Name: Messung und Modellierung Kontraktile Trocknung im Bereich Human Stratum corneum (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2017-03-01T10:30:00.000+00:00
Duration: 8 min
Description: Erfahren Sie die Messung dynamischer mechanischer Steifigkeit und Trocknungsspannungen in ex vivo humanem Stratum corneum. Diese Methode ermöglicht die schnelle Bewertung von Hauteigenschaften nach chemischen Behandlungen mit weniger Gewebe.

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Die Autoren haben keine Danksagungen.

Eine befreit Zulassung (3002-13) Proben Forschung mit de-identifizierte Gewebe an das Department of Health gemäß durchführen und Human Services Vorschriften, 45 CFR 46,101 (b) (4) gewährt wurde. Volle Dicke Haut ist von einer geplanten Operation erhalten. In diesem Artikel ist die Gewebequelle 66-jährigen kaukasischen weiblichen Brust. 1. Herstellung von Elastomer beschichtete Deckgläser <ol><li> 0,107 g Sylgard 184 Härter mit 5,893 g Base in einem 20 Glasfläschchen ml, mischen. Die Gesamtmischung Masse beträgt 6 g mit einem Basismittel-Verhältnis von 55 bis Härtung: 1. </li><li> Nach dem Mischen mit einem Glasstab um Homogenität zu gewährleisten, legen Sie das Glasfläschchen in einer Vakuumkammer und Entgasen alle Luftblasen zu entfernen. </li><li> Ein Glasdeckglas (55 mm x 25 mm) in der Mitte eines Spin-Coater. In ~ 1 ml der Mischung auf die Mitte des Deckglas. Verwenden Sie eine 5000 ul Pipette mit dem Ende mit einer Schere abgeschnitten. Schleuderbeschichtung der Deckglas bei 2000 Umdrehungen pro Minute für 60 s. <ol><li> Wiederholen Sie diesen process 5-6 Substrate zu schaffen. </li></ol></li><li> Härten die Deckgläschen in einem Ofen 12 Stunden lang bei 60 ° C. </li><li> Verwenden Sie eine Rasierklinge, um teilweise die Elastomerfolie aus einem Opfersubstrat zu entfernen. Verwenden Sie einen unauslöschlichen Markierung, um die Oberseite des Elastomerfilms und der exponierten Glas zu markieren. </li><li> Montieren Sie die Probe auf einem inversen Mikroskop und mit einem Fernfokus als Zubehör den Unterschied in der z-Höhe zwischen den Brennebenen der beiden Marken zu erfassen. Dies entspricht dem Elastomersubstratdicke, h. </li></ol> 2. Herstellung des Stratum Corneum <ol><li> Verwenden Sie ein Wasserbad oder beheizte Rührplatte ein halbes Glas Becher mit VE-Wasser (DW) bis 60 ° C gefüllt zu erhitzen. In einem biologischen Sicherheitsschrank, tauchen die volle Dicke der menschlichen Haut im Wasser für 4 min. </li><li> Unmittelbar übertragen die Hautprobe in ein Becherglas mit DW gekühlt auf &lt;10 ° C für 4 min. Die Hälfte der Becher Füllung minimiert Verspritzen von infektiöses Material. </li><li> Entfernen Sie die Haut aus dem Becher, in einer Petrischale, und zu isolieren, sanft in die Epidermis ein Paar gebogene Nase Gewebe mit einer Pinzette. </li><li> Legen Sie die isolierten Epidermis basale Seite nach unten in einer Petrischale mit Gaze ausgekleidet. Sicherstellen, dass die basalen Schicht vollständig in Kontakt mit der Gaze ist. <ol><li> Genießen Sie die Gaze in einer 0,25% (wt / vol) Typ IX-S Schweinepankreas gelöst Trypsinlösung in 0,1 M phosphatgepufferter Kochsalzlösung für 6-8 h bei Raumtemperatur. Fügen Sie nur genug Trypsin in dem Behälter die Gaze zu benetzen. </li></ol></li><li> Heben Sie die Gaze mit Gewebe Pinzette und schweben sie teilweise in einem Behälter mit DW gefüllt. Ziehen Sie das SC sie von der Gaze zu trennen. </li><li> Waschen Sie das Stratum corneum 3-4 mal in DW Rest epidermale Gewebe zu entfernen, die an den SC gebunden bleibt. </li><li> Schwimmer, die isoliert SC in einer Lösung von 0,4% Glycin max (Soja) Trypsin-Inhibitor in DW. Verwenden Schüttler eine Platte in das Gewebe für 10 Minuten zu rühren. </li><li> Float SC in einer Petrischale teilweisemit DW gefüllt. Verwenden Schüttler eine Platte in das Gewebe für 10 Minuten zu rühren. </li><li> Trocknen Sie die isolierte SC Blatt auf einer ultrafeinen Kunststoffnetz für 48 Stunden bei Raumtemperatur (25 ° C, 40% relative Luftfeuchtigkeit (RH)). </li><li> Trennen Sie die SC aus dem Netz und ausgeschnitten Proben einzelnen Kreis R = 3 mm Radius eine kreisförmige Lochung mit. Markieren Sie die Mitte der äußersten Fläche mit einer kleinen Spirale Marke einen unauslöschlichen Marker. Dies liefert einen visuellen Hinweis der Oberseite der SC für die Erkennung. HINWEIS: Die unauslöschliche Spuren sollte in der Mitte der Probe aufgebracht werden, wobei die Trocknungs Verformungen kleinste sein. Dadurch wird die Wirkung der Markierung auf aufgezeichnet Trocknungsverschiebungsprofile minimieren. </li></ol> 3. Proben Behandlung und Ablagerung <ol><li> Agitieren SC Proben für 30 min in 15 ml DW, enthaltend 90 &amp; mgr; l Fluoreszenzmarker Wülste (505/515 nm, 1 &amp; mgr; m Durchmesser, Carboxylat-modifiziert). Diese Ablagerungen Perlen auf die SC Oberfläche HINWEIS: Während der Abscheidung von large Zahlen von Perlen auf dem SC vorhanden 12 geringfügig relativ langsames Trocknen an Proben ohne Perlen, wird die räumliche Auflösung der in der gleichen Ebene Deformationsfelder zu maximieren , die anschließend erhalten werden können. Die Wahl des Bead - Volumens zugegeben wird, sollte daher ad hoc erfolgen. </li><li> Entfernen SC Proben und legen Sie sie in einer Petrischale teilweise mit DW gefüllt. </li><li> Teilweise eintauchen in einem flachen Winkel von 15-30 ° ein Substrat in der DW. </li><li> Pin eine Kante des schwebenden SC Probe an der Kontaktlinie zwischen dem Substrat und Wasser-Grenzfläche. Vertikal Herausziehen des Substrats aus dem Wasser gleichmäßig laminieren die SC Probe an das Substrat, ohne Falten oder eingeschlossenen Luftblasen. </li><li> Wiederholen Sie Schritt 3.4 zu platzieren bis zu 6 SC Proben auf jedem Substrat. Lassen Sie mindestens eine 2-3 mm Abstand zwischen den Proben und vermeiden Probe Laminierung nahe an der Substratkante. Dies verhindert Trocknen einer Probe beeinflussen Trocknungs Verschiebungen in einem anderen. </li&gt; <li> Trocknen Sie die montierten SC Proben unter Laborbedingungen für 60 min. Auf diese Weise können Restwasser zwischen dem SC und dem Substrat zu verdampfen und sorgt für eine vollständige Gewebehaftung. HINWEIS: An dieser Stelle SC Proben können mit einem chemischen oder kosmetischen Formulierungen 7, 8 , indem die Substrate den Kopf in einer gewünschten Lösung für eine erforderliche Zeitdauer behandelt werden. Wiederholen Sie Schritt 3.6, sobald die Behandlungsschritt durchgeführt wird. Nach dem Trocknen kann unvollständige Adhäsion von SC-Proben auf das Substrat überprüft unter Verwendung von Durchlichtmikroskopie werden. Gefangen Blasen unter dem SC Probe oder abgelöste Kanten wird in der Probe mit gut definierten Kanten klare Kontrastvariationen bilden. </li><li> Erstellen Sie eine Feuchtigkeitskammer durch eine Petrischale platzieren teilweise mit Wasser in einem hermetisch verschlossenen Behälter gefüllt. </li><li> Ort Substrate in die Kammer für 24 h einer relativen Feuchtigkeit von 99% äquilibrieren. Legen Sie nicht die Substrate in die Petri Gericht. </li></ol> 4. Mikroskop Umweltkontrolle <ol><li> Erreichen Kontrolle der Umweltbedingungen durch ein Feuchtigkeitsregelungssystem an ein Mikroskop montierbar Perfusionskammer verbunden. Einzelheiten des Feuchtigkeitskontrollsystem sind in der deutschen et al. (2013) 7 und Liu und Deutsch (2015) 8. </li><li> Montieren Sie das Substrat, auf dem Mikroskop, legen Sie die Perfusionskammer über das Substrat und dichten Kanten der Perfusionskammer mit dem Elastomer mit Vakuumfett. </li><li> Einmal montiert, ins Gleichgewicht Innenluft auf 99% RH vor dem Experiment. Dies verhindert, dass das Verdampfen von Wasser vor dem Experiment. Sobald Bildgebung in den Abschnitten 5 oder 7 begonnen hat, reduzieren interne Luftfeuchte auf den gewünschten Wert. HINWEIS: In diesem Artikel werden SC-Proben auf 25% RH getrocknet </li></ol> 5. Imaging in Flugzeug Trocknung Verlagerungen <ol><li> Erwerben Sie Bilder von SC-Proben eines invertierten microsco mitpe mit 1X Objektivlinse. Excite fluoreszierende Kügelchen eine Lichtmaschine mit FITC-Filter (503-530 nm Emissionsbandpass). Mehrere Proben können nacheinander im gesamten Trocknungs abzubildenden eine automatisierte xy-Ebene verwendet wird. </li><li> Nehmen Sie Leuchtstoff- und Durchlichtbilder einer digitalen CCD-Kamera mit einer Auflösung von 1.392 x 1.040 Pixeln. Das Sichtfeld jedes Bildes ist 8,98 x 6,71 mm, um ein einzelnes Bild ermöglicht eine vollständige SC Probe zu erfassen. Nehmen Bilder mit einer Frequenz von 10 min für 16 Stunden. </li></ol> 6. Untergrundvorbereitung für Dickenmessung <ol><li> In einem Laborabzug platzieren 1 ml Silan (3-Aminopropyltriethoxysilan; ≥98%) in einigen kleinen Plastikkappe. Platzieren Elastomersubstrate aus dem Abschnitt 1 und der Kappe in einem verschlossenen Behälter für 5 h. Substrate dürfen nicht direkt in Kontakt mit dem Silan zu kommen. </li><li> Zugabe von 5 mg EDC (N - (3-Dimethylaminopropyl) - N -ethylcarbodiimide Hydrochlorid; ≥99%) in einem 1,5 ml - Röhrchen. In 500 &amp; mgr; l von DW an die EDC. Rühre die Lösung für 10 s mit einem Wirbelmischer. </li><li> Hinzufügen, 0,076 g Natriumtetraborat und 0,1 g Borsäure zu 20 ml DW. Mischen mit einem Magnetrührer bei 70 ° C (1 h). In Borsäure, bis der pH-Wert 7,4 ist. </li><li> 20 ml Boratpuffer in ein 50 ml Zentrifugenröhrchen. Werden 60 &amp; mgr; l von 1 &amp; mgr; m-Kügelchen (535/575 nm Carboxylat-modifizierter) mit dem Boratpuffer. Schließlich fügen 200 ul EDC-Lösung in die Flasche. Das Röhrchen Wulst Lösung zu mischen und gießen Sie dann in einen 10 cm Durchmesser Petrischale. </li><li> Entfernen Sie die silanisierte Substrate aus dem Behälter und legen Sie sie filmseitige Elastomer nach unten in die Beadlösung. Tun Sie dies langsam Blasen von Einklemmen zu verhindern. Zwei Substrate werden in jeder Petrischale passen. </li><li> Lassen Substrate für 45 Minuten in der Beadlösung zu schweben. </li><li> Verwenden einer Pinzette, die Substrate von der Perle Lösung zu entfernen, spülen Sie dann in DW ungebundenen Perlen zu entfernen. </li><li> Luft trocknen die Substrate. Einblasen von Druckluft überdie Elastomerfolienoberfläche vermindert die Bildung von Wasserflecken. </li><li> Verschließen Sie die Substrate in einer undurchsichtigen Box zu verhindern Photobleichens der Kügelchen bis SC Probenablage. </li></ol> 7. Imaging Dicke von SC <ol><li> Kaution SC Proben auf einen Substratabschnitt unter Verwendung 3. Allerdings führen Sie Schritt 3.1, ohne auf die DW fluoreszierende Kügelchen hinzugefügt wird. Zusätzlich wenden eine 5 &amp; mgr; l Tropfen unverdünntes Fluoreszenzmarker bead-Lösung (505/515 nm, 0,1 um Durchmesser) auf der Oberfläche jeder abgelagerten SC Probe mit einer Pipette vor dem Schritt 3.6 abgeschlossen. </li><li> Stellen Messungen von SC Dicke das Mikroskop mit 40-facher Objektivlinse verwendet wird. Messen der Dicke von SC-Proben über die Zeit eine Fernfokus Zubehör unter Verwendung der Differenz in z-Höhe zwischen den beiden Perlenschicht Brennebenen auf der SC-Substrat-Grenzfläche und der Oberseite des SC angeordnet aufzuzeichnen. </li><li> Messen Sie die Dicke von 3 Regionen jeder SC Probe über einen 3 h Trocknungszeit. Die Dickevon SC - Proben erreicht innerhalb dieses Zeitrahmens 8 einen stationären Wert. </li></ol> 8. Quantifizierung und Modellierung Gewebe Deformation <ol><li> Verwenden Sie Particle Image Velocimetry 13 zu erhalten , räumlich aufgelöste in der Ebene liegende Trocknungs Verschiebungen von den fluoreszierenden Bildern bei jedem aufgezeichneten Zeitschritt. </li><li> Verwenden MATLAB azimutal gemittelte radiale und azimutale Verschiebungsprofile aus dem Verschiebungsfeld jedes radial symmetrischen SC Probe zu erhalten. Hinweis: Ein Beispiel-Datensatz (mit dem Titel &#39;d.mat&#39;) und MATLAB-Code (mit dem Titel &quot;PIV-processing.m &#39;), die 8.3 sowohl diesen Schritt und Schritt durchführt wurde, in dem ergänzende Informationen zur Verfügung gestellt. </li><li> Fit radialen Verschiebung Profile auf ein Modell 7, 8, 14, 15, 16 beschreibt Trocknen SC als schrumpf linearen elastischen circular Platte zeitveränderliche Dicke h SC, Radius, R, und der Elastizitätsmodul, SC E, geklebt auf ein verformbares elastisches Substrat mit einem Elastizitätsmodul, E. SC Angenommen hat eine gut definierte und konstante Poissonzahl, ν SC = 0,4 7 8. Erhalten Sie am besten passt ein Minimum der kleinsten Quadrate-Ansatz. HINWEIS: Das Modell für den Einbau verwendet wird, beschreibt radiale Verschiebungen in Bezug auf die modifizierte Bessel-Funktionen sind: <img alt="Gleichung" src="/files/ftp_upload/55336/55336eq2.jpg" /> (1) mit <img alt="Gleichung" src="/files/ftp_upload/55336/55336eq3.jpg" /> . <img alt="Gleichung" src="/files/ftp_upload/55336/55336eq4.jpg" /> und <img alt="Gleichung" src="/files/ftp_upload/55336/55336eq13.jpg" /> Der Begriff <img alt="Gleichung" src="/files/ftp_upload/55336/55336eq6.jpg" /> entspricht einer Eindringtiefe gegeben durch <img alt= &quot;Gleichung&quot; src = &quot;/ files / ftp_upload / 55336 / 55336eq7.jpg&quot; /&gt;. <img alt="Gleichung" src="/files/ftp_upload/55336/55336eq8.jpg" /> bezeichnet ein Substrat Steifigkeit Parameter; gilt, wenn die Probengrößen viel größer sind als die Substratdicke. Hierbei sind die Parameter, <img alt="Gleichung" src="/files/ftp_upload/55336/55336eq9.jpg" /> und <img alt="Gleichung" src="/files/ftp_upload/55336/55336eq10.jpg" /> Das Poisson-Verhältnis bezeichnen jeweils die Substratdicke. Das Poisson-Verhältnis des Siliconelastomer - Substrat 17 ist ν = 0,5 auf . </li><li> Erhalten Modellparameter a und β in jedem Zeitschritt der kleinsten Quadrate der Gleichung (1) zu der radialen Verschiebungsprofil. <ol><li> Setzen Sie dafür die Anpassungsparameter β zu SC Elastizitätsmodul, E SC zu erhalten, unter Verwendung des Ausdrucks, <img alt="Gleichung" src="/files/ftp_upload/55336/55336eq11.jpg" /></li><li> Verwenden Sie Anpassungsparameter α die Zeit zu erhalten unterschiedlichen Kontraktions Trocknen stress, PSC, unter Verwendung des Ausdrucks, <img alt="Gleichung" src="/files/ftp_upload/55336/55336eq12.jpg" /></li></ol></li></ol>

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</ol>

Die Autoren haben nichts offenzulegen.

In diesem Artikel beschreiben wir eine Technik, die verwendet werden können, die dynamische Trocknungsverhalten und die mechanischen Eigenschaften des menschlichen SC zu messen. Frühere Studien haben gezeigt , dass diese Technik verwendet werden kann , um die Auswirkungen von Umgebungsbedingungen und chemischen Produkten üblicherweise in kosmetischen Reinigungsmittel und Feuchthaltemittel auf der dynamischen Trocknungsverhalten von SC 7, 8 verwendet , zu quantif...

Die äußere Schicht der Epidermis oder Stratum corneum (SC) aus bindigen Korneozyt von einer Lipid - reichen Matrix umgeben Zellen 1, 2. Die Zusammensetzung und die strukturelle Integrität des SC ist von wesentlicher Bedeutung für die korrekte Barriere Funktionalität beibehalten 3, die Invasion von Mikroorganismen verhindert und widersteht sowohl mechanische Kräfte und übermäßigen Wasserverlust 4. Die Kapazität von Körperpflegeprodukten zu erhalten oder Hautbarrierefunktion verschlechtern ist von großem Interesse für die Haut im Gesundheitswesen und der Kosmetikindustrie 5. Die tägliche Anwendung von Körperpflegeprodukten ist bekannt , die mechanischen Eigenschaften des SC 6, 7, 8 zu verändern. Beispielsweise Tenside in kosmetischen Reinigungsmitteln enthalten sind, können deutliche Steigerungen der Elastizitätsmodul verursachen und einen Aufbau vonTrocknungsspannungen in SC, das Gewebe des Neigung zu erhöhen 7 zu knacken, 9. Glycerin in fast allen kosmetischen Moisturizer enthalten ist, kann SC erweichen und verringern die Bildung von Trocknungsspannungen 8, 10, 11, um die Wahrscheinlichkeit von Gewebebruch zu reduzieren. Das Verfahren in diesem Artikel beschrieben ist in der Lage , die dynamischen Trocknungsverhalten und mechanische Eigenschaften von SC Trocknung in kontrollierten Umgebungen 7, 8 zu quantifizieren. Bisher hat diese Technik wurde der Erläuterung der Auswirkung verschiedener kosmetischer Produkte auf Veränderungen in der dynamischen Trocknungsverhalten und mechanische Eigenschaften von SC Gewebe fähig zu sein demonstriert. Dies wird durch Quantifizieren Trocknungsinduzierte Schrumpfung von menschlichen SC Gewebe zu einem weichen Elastomersubstrat geklebt erreicht, passend Trocknungs Verschiebungen mit einer einfachenKontraktilität des Modells und anschließend den Elastizitätsmodul zu extrahieren und von der angepassten Profil Stress zu trocknen. Beim Testen mehrerer Proben SC erforderlich ist, bietet dieses Verfahren eine schnellere Alternative zu uniaxial tensometry nutzt deutlich weniger Gewebe und bietet mehrere physiologisch relevant Trocknung durch Verdampfung von der Probenunterseite verhindert wird.

<table><tbody><tr><td>Silikonelastomer-Basis</td><td>Dow-Corning</td><td>1064291</td><td></td></tr><tr><td>Silikonelastomer Härter</td><td>Dow-Corning</td><td>1015311</td><td></td></tr><tr><td>FluoSpheres Carboxylat 0.1 &micro; m gelb grün fluoreszierend 505/515&nbsp;</td><td>Thermo Fisher</td><td>F8803</td><td></td></tr><tr><td>FluoSpheres Carboxylat 1 & Mikro; m gelb grün fluoreszierend 505/515&nbsp;</td><td>Thermo Fisher</td><td>F8823</td><td></td></tr><tr><td>FluoSpheres Carboxylat 1 & Mikro; m nilrot fluoreszierend 535/575&nbsp;</td><td>Thermo Fisher</td><td>F8819</td><td></td></tr><tr><td>Trypsin aus der Bauchspeicheldrüse des Schweins</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>T6567</td><td></td></tr><tr><td>Trypsin-Inhibitor Typ II-s</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>T9128</td><td></td></tr><tr><td>(3-aminopropyl)triethoxysilan</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>440140</td><td></td></tr><tr><td>Natriumtetraborat</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>221732</td><td></td></tr><tr><td>Borsäure</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>B0294</td><td></td></tr><tr><td>Phosphatgepufferte Kochsalzlösung</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>P7059</td><td></td></tr><tr><td>N-(3-Dimethylaminopropyl)-N-ethylcarbodiimidhydrochlorid</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>E7750</td><td></td></tr><tr><td>Vortexermischer</td><td>VWR</td><td>58816-123</td><td></td></tr><tr><td>Locher mit 6 mm Durchmesser</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>Z708860</td><td></td></tr><tr><td>SOLA 6-LCR-SB&nbsp;</td><td>Lummencor Leichtmotor</td><td>Nr.3526</td><td></td></tr><tr><td>Cfi Plan Achro Uw 1X Objektiv</td><td>Nikon Plan UW</td><td>MRL00012</td><td></td></tr><tr><td>CFI Plan Fluor 40X Öl Objektiv 1.3 na - 0.20&nbsp; mm wd</td><td>Nikon Plan Fluor</td><td>MRH01401</td><td></td></tr><tr><td>Nikon Eclipse Ti-U inverses Mikroskop&nbsp;</td><td>Nikon</td><td>MEA53200</td><td></td></tr><tr><td>Clara-E Kamera</td><td>Andor</td><td>DR-328G-C02-SIL</td><td></td></tr><tr><td>Fernfokus Vorsatz E-RFA Ergo Design</td><td>Nikon</td><td>99888</td><td></td></tr><tr><td>Ti-S-E Motorisierter Tisch</td><td>Nikon</td><td>MEC56110</td><td></td></tr></tbody></table>

messung und modellierung kontraktile trocknung im bereich human stratum corneum

Measuring and Modeling Contractile Drying in Human Stratum Corneum

Stratum corneum (SC) ist die oberflächliche Hautschicht. Dessen Kontakt mit der äußeren Umgebung bedeutet, daß diese Gewebeschicht auf beide Reinigungsmittel und täglichen Schwankungen in der Umgebungsfeuchtigkeit ausgesetzt wird; beide können den Wassergehalt des Gewebes zu verändern. Kürzungen in Wassergehalt von schweren Barrierestörung oder niedriger Luftfeuchtigkeit Umgebungen kann SC Steifigkeit verändern und einen Aufbau von Trocknungsspannungen verursachen. Unter extremen Bedingungen können diese Faktoren mechanischen Bruch des Gewebes verursachen. Wir haben eine hohe Durchsatzverfahren zur Quantifizierung von dynamischen Veränderungen in den mechanischen Eigenschaften von SC nach dem Trocknen hergestellt. Diese Technik kann verwendet werden, um Änderungen in der Trocknungsverhalten und mechanische Eigenschaften von SC mit kosmetischen Reinigungsmittel und Feuchthaltemittel-Behandlungen zu quantifizieren. Dies wird durch Messen dynamischen Variationen in ortsaufgelöste in-plane Trocknungs Verschiebungen von kreisförmigen Gewebeproben geklebt auf ein Elastomersubstrat erreicht. In-plane radiale Verschiebungen acquired während der Trocknung azimutal gemittelt und mit einem Profil versehen basierend auf einem linearen elastischen Kontraktionsmodell. Dynamische Änderungen in Trockenstress und SC Elastizitätsmodul kann dann aus den angepassten Modells Profilen entnommen werden.

1 (a) zeigt eine repräsentative Fluoreszenzbild eines SC - Probe beschichtet mit fluoreszierenden Kügelchen (Abschnitt 3). Die entsprechende Durchlichtbild der Probe in 1 gezeigt ist (b) mit einem Köcher Grundstück von räumlich aufgelösten Trocknungs Verschiebungen überlagert , dass aufgrund der Kreissymmetrie der Proben bei 25% relativer Luftfeuchtigkeit nach 16 h Trocknen bilden, können diese Verschiebungen sein azimutal gemittelt. <st...

in der Ebene räumlich aufgelösten Trocknungs Verschiebungen von kreisförmigen Gewebeproben geklebt auf ein Elastomersubstrat Dieser Artikel beschreibt ein Verfahren zur dynamischen Trocknungsverhalten und die mechanischen Eigenschaften des Stratum corneum Quantifizierung durch Messung. Diese Technik kann verwendet werden, um zu messen, wie verschiedene chemische Behandlungen Trocknen und Gewebe mechanischen Eigenschaften verändern.

Messung und Modellierung Kontraktile Trocknung im Bereich Human Stratum corneum

Stratum corneum (SC) is the most superficial skin layer. Its contact with the external environment means that this tissue layer is subjected to both ...

Das übergeordnete Ziel dieser Methode besteht darin, die dynamische mechanische Steifigkeit und den Aufbau von Trocknungsspannungen in ex vivo-Proben des menschlichen Stratum corneum nach unterschiedlichen chemischen Behandlungen zu quantifizieren. Diese Methode kann helfen, zentrale Fragen auf den Gebieten der Biomechanik und der Kosmetikwissenschaft zu beantworten, beispielsweise wie die Zusammensetzung des Stratum corneum oder die Behandlung des Hautgewebes mit Körperpflegeprodukten dessen mechanische Eigenschaften und dynamisches Trocknungsverhalten beeinflussen können. Der Hauptvorteil dieser Technik liegt darin, dass sie eine schnellere Alternative zu anderen mechanischen Bewertungsmethoden darstellt, deutlich weniger Hautgewebe benötigt und eine physiologisch relevantere Trocknung ermöglicht, indem sie die Verdunstung von der Unterseite der Probe verhindert.Um elastomerbeschichtete Deckgläser herzustellen, stellen Sie zunächst Sylgard 184 her, indem Sie den Härter mit den Basiskomponenten im Verhältnis von 55 Teilen Basis zu einem Teil Härter mischen, bis eine homogene Mischung entsteht. Insgesamt werden sechs Gramm benötigt. Danach entgasen Sie die Lösung.Verwenden Sie dann

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Dieses Video beschreibt das detaillierte Protokoll zur Erstellung von in vitro 3D-Organotyp-Hautrekonstruktionen zur Untersuchung des Melanomverlaufs. Dieses Hautmodell ahmt sowohl die Architektur als auch die multizelluläre Komplexität von Organen in vivo nach.

Generierung organotypischer Vollhautrekonstruktionen: Ein Verfahren zur Erstellung eines 3D-Hautmodells anhand menschlicher Hautproben

Das Ziel dieses Protokolls ist es, ein dreidimensionales Hautäquivalent in voller Dicke aufzubauen, das der natürlichen Haut ähnelt. Mit einer eigens konstruierten automatisierten Aufwickelvorrichtung können präzise und reproduzierbare Wunden unter Beibehaltung der Sterilität erzeugt werden.

Erzeugung eines dreidimensionalen Vollhaut Equivalent und automatisierte Verwundung

Wir stellen eine Protokoll-Zellen abgeleiteten Matrices reich an extrazellulären Matrixproteinen zu erhalten, unter Verwendung von hochmolekularen Crowders (MMC). Darüber hinaus präsentieren wir ein Protokoll, das MMC in 3D organotypischen Haut Co-Kultur-Generation enthält, die Kulturzeit reduziert, während Laufzeit von Konstrukt beibehalten wird.

Die Verbesserung der 2D- und 3D-Haut<em&gt; In Vitro</em&gt; Modellen mithilfe von Macromolecular Crowding

Ein Verfahren zur Trocknung induzierte Selbst Integration von megamolecular Biopolymeren auf der Luft-Flüssigkeit-kristalline Grenzfläche ist vorgesehen. Diese Methodik wird nützlich sein, nicht nur für das Verständnis der makroskopischen Potentiale von Biopolymeren, sondern auch als ein Bewertungsverfahren für weiche Materialien in der biomedizinischen und Umwelt.

Methoden zur Selbst Integration von Megamolecular Biopolymere auf der Trocknungsluft-LC-Schnittstelle

Hier stellen wir ein Protokoll zur Sammlung konfokaler Raman-Spektren von menschlichen Probanden in klinischen Studien in Kombination mit chemometrischen Ansätzen zur Spektralausreißerentfernung und der anschließenden Extraktion von Schlüsselmerkmalen vor.

Auflösen von Wasser, Proteinen und Lipiden aus In Vivo konfokale Raman Spectra von Stratum Corneum durch einen chemometrischen Ansatz

Ziel dieses Protokolls ist es zu bewerten, ob verschiedene künstliche Tränenformulierungen menschliche Hornhautepithelzellen mit einem In-vitro-Modell vor der Austrocknung schützen können. Nach der Exposition gegenüber künstlichen Tränenformulierungen und Dericcation werden menschliche Hornhautepithelzellen auf metabolische Aktivität untersucht.

Wirkung künstlicher Tränenformulierungen auf die Metabolische Aktivität menschlicher Hornhautepithelzellen nach Exposition gegenüber Dericcation

Dieses Protokoll beschreibt eine einfache Methode, um dreidimensionale rekonstituierte menschliche Epidermis reproduzierbar und robust zu kultivieren. Zusätzlich charakterisiert es die Struktur-Funktions-Beziehung des epidermalen Barrieremodells. Die biologischen Reaktionen der rekonstituierten menschlichen Epidermis auf proinflammatorische Reize werden ebenfalls vorgestellt.

Kultivierung einer dreidimensional rekonstruierten menschlichen Epidermis im großen Maßstab

Descemet's Stripping Only ist ein experimentelles Verfahren, bei dem Patienten mit zentralen Hornhautguttae, die aus Fuchs Endothelial Corneal Dystrophy resultieren, Descemets Membran für periphere Zellen abgestreift haben, um die Endothelschicht zu regenerieren. Wir stellen eine neuartige Methodik vor, die DSO in dystrophischen menschlichen Hornhäuten ex vivo mit beschleunigter Heilung simuliert, die durch eFGF1 (NM141) stimuliert wird.

Ein menschliches Hornhautorgan-Kulturmodell des Descemet-Strippings nur mit beschleunigter Heilung, stimuliert durch den künstlichen Fibroblasten-Wachstumsfaktor 1

Die Untersuchung der Wundheilung im Zusammenhang mit Muskel-Skelett-Verletzungen erfordert oft die Beurteilung von In-vitro-Interaktionen zwischen Schwann-Zellen (SCs), Keratinozyten und Fibroblasten. Dieses Protokoll beschreibt die Isolierung, Kultivierung und Charakterisierung dieser Primärzellen aus der menschlichen Vorhaut.

Isolierung, Kultur und Charakterisierung von primären Schwann-Zellen, Keratinozyten und Fibroblasten aus der menschlichen Vorhaut

Dieses Protokoll beschreibt, wie die Kontraktilität in adulten humanen primären Kardiomyozyten aus Spenderherzen mit dem MyoBLAZER-System gemessen werden kann, einer zuverlässigen Plattform zur Beurteilung arzneimittelinduzierter Veränderungen der Kontraktilität während der präklinischen Entwicklung.

Messung der Herzkontraktilität in isolierten adulten humanen primären Kardiomyozyten

Hier stellen wir Ihnen kostengünstige und einfache Verfahren vor, um verschiedene 3D-Hautmodelle für die Routineforschung in einem Zellkulturlabor einzuführen. Forscher können Modelle erstellen, die auf ihre Bedürfnisse zugeschnitten sind, ohne auf kommerziell erhältliche Modelle angewiesen zu sein.

Aufbau von Hautmodellen für zahlreiche Anwendungen - von der zweidimensionalen (2D) Monokultur bis zur dreidimensionalen (3D) Multikultur

Erfahren Sie die Messung dynamischer mechanischer Steifigkeit und Trocknungsspannungen in ex vivo humanem Stratum corneum. Diese Methode ermöglicht die schnelle Bewertung von Hauteigenschaften nach chemischen Behandlungen mit weniger Gewebe.

Messung und Modellierung Kontraktile Trocknung im Bereich Human Stratum corneum

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