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DOI: 10.3791/54849-v
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Hier haben wir eine neu entwickelte Hepatitis B-Virus (HBV) Reportersystem beschreiben, die frühen Stadien des HBV-Lebenszyklus zu überwachen. Dieses in vitro System vereinfacht wird in das Screening von anti-HBV - Agenten unterstützen , eine Hochdurchsatz - Strategie.
Das übergeordnete Ziel dieses rekombinanten HBV-Reportersystems ist es, die Durchführung von Massenscreenings auf Anti-Hepatitis-B-Viren oder HBV-Wirkstoffe zu vereinfachen. Diese Methode kann helfen, wichtige Fragen im HBV-Bereich zu beantworten, wie z. B. das Screening auf Anti-HBV-Wirkstoffe und die Identifizierung von HBV-Faktoren. Der Hauptvorteil dieser Technik besteht darin, dass das HBV-Reportersystem die früheren Stadien des HBV-Replikationszyklus überwachen kann.
Nach der Vorbereitung des Zellkulturmediums am Tag vor der Transvektion viermal 10 bis sechs HepG2-Zellen in Medium auf eine 10 cm große, mit Kollagen beschichtete Schale legen. Inkubieren Sie die Zellen bei 37 Grad Celsius in einem befeuchteten 5%CO2-Inkubator. Transvektieren Sie die Zellen unter Verwendung eines Transvektionsmittels gemäß den Anweisungen des Herstellers mit 5 μg pUC1 2HBV delta epsilon und 5 μg pUC1 2HBV/NL.
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