Name: Arbeiten mit Auditory HEI-OC1-Zellen (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2016-09-03T14:00:00.000+00:00
Duration: 8 min 56 s
Description: Lernen Sie die Handhabung von HEI-OC1-Zellen zur Untersuchung pharmakologischer Wirkungen auf auditorische Zellen und zur Charakterisierung des Motorproteins Prestin. Diese standardisierte Methode ermöglicht vergleichbare Studien.

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<li>Kalinec, G. M., Webster, P., Lim, D. J., Kalinec, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+cochlear+cell+line+as+an+in+vitro+system+for+drug+ototoxicity+screening%5BTitle%5D)+AND+%22Audiol.+Neurootol%22%5BJournal%5D)">A cochlear cell line as an in vitro system for drug ototoxicity screening.</a> Audiol. Neurootol. 8, 177-189 (2003).</li>
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<li>Majno, G., Joris, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Apoptosis%2C+oncosis%2C+and+necrosis.+An+overview+of+cell+death%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Pathol%22%5BJournal%5D)">Apoptosis, oncosis, and necrosis. An overview of cell death.</a> Am J Pathol. 146, 3-15 (1995).</li>
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<li>Sun, L., Wang, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+new+kind+of+cell+suicide%3A+mechanisms+and+functions+of+programmed+necrosis%5BTitle%5D)+AND+%22Trends+Biochem+Sci%22%5BJournal%5D)">A new kind of cell suicide: mechanisms and functions of programmed necrosis.</a> Trends Biochem Sci. 39, 587-593 (2014).</li>
<li>Chan, F. K., Luz, N. F., Moriwaki, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Programmed+necrosis+in+the+cross+talk+of+cell+death+and+inflammation%5BTitle%5D)+AND+%22Annu+Rev+Immunol%22%5BJournal%5D)">Programmed necrosis in the cross talk of cell death and inflammation.</a> Annu Rev Immunol. 33, 79-106 (2015).</li>
<li>Vercammen, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dual+signaling+of+the+Fas+receptor%3A+initiation+of+both+apoptotic+and+necrotic+cell+death+pathways%5BTitle%5D)+AND+%22J+Exp+Med%22%5BJournal%5D)">Dual signaling of the Fas receptor: initiation of both apoptotic and necrotic cell death pathways.</a> J Exp Med. 188, 919-930 (1998).</li>
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<li>Bian, S., Koo, B. W., Kelleher, S., Santos-Sacchi, J., Navaratnam, D. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+highly+expressing+Tet-inducible+cell+line+recapitulates+in+situ+developmental+changes+in+prestin%27s+Boltzmann+characteristics+and+reveals+early+maturational+events%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol+Cell+Physiol%22%5BJournal%5D)">A highly expressing Tet-inducible cell line recapitulates in situ developmental changes in prestin's Boltzmann characteristics and reveals early maturational events.</a> Am J Physiol Cell Physiol. 299, C828-C835 (2010).</li>
<li>Abe, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Developmental+expression+of+the+outer+hair+cell+motor+prestin+in+the+mouse%5BTitle%5D)+AND+%22J+Membr+Biol%22%5BJournal%5D)">Developmental expression of the outer hair cell motor prestin in the mouse.</a> J Membr Biol. 215, 49-56 (2007).</li>
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<li>Tsunoo, M., Perlman, H. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cochlear+Oxygen+Tension%3A+Relation+to+Blood+Flow+and+Function%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Otolaryngol%22%5BJournal%5D)">Cochlear Oxygen Tension: Relation to Blood Flow and Function.</a> Acta Otolaryngol. 59, 437-450 (1965).</li>
</ol>

Die Autoren erklären, dass kein bestehender oder potenzieller Interessenkonflikt besteht.

In diesem Bericht beschreiben wir, wie sie zur Kultur HEI-OC1-Zellen und verwenden Mechanismen der medikamenteninduzierten Zytotoxizität zu bewerten und funktionellen Eigenschaften von Prestin, der molekulare Motor der Cochlea-OHC zu untersuchen. Die technischen Verfahren sind jedoch allgemein genug, um leicht an verschiedene Studien anzupassen. Alle Protokolle hier beschrieben sind, erfordern die korrekte Verwendung von gut etablierten Zellkulturtechniken 10. Genau wie bei jedem ...

House Ear Institute-Corti - Organ 1 (HEI-OC1) Zellen werden aus dem Hörorgan einer transgenen Maus 1,2 abgeleitet. Inkubation einer beliebigen Zelle aus dieser transgenen Maus , bei 33 ° C / 10% CO 2 (permissive Bedingungen) induziert die Expression eines Gens , das Immortalisieren Entdifferenzierung und beschleunigter Proliferation auslöst; Bewegen der Zellen auf 39 ° C / 5% CO 2 (nicht-permissive Bedingungen) führen zu einer verminderten Proliferation, Differenzierung und zumindest im Fall von HEI-OC1, Zelltod 2,3. HEI-OC1-Zellen wurden in unserem Labor vor über einem Jahrzehnt kloniert und charakterisiert, und die anfängliche Studien gezeigt, dass sie spezifische Marker der Cochlea-Haarzellen, wie prestin, Myosin 7a, Atoh1, BDNF, Calbindin und Calmodulin exprimieren, sondern auch Marker der Stütz Zellen wie Connexin 26 und Fibroblasten - Wachstumsfaktor - Rezeptor (FGF-R) 2. Daher wurde vorgeschlagen, dass HEI-OC1 eine commo darstellen könnten Vorläufer für sensorische und Stützzellen des Corti - Organ 2. Parallel Studien lieferten starke Hinweise darauf , dass ototoxic Medikamente wie Cisplatin, Gentamicin und Streptomycin induzierte Caspase-3 - Aktivierung in diesen Zellen archetypischen, während Medikamente als nicht-ototoxische, wie Penicillin, nicht 2,3. Daher wurde diese Zelllinie als ein in vitro - System vorgeschlagen , um die zellulären und molekularen Mechanismen in Ototoxizität beteiligt zu untersuchen , und für das Screening des potentiellen Ototoxizität oder otoprotektiven Eigenschaften neuer pharmakologischer Wirkstoffe. Es wird geschätzt, dass HEI-OC1-Zellen wurden in mehr als einhundertfünfzig Untersuchungen in den letzten zehn Jahren veröffentlicht verwendet. Während der Suche das Hauptziel der meisten Studien war auf dem Potential pro-apoptotische Wirkung verschiedener Medikamente beteiligt diese Zelllinie, andere wichtige Zellprozesse wie Autophagie und Seneszenz haben gerade erst begonnen 4-7 in HEI-OC1 - Zellen untersucht werden. ichna aktuelle Studie aus unserem Labor 8 verwendeten wir HEI-OC1 - Zellen einen umfassenden Satz von Daten über den Zelltod, Überleben, Proliferation, Seneszenz und durch unterschiedliche pharmakologische Wirkstoffe in der Klinik verwendet häufig induzierten Autophagie zu sammeln. Wir verglichen auch einige der Antworten von HEI-OC1-Zellen mit denen aus HEK-293 (menschliche embryonale Nierenzellen) und HeLa (humane Epithelzellen) Empfangen identische Behandlung. Unsere Ergebnisse zeigten, dass HEI-OC1 Zellen an die jedes Medikament in einer charakteristischen Art und Weise, mit einem unverwechselbaren dosis- und zeitabhängige Empfindlichkeit auf mindestens einer der Mechanismen zu untersuch reagieren. Wir betonten auch in dieser Studie , dass eine korrekte Interpretation der experimentellen Ergebnisse erfordern parallel Studien mit mehr als eine Technik 8 durchgeführt wird . In einer anderen Studie untersuchten wir die Verwendung von HEI-OC1 - Zellen die funktionelle Reaktion von Prestin, das Motorprotein von Cochlea äußeren Haarzellen (OHC) 9 zu bewerten </sup&gt;. Wir berichteten Durchflusszytometrie und der konfokalen Laser-Scanning-Mikroskopie Studien über die Muster von Prestin Ausdruck, sowie nichtlineare Kapazität (NLC) und Ganzzell-Patch-Clamp-Untersuchungen in HEI-OC1-Zellen, die in permissiven (P-HEI-OC1) und nicht permissive (NP-HEI-OC1) Bedingungen. Unsere Ergebnisse zeigten, dass sowohl die Gesamt prestin Expression und Plasmamembran-Lokalisations Anstieg in einer zeitabhängigen Weise in NP-HEI-OC1-Zellen. Interessanterweise fanden wir auch , dass der Anstieg in prestin Lokalisierung in der Plasmamembran von NP-HEI-OC1 - Zellen mit einer Abnahme korreliert in Na + K + ATPase, welche von der Plasmamembran zum Zytoplasma ohne wesentliche Änderungen in Gesamtzellexpressions transloziert. Darüber hinaus haben wir gezeigt, dass P-HEI-OC1-Zellen haben eine robuste NLC Motorfunktion prestin verbunden, die abnimmt, wenn die Dichte der prestin Moleküle, die an der Plasmamembran erhöht. Insgesamt stark diese Ergebnisse die Nützlichkeit von HEI-OC unterstützen1-Zellen auditorischen Proteine ​​zu untersuchen. In diesem Video-Artikel beschreiben wir, wie HEI-OC1-Zellen zu Kultur, warum es bequem ist, Zellen zu verwenden, die an der permissiven Bedingungen (P-HEI-OC1) für Zytotoxizitätsuntersuchungen, wie der Mechanismus / s von arzneimittelinduzierten Zytotoxizität zu bewerten und wie elektro~~POS=TRUNC Untersuchungen (zB Patch-clamp, nicht-lineare Kapazität (NLC)) durchzuführen funktionellen Eigenschaften von prestin, der molekularen Motor Cochlea OHCs zu untersuchen.

<table><tbody><tr><td>HEI-OC1-Zellen</td><td></td><td></td><td>ALLE ASSAY-KITS, AUSRÜSTUNGEN&nbsp;</td></tr><tr><td>Klasse II Biologische Sicherheitswerkbank</td><td>Die Baker Company</td><td>Sterilgard III</td><td>UND DIE IN DER</td></tr><tr><td>Kühlzentrifuge</td><td>Eppendorf</td><td>5810R</td><td>VORHERIGEN 2 SÄULEN ANGEGEBENEN UNTERNEHMEN SIND NUR</td></tr><tr><td>Inverses Mikroskop</td><td>Zeiss</td><td>Axiovert 25</td><td>BEISPIELE, UND JEDES ANDERE ÄHNLICHE</td></tr><tr><td>WASSERBAD</td><td>Stovall</td><td>HWB115</td><td>PRODUKT KÖNNTE VERWENDET WERDEN.</td></tr><tr><td>Zellzähler</td><td>Nexcelom</td><td>Cellometer Auto T4</td><td></td></tr><tr><td>Zwei (2) Zellinkubatoren, einer bei 33 > C/10% CO2 und andere bei 39 &deg; C/5% CO2</td><td>Forma Scientific</td><td>3110</td><td></td></tr><tr><td>Zellkulturschalen, PS, 100 mm x 20 mm mit Belüftungsöffnungen</td><td>Greinier Bio-One</td><td>664-160</td><td></td></tr><tr><td>Zellkulturschalen, PS, 60 mm x 15 mm mit Belüftungsöffnungen&nbsp;</td><td>Greiner Bio-One</td><td>628160</td><td></td></tr><tr><td>Cellstar Gewebekulturflaschen&nbsp; 250 ml</td><td>Greiner Bio-One</td><td>658-175</td> Cellstar Gewebekultur&nbsp&nbsp&�&r Greiner Bio-One 660-175<td></td></tr><tr><td></td><td></td><td></td>&<td>nbsp</td></tr><tr><td>; 6 Well Zellkulturplatte, mit Deckel-Cellstar</td><td>Greiner Bio-One</td><td>657-160</td><td></td></tr><tr><td>Microtest Gewebekulturplatte, 96 Well, flacher Boden mit Deckel</td><td>Becton Dickinson</td><td>353072</td><td></td></tr><tr><td>Micro-Assay-Plate, Chimmey, 96 Well weiß, klarer Boden</td><td>Greiner Bio-One</td><td>655098</td><td></td></tr><tr><td>50 ml Polypropylen konisches Röhrchen mit Kappe Cellstars</td><td>Becton Dickinson&nbsp;</td><td>352070</td><td></td></tr><tr><td>15 ml konische Gefäße aus Polypropylen mit Verschluss-Cellstars</td><td>Greiner Bio-One</td><td>188-271</td><td></td></tr><tr><td>PBS pH 7,4 (1x)&nbsp;</td><td>Life Technologies</td><td>10010-023</td><td></td></tr><tr><td>Dulbecco' s Modifizierter Adler" s Medium (DMEM)</td><td>Life Technologies</td><td>11965-084</td><td></td></tr><tr><td>Fötales Rinderserum (FBS)&nbsp;</td><td>Hyclone</td><td>SH10073.1</td><td></td></tr><tr><td>Leibovitz's L-15 Medium, kein Phenolrot</td><td>Gibco/Invitrogen</td><td>21083-027</td><td></td></tr><tr><td>Trypsin, 0,25%&nbsp;</td><td>Life Technologies</td><td>25200-056</td><td></td></tr><tr><td>TACS MTT Zellproliferations-Assay-Kit</td><td>Trevigen</td><td>4890-25-K</td><td></td></tr><tr><td>Caspase-Glo 3/7 Assay&nbsp; Kit</td><td>Promega</td><td>&nbsp; G8091&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>BrdU-Zellproliferations-Assay-Kit&nbsp;</td><td>Zell-Signalweg</td><td>6813</td><td></td></tr><tr><td>Nicht-enzymatische Zelldissoziationslösung</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>C5789</td><td></td></tr><tr><td>Cell-Tox Green Zytotoxizitäts-Assay-Kit</td><td>Promega</td><td>&nbsp; Nr. G8741&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>FACSAriaIII Instrument&nbsp;</td><td>BD Biowissenschaften</td><td>&nbsp; FACSAriaIII</td><td>mit 488 nm Anregung (blauer Laser)</td></tr><tr><td>Digital Blot Scanner</td><td>LI-COR</td><td>C-DiGit</td><td></td></tr><tr><td>Elektrophorese und Blotting Unit</td><td>Hoefer</td><td>SE300 miniVE</td><td></td></tr><tr><td>Spectra Max 5 Plate Reader mit Soft Max Pro 5.2 Software</td><td>Molecular Devices</td><td>SpectraMax 5</td><td></td></tr><tr><td>Patch-Clamp Verstärker</td><td>HEKA</td><td>EPC-10</td><td></td></tr><tr><td>Puller zur Vorbereitung Patch-Elektroden</td><td>Sutter Instruments</td><td>P-97</td><td></td></tr></tbody></table>

arbeiten mit auditory hei-oc1-zellen

Working with Auditory HEI-OC1 Cells

HEI-OC1 ist eine der wenigen Maus-Hörzelllinien, die für Forschungszwecke zur Verfügung stehen. Ursprünglich als In-vitro-System für das Screening ototoxischer Arzneimittel vorgeschlagen, wurden diese Zellen verwendet, um arzneimittelaktivierte apoptotische Signalwege, Autophagie, Seneszenz, den Mechanismus des Zellschutzes, Entzündungsreaktionen, Zelldifferenzierung, genetische und epigenetische Wirkungen pharmakologischer Arzneimittel, Wirkungen von Hypoxie, oxidativen und endoplasmatischen Retikulumstress und die Expression molekularer Kanäle und Rezeptoren zu untersuchen. Neben anderen wichtigen Markern der Cochlea-Haarzellen exprimieren HEI-OC1-Zellen endogen Prestin, das paradigmatische Motorprotein der äußeren Haarzellen. Daher können sie sehr nützlich sein, um neue funktionelle Aspekte dieses wichtigen auditorischen Proteins aufzuklären. HEI-OC1-Zellen sind sehr robust, und ihre Kultur weist in der Regel keine großen Komplikationen auf. Sie erfordern jedoch einige besondere Bedingungen, wie z. B. die Vermeidung der Verwendung gängiger antibakterieller Cocktails, die Streptomycin oder andere Antibiotika enthalten, sowie die Inkubation bei 33 °C, um die Zellproliferation zu stimulieren, und die Inkubation bei 39 °C, um die Zelldifferenzierung auszulösen. Hier beschreiben wir, wie HEI-OC1-Zellen kultiviert und in einigen typischen Assays verwendet werden, wie z. B. Zellproliferation, Lebensfähigkeit, Tod, Autophagie und Seneszenz, sowie wie Patch-Clamp- und nichtlineare Kapazitätsmessungen durchgeführt werden.

In ein paar jüngsten Veröffentlichungen berichteten wir eine umfassende Reihe von Studien zur Bewertung der Reaktion von dem Ziel HEI-OC1 - Zellen auf mehrere häufig verwendete pharmakologische Wirkstoffe sowie die Untersuchung prestin Funktion 8,9. In diesen Studien haben wir die Verwendung aller Protokolle in den vorhergehenden Abschnitten beschrieben. Eines der Ergebnisse dieser früheren Studien war , dass HEI-OC...

House Ear Institute-Organ of Corti 1 (HEI-OC1) ist eine der wenigen Maus-Hörzelllinien, die derzeit für Forschungszwecke verfügbar sind. Dieses Protokoll beschreibt, wie mit HEI-OC1-Zellen gearbeitet werden kann, um die zytotoxischen Wirkungen von pharmakologischen Arzneimitteln sowie die funktionellen Eigenschaften von Innenohrproteinen zu untersuchen.

Arbeiten mit Auditory HEI-OC1-Zellen

HEI-OC1 is one of the few mouse auditory cell lines available for research purposes. Originally proposed as an in vitro system for screening of ototoxic ...

Das übergeordnete Ziel dieses Protokolls besteht darin, die grundlegenden Verfahren für die Arbeit mit HEI-OC1-Zellen zu beschreiben, die zur Untersuchung der Wirkungen pharmakologischer Substanzen auf auditorische Zellen sowie zur Unterstützung der funktionellen Charakterisierung des Motorproteins Prestin verwendet werden können. HEI-OC1-Zellen werden von zahlreichen Forschern weltweit in unterschiedlichen Experimenten mit verschiedenen Zielsetzungen und unter Anwendung verschiedener Techniken eingesetzt. Die hier beschriebenen Verfahren sollen hoffentlich eine gemeinsame Grundlage schaffen, um diese Studien miteinander vergleichbar zu machen.Selbstverständlich können diese experimentellen Verfahren weiter verbessert werden. Doch die Unterschiede zu den hier beschriebenen könnten entscheidend sein, um möglicherweise widersprüchliche Ergebnisse zu verstehen und zu erklären. In dieser Demonstration beschreiben wir, wie man mit HEI-OC1-Zellen arbeitet, beginnend mit einer gefrorenen Aliquotprobe, bis die Proben für verschiedene Studien mit weit verbreiteten Methoden bereitstehen.Um dieses Verfahren zu beginnen, entnehmen Sie ein Gefäß mit kryokonservierten HEI-OC1-Zellen aus flüssige

Research

Forschung

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Biology

Biologie

Whole-Cell-Patch-Clamp Messungen von auditiven Nervenfaser Dendriten an der inneren Haarzelle ribbon Synapsen im Säuger-Cochlea.

Postsynaptische Recordings am afferenten Dendriten Kontaktaufnahme mit Cochlear inneren Haarzellen: Monitoring multivesikulären Veröffentlichung in einem Ribbon Synapse

Eine zuverlässige Methode, um der äußeren Haarzellen (OHC) beweglich Reaktionen, einschließlich Elektromotilität, langsame Motilität und Biegen, untersuchen beschrieben. OHC Motilität wird durch die Stimulation mit einem externen elektrischen Wechselfeld, und die Methode nutzt die Highspeed-Aufnahme, LED-Beleuchtung, und die letzte Generation Bildanalyse-Software.

Die Untersuchung der äußeren Haarzellen Motilität mit einer Kombination von externen elektrischen Wechselfeld Stimulation und High-Speed-Image Analysis

Cochlea-Implantate (CI) ermöglichen durch direkte elektrische Stimulation des Hörnervs zu hören. , Schlechte Frequenz und Intensität Auflösung begrenzt jedoch die Qualität der mit CIs zu hören. Hier beschreiben wir optogenetische Stimulation des Hörnervs bei Mäusen als alternative Strategie für auditive Forschung und Entwicklung künftiger CIs.

Optogenetische Stimulation des Hörnervs

Es gibt verschiedene Methoden, um ototoxische Wirkstoffe in die Cochleae von Tiermodellen einzuführen. Vorgestellt wird ein chirurgisches Protokoll zur Verabreichung von ototoxischen Wirkstoffen an die runde Fensternische. Das Verfahren ist zuverlässig, erzeugt gezielte intracochleäre Läsionen und vermeidet mechanische Schäden an der Mikroarchitektur. Eine Untersuchung der Selbstreparatur/Regeneration der Cochlea ist möglich.

Die Maus Round-Fenster-Ansatz für Ototoxische Agent-Lieferung: eine schnelle und zuverlässige Technik zur Induktion Cochlear Zelldegeneration

Die aktuellen Protokolle zur Erhaltung immortalisierter multipotenter otischer Vorläuferzellen (iMOP) und der otischen Differenzierung werden beschrieben.  Kulturbedingungen und molekulare Marker, die auf eine Differenzierung in sensorische Epithelien und Spiralganglienneuronen (SGN) hinweisen, werden hervorgehoben.

Initiieren Differenzierung in Immortalisierte multipotenten Vorläuferzellen Otic

Dieses Protokoll beschreibt Methoden, um die auditory Brainstem Antwort vom postnatalen Ratte Welpen aufnehmen. Um die funktionelle Entwicklung des äußeren Haarzellen zu untersuchen, ist das experimentelle Verfahren der gesamten Zelle Patch Clamp Aufnahme in isolierten äußeren Haarzellen Schritt für Schritt beschrieben.

Auditory Brainstem Response und äußeren Haarzellen Whole-Cell Patch Clamp Aufnahme bei postnatalen Ratten

Tiermodelle der Cochlea-Implantate können Kenntnisse über die technologischen Grundlagen für die Behandlung von permanenten Schallempfindungs-Schwerhörigkeit mit elektrischer Stimulation voraus. Diese Studie bietet eine chirurgische Protokoll für akute ohrenbetäubend und Cochlea-Implantation von Elektroden-Array in Mäusen als auch die funktionale Bewertung mit auditory Brainstem Response.

Cochlea-Implantat-Chirurgie und elektrisch evozierten Auditory Brainstem Response Aufnahmen bei C57BL/6 Mäusen

Dieser Artikel stellt eine modifizierte Cochlea-Oberflächenvorbereitungsmethode vor, die eine Entkalkung und Verwendung eines Zell- und Gewebeklebers erfordert, um die Stücke der Cochlea-Epithel an 10 mm runden Abdeckungsscheinen für die Immunhistochemie bei erwachsenen Mauscochleae zu haften.

Cochlea-Oberflächenvorbereitung in der Erwachsenenmaus

Hier stellen wir ein Protokoll für die Hopping Probe Ion Conductance Microscopy (HPICM) vor, eine berührungslose Scanning-Sondentechnik, die die nanoskalige Abbildung von Stereozilienbündeln in lebenden auditiven Haarzellen ermöglicht.

Stereozilien-Bündelbildgebung mit nanoskaliger Auflösung in lebenden Säugetier-Hörhaarzellen

Miniaturschweine (Minischweine) sind ein ideales Großtiermodell für die Erforschung von Cochlea-Implantaten. Die Cochlea-Implantationschirurgie bei Minischweinen kann verwendet werden, um erste Beweise für die Sicherheit und potenzielle Leistungsfähigkeit neuartiger Elektrodenarrays und chirurgischer Ansätze in einem lebenden System ähnlich dem Menschen zu liefern.

Das Miniaturschwein: Ein Großtiermodell für die Cochlea-Implantat-Forschung

In diesem Artikel stellen wir ein detailliertes Protokoll zur Isolierung und Kultivierung von primären Cochlea-Haarzellen von Mäusen vor. Zunächst wurde das Corti-Organ aus neonatalen (3-5 Tage alten) murinen Cochleae unter dem Mikroskop präpariert. Anschließend wurden die Zellen enzymatisch zu einer Einzelzellsuspension verdaut und nach mehreren Tagen in Kultur mittels Immunfluoreszenz identifiziert.

Isolierung und Kultivierung von primären Cochlea-Haarzellen aus neugeborenen Mäusen

Lernen Sie die Handhabung von HEI-OC1-Zellen zur Untersuchung pharmakologischer Wirkungen auf auditorische Zellen und zur Charakterisierung des Motorproteins Prestin. Diese standardisierte Methode ermöglicht vergleichbare Studien.

Arbeiten mit Auditory HEI-OC1-Zellen

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