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DOI: 10.3791/55234-v
Gurpreet Kaur1,2, Jaimo Ahn1, Kurt D. Hankenson1,3, Jason W. Ashley1,4
1Department of Orthopaedic Surgery,Perelman School of Medicine, University of Pennsylvania, 2Department of Biological Sciences,University of the Sciences, 3The Department of Small Animal Clinical Sciences,College of Veterinary Medicine, Michigan State University, 4Department of Biology,College of Science, Technology, Engineering, & Mathematics, Eastern Washington University
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Notch-Signalisierung ist eine Form der zellulären Kommunikation, die auf direktem Kontakt zwischen Zellen beruht. Um den Notch-Signalweg in vitro korrekt zu induzieren, müssen Notch-Liganden den Zellen in einem immobilisierten Zustand präsentiert werden. Dieses Protokoll beschreibt Methoden zur in vitro Stimulation des Notch-Signalwegs in Maus-Osteoklasten-Vorläufern.
Das übergeordnete Ziel dieses Verfahrens ist es, die Auswirkungen der Stimulation des Kerbsignals an verschiedenen Stellen während des Osteoklastendifferenzierungsprozesses zu beobachten. Diese Methode kann helfen, Schlüsselfragen im Bereich der Zellbiologie zu beantworten, wie z.B.: Wie verändert sich die Rolle der Kerbsignalgebung während eines zellulären Prozesses? Der Hauptvorteil dieser Technik ist ihre Marginalität, die es ermöglicht, sie an andere Zellen oder Kerbliganden anzupassen.
Während diese Methode Einblicke in die Osteoklastendifferenzierung geben kann, kann sie auch auf andere Prozesse wie das Zellüberleben, die Proliferation oder die Differenzierung anderer Zelltypen angewendet werden. Beginnen Sie den Eingriff, indem Sie eine Maus in Rückenlage fixieren und die Haut mit 70 Prozent Ethanol desinfizieren. Machen Sie als Nächstes einen Schnitt entlang der vorderen Oberfläche einer hinteren Extremität, um die Tibia und den Femur freizulegen.
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