Genomweite Analyse von HDAC-Inhibitor-vermittelten Modulation der Micro-RNAs und mRNAs in B Zellen induziert unterziehen Class-Schalter DNA-Rekombination und Plasma-Zell-Differenzierung

Das übergeordnete Ziel dieses Experiments ist es, B-Lymphozyten zu einem Antikörperklassenwechsel und einer Plasmazelldifferenzierung zu induzieren und die Modulation sowie epigenetische Regulation durch die Expression von HDAC-Inhibitoren mRNA und microRNA in B-Zellen zu analysieren. Diese Methode kann dazu beitragen, Schlüsselfragen im Bereich der B-Zell-Antikörperantwort zu beantworten, wie z. B. die epigenetische Modulation des Immunglobulinklassenwechsels und die Differenzierung von Plasmazellen. Der Hauptvorteil dieser Technik besteht darin, dass sie eine einfache Methode zur Modulation der B-Zell-Funktionen und zur Definition der Veränderung von microRNAs und mRNAs durch epigenetische Regulatoren bietet.

Nach der Euthanasation einer bestimmten erregerfreien C57BL6J Maus und der Sterilisation der Haut gemäß dem Textprotokoll wird die Haut mit einer autoklavierten Pinzette und einer Präparierschere direkt unterhalb des Brustkorbs durchtrennt, um die Milz auf der linken Seite des Bauches, direkt unter der Leber, sichtbar zu machen. Klemmen Sie die Milz vorsichtig ein und schneiden Sie das gesamte Bindegewebe ab, bevor Sie das Organ entnehmen. Legen Sie dann die Milz in ein 1,5-Milliliter-Mikrozentrifugenröhrchen mit 1.000 Mikrolitern des vollständigen RPMI 1640-Mediums.