis enthalten, und Endothelzellen zur Verbesserung der Bildung neuer Gefäße.

Tissue Engineering: Aufbau eines Multizelluläre 3D Gerüst für die Lieferung von Layered Zellschichten

Die gewebespezifischen extrazellulären Matrix (ECM) ist ein wichtiger Vermittler der Zellfunktion. Dieser Artikel beschreibt Verfahren zur Synthese von reinem ECM-derived Schaumstoffen und Microcarriern , die ohne die Notwendigkeit für eine chemische Vernetzung für Anwendungen in der modernen 3D in vitro Zellkulturmodellen oder als Pro-regenerative bioscaffolds in Kultur stabil ist.

Die Herstellung von extrazellulären Matrix-derived Foams und Mikroträgern als gewebespezifische Zellkultur und Delivery-Plattformen

Dieses Protokoll beschreibt die Herstellung von elastischen 3D makroporöse Microcryogels durch die Integration von Microfabrication mit Cryogelation Technologie. Beim Laden mit Zellen, entstehen 3D Microtissues, die kann leicht injizierte in Vivo , regenerative Therapie zu erleichtern oder zu Arrays für in-vitro- Hochdurchsatz-Drogen-Screening montiert.

3D Microtissues für injizierbare Regenerative Therapie und Hochdurchsatz-Drogen-Screening

Hier präsentieren wir Ihnen ein Protokoll zur 3D-Kultur-Systeme selbst Montage Peptid Gerüste zur Förderung der Differenzierung der entdifferenzierten menschlichen Gelenkknorpel Chondrozyten Knorpel-ähnliches Gewebe zu erhalten.

Kultivierung von Säugerzellen in dreidimensionale Peptid Gerüste

Dieses Protokoll stellt ein biomimetisches 3D-Modell mit begleitendem fibrotischen Stromfach dar. Hergestellt mit physiologisch relevanten Hydrogelen in Verhältnissen, die die biophysikalischen Eigenschaften der stromalen extrazellulären Matrix imitieren, ein aktiver Mediator von zellulären Wechselwirkungen, Tumorwachstum und Metastasierung.

Ein biomimetisches Modell für Leberkrebs zur Untersuchung von Tumor-Stroma-Wechselwirkungen in einer 3D-Umgebung mit tunablen biophysikalischen Eigenschaften

Lebererkrankungen werden durch viele Ursachen verursacht, die Fibrose oder Zirrhose fördern. Die Transplantation ist die einzige Option zur Wiederherstellung der Gesundheit. Angesichts des Mangels an transplantierbaren Organen müssen jedoch Alternativen erforscht werden. Unsere Forschung schlägt die Implantation von Kollagengerüsten in Lebergewebe aus einem Tiermodell vor.

Dreidimensionale Kollagenmatrix-Gerüstimplantation als Leberregenerationsstrategie

Das vorliegende Protokoll optimiert die Methoden der  Leber-in-situ-Perfusion/Dezellularisierung und der Zwei-Photonen-Mikroskopie, um eine zuverlässige Plattform zur Visualisierung der Dynamik des Remodells der extrazellulären Matrix (EZM) während der nicht-alkoholischen Steatohepatitis (NASH) zu schaffen.

3D-Bildgebung der extrazellulären Matrix der Leber in einem Mausmodell der nicht-alkoholischen Steatohepatitis

Organoide revolutionieren die personalisierte Gewebemodellierung für die Organentwicklung, Wirkstoffforschung und Krankheitsforschung. Die Organoid-Technik schreitet voran und führt zur Herstellung komplizierter synthetischer Gewebe. Ziel ist es, Morphogenese, Assembloid-Technologie und Biomatrizen zu integrieren, um das Tissue Engineering voranzutreiben. Dieses Protokoll hilft bei der Modellierung der Leberorganogenese und der Festlegung von Richtlinien für den Aufbau synthetischer Gewebe.

In-vitro-Kultivierungstechniken zur Modellierung der Leberorganogenese, zum Aufbau von Assembloiden und zum Design synthetischer Gewebe unter Verwendung menschlicher Zelllinien

Dieses Protokoll stellt eine optimierte zweistufige Kollagenase-Leberperfusionstechnik in einem Rattenmodell vor und zeigt die Verwendung von isolierten Hepatozyten für die in vitro Langzeitkultur von 3D-Organoiden.

Perfusion der Rattenleber und Isolierung primärer Hepatozyten: ein altes Verfahren, das für die hochmoderne 3D-Organoidkultur entscheidend ist

Erfahren Sie die Herstellung von PEG-basierten inversen kolloidalen Kristallscaffolds für Lebergewebe-Engineering. Diese Methode ermöglicht längere Aufrechterhaltung der Hepatozytenfunktion und verbessert Anwendungen in der Arzneimittelprüfung.

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